API2-MALT1融合基因变异体在粘膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤中的分布及凋亡的关系

目的探讨API2-MALT1融合基因变异体在粘膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone B—cell lymphoma of mucosa—associated lymphoid tissue，MALT)中的分布特点及其转录与肿瘤凋亡的关系。方法将逆转录-聚合酶链反应和巢式聚合酶链式反应结合，检测62例不同部位MALT淋巴瘤中API2-MALT1融合基因的多种变异体；通过TdT介导脱氧核苷酸缺口末端标记技术进行肿瘤细胞的原位凋亡检测；通过逆转录-聚合酶链反应和免疫组化染色检测API2的mRNA和蛋白水平。结果62例MALT淋巴瘤中28例检出API2-MALT1融合基因(45．16％)，为变异体A1446-M1123或A1446-M814，但未检出A1446-M541和A1446-M1150。A1446-M1123(18／28)的检出明显多于A1446-M814(10／28)。融和基因转录在甲状腺MALT淋巴瘤中检出最低，在其它部位的分布无差异。在API2-MALT1^ 组(API2-MALT1mRNA表达阳性组)肿瘤凋亡水平明显高于API2-MALT1^-组(API2-MALT1mRNA表达阴性组)，API2的mRNA和蛋白水平低于阴性组。A1446-M1123^ 与A1446-M814^ 病例之间凋亡和API2的变化无差异。结论MALT淋巴瘤中t(11；18)(q21；q21)的发生有部位差异，A1446-M1123可能是中国人MALT淋巴瘤中API2-MALT1融合基因变异体的主要类型。API2-MALT1融合基因转录与MALT淋巴瘤的凋亡水平和API2的变化有关。     

人脐静脉内皮细胞清除补体攻膜复合物的机制

目的：探讨内皮细胞清除补体攻膜复合物（MAC）的途径及其清除动力学，方法：原代培养的人脐静脉内皮细胞以RH414荧光标记质膜双层，0℃组装亚溶剂量的MAC，37℃复苏后，LSCM实时监MAC沉积诱导的质膜囊泡化形成和胞吞，胞吐情况,流式细胞仪定量检测内皮细胞表面MAC抗原的清除情况，结果：MAC沉积后，内皮细胞有的质膜囊泡化形成，囊泡以胞吞和胞吐2种方式离开细胞，并以前者占优，37度条件下，内皮细胞清除表面MAC的半衰期约为5min。结论：内皮细胞可通过胞吞和胞吐2种机制清除细胞表面沉积的MAC，并以胞吞方式为主。     

EB病毒LMP2A特异性CTL的体外诱导及分析

用EBV LMP2A重组痘苗病毒 (rVV LMP2A )转染人树突状细胞 (DC ) ,转染后的DC分别在第 1、 7、 14天刺激相同MHC背景的T细胞 ,在IL 2作用下诱导LMP2A特异性CTL。用LDH释放法检测CTL杀伤活性 ;流式细胞术 (FACS )检测CTL诱导分化过程中CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD5 6 + 等细胞的分群变化 ;RT PCR检测细胞分化过程中FasLmRNA表达 ;生物活性法检测功能性细胞因子IFN γ的分泌。结果显示本法诱导的CTL对靶细胞有特异性杀伤活性 ,第 2次和第 3次DC刺激后杀伤活性有所上升 ;在CTL诱导分化的第 7、 14、 2 1天细胞分群以CD4 + 、CD8+ 细胞为主 ;RT PCR证实所诱导的细胞内有FasLmRNA的表达 ;随细胞培养天数的增加IFN γ分泌增加 ,在第 14天达到较高水平。研究表明重组痘苗病毒载体rVV LMP2A转染的DC刺激T细胞可诱导出EBV LMP2A特异性CTL。     

