骨碎补总黄酮对牙周炎大鼠牙周组织中白细胞介素-6和骨钙素表达的影响

目的观察骨碎补总黄酮对牙周炎大鼠牙周组织中白细胞介素-6(IL-6)和骨钙素(BGP)