脑卒中后癫痫60例临床分析

目的探讨脑卒中癫痫的，I岳床特点及发病机制。方法对1000例脑卒中患者中60例继发性癫痫患者的临床资料进行回顾性分析。结果脑卒中癫痫的总发生率6．00％，卒中后早期癫痫的发生率为53．33％（32／60），晚期发生率为46．67％（28／60），以部分发作为最多占65．00％（39／60），卒中后癫痫的发生率与病灶部位有关，皮质病灶较易发生卒中后癫痫，皮质（10．65％）与皮层下（2．73％）比较差异有显著意义（P〈0．05），而不同卒中类型癫痫发生率差异无显著意义（P〉0．05）。结论脑卒中是老年人癫痫发作的最常见原因，皮层病灶较易发生癫痫。     

Opa相互作用蛋白5在胰腺癌中的表达及其对PANC-1细胞增殖的影响

目的探索Opa相互作用蛋白5(OIP5)在胰腺癌中的表达及其对PANC-1细胞增殖的影响。方法通过数据库分析OIP5在胰腺癌组织及癌旁组织中的表达;用实时定量PCR(RT-qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测人胰腺癌细胞系MIAPaCa-2、PANC-1、KP-3、BxPC-3细胞中OIP5 mRNA和蛋白表达;构建OIP5基因沉默质粒的慢病毒(pGCSIL-shOIP5)和对照质粒慢病毒(pGCSIL-shCtrl),分别感染PANC-1细胞,分为OIP5基因沉默组和shCtrl对照组,5 d后采用RT-qPCR和Western blot测定慢病毒敲低效率,流式细胞计量术检测细胞凋亡;OIP5基因沉默组和shCtrl对照组连续5 d进行MTT检测和细胞计数;OIP5基因沉默组和shCtrl对照组孵育10 d形成集落,Giemsa染色分别集落总数。结果胰腺癌中OIP5 mRNA表达显著高于正常胰腺组织(P<0.05),OIP5高表达患者的总存活率显著低于OIP5低表达患者(P<0.05),且其无病生存率也显著降低(P<0.05);OIP5在MIAPaCa-2、PANC-1和KP-3中表达较高,而在BxPC-3细胞系中的表达较低;MTT检测结果显示OIP5沉默在第4和第5天显著降低了PANC-1细胞的增殖速率(P<0.01);OIP5沉默后细胞集落数(平均为9个)显著低于shCtrl对照组中的数量(平均为40个)(P<0.01);OIP5沉默后PANC-1细胞凋亡比例为8.3%显著高于shCtrl的4.5%(P<0.01)。结论OIP5在胰腺癌细胞系中异常高表达,OIP5基因可调控胰腺癌PANC-1细胞的增殖、凋亡以及集落形成,提示OIP5可能在胰腺癌发病机制中作为癌基因发挥作用,从而为胰腺癌的靶向治疗提供了潜在的生物标志物。     

借助移相法采用多部CCD数码相机提高帧率的技术

对于科学研究工作来说，时间分辨率和空间分辨率都是十分重要的，在设计相应的图像处理系统时必须两者兼顾。对于生命科学及工业等领域而言，希望图像处理系统不仅有较高的时间分辨率，还要有较高的空间分辨率。本文提出一种利用多部CCD数码相机、采用移相法获取高分辨牢和高摄录帧率的技术，此技术可应用于普通CCD数码相机组成的复合摄录系统。     

Four-Dimensional Computerized Tomography （4D-CT） Reconstruction Based on the Similarity Measure of Spatial Adjacent Images

Objective：To investigate the feasibility of a 4D-CT reconstruction method based on the similarity principle of spatial adjacent images and mutual information measure. Methods：A motor driven sinusoidal motion platform made in house was used to create one-dimensional periodical motion that was along the longitudinal axis of the CT couch. The amplitude of sinusoidal motion was set to an amplitude of ±1 cm. The period of the motion was adjustable and set to 3.5 s. Phantom objects of two eggs were placed in a Styrofoam block, which in turn were placed on the motion platform. These objects were used to simulate volumes of interest Undergoing ideal periodic motion. CT data of static phantom were acquired using a multi-slice general electric （GE） LightSpeed 16-slice CT scanner in an axial mode. And the CT data of periodical motion phantom were acquired in an axial and cine-mode scan. A software program was developed by using VC ＋ ＋ and VTK software tools to resort the CT data and reconstruct the 4D-CT. Then all of the CT data with same phase were sorted by the program into the same series based on the similarity principle of spatial adjacent images and mutual information measure among them, and 3D reconstruction of different phase CT data were completed by using the software. Results：All of the CT data were sorted accurately into different series based on the similarity principle of spatial adjacent images and mutual information measures among them. Compared with the unsorted CT data, the motion artifacts in the 3 D reconstruction of sorted CT data were re- duced significantly, and all of the sorted CT series result in a 4D-CT that reflected the characteristic of the periodical motion phantom. Conclusion：Time-resolved 4D-CT reconstruction can be implemented with any general multi-slice CT scanners based on the similarity principle of spatial adjacent images and mutual information measure. The process of the 4D-CT data acquisition and reconstruction were not restricted to the hardware or software of the C     

HLA-DR、DQ等位基因与精神分裂症相关性的研究

目的 证明HLA-DR、DQ等位基因与精神分裂症的发病密切相关。方法 HLA-DR、DQ等位基因检测：PCR-SSP分型。结果 发现在大连地区随机选择的精神分裂症患者的HLA-DQ8基因的频率(9．0％)明显高于正常对照(2．5％)。精神分裂症患者的HLA-DR、DQ等位基因的某些位点与免疫指标的改变有相关性。结论 ①HLA-DQ8基因与精神分裂症有关联，可以认为HLA-DQ8基因可能是精神分裂症的易感基因。②HLA-DR、DQ等位基因的某些组合可能是精神分裂症发病的危险组合模式，对预测精神分裂症的基因易感性具有潜在的应用价值。③精神分裂症的免疫指标的改变与HLA-DR、DQ等位基因的某些位点有相关性，说明精神分裂症与它的免疫指标的变化可能有内在的联系。     

IV型II类反式激活因子基因新变异体的克隆、鉴定和功能测定

为获取有功能的IV型II类反式激活因子基因 (CIITA IV ) ,诱导肿瘤细胞表达MHCII类分子 ,从IFN γ刺激的THP 1细胞中以RT PCR获得CIITA IV ,将其连接到pGEMT easy载体。对所构建的pcDNA3 1 CIITA IV型表达载体进行反复测序后发现 ,所获得的CIITA IV基因存在结构变异 ,在 2 87位插入了 3个核苷酸TAG ,使 2 86 2 88位的AAG改变成为ATAGAG(2 86 2 90 ) ,并引起其他 8个座位核苷酸 (及推导的氨基酸残基 )发生改变。将表达载体转入原先不表达MHCII类分子的HeLa细胞中 ,检测到所获得的IV型CIITA变异体具有诱导人II类分子HLA DR表达的能力。空载体和CIITA IV基因导入的HeLa细胞中 ,DR阳性细胞百分率分别为 0 0 1 %和 37 6 4 %。该基因已从GenBank得到登录号 ,表明这是一个具有诱导HLA DR分子表达功能的IV型CIITA新基因。     

db-cAMP对转化细胞增殖抑制及其对CaM水平和PKⅡ活性的影响

目的　探讨双丁酰 环核苷酸 (db cAMP)对转化细胞增殖及细胞表型作用的机理。　方法　以流式细胞光度术 (flowcytometry ,FCM)、软琼脂集落形成、放射免疫、Northern印迹和激酶活性分析等方法观察db cAMP对转化的C3H1 0 T1 2 小鼠成纤维细胞增殖、细胞表型、钙调素 (calmodulin ,CaM)表达及蛋白激酶Ⅱ (proteinkinaseⅡ ,PKⅡ )活性的影响。　结果　db cAMP(1mmol L)使C3H1 0 T1 2 转化细胞增殖及软琼脂集落形成能力受到显著抑制 ,转化细胞中CaM的表达及PKⅡ活性明显高于正常细胞 ,经db cAMP处理后也受到明显抑制。　结论　细胞转化及cAMP的诱导分化作用与PKⅡ活性的改变有密切相关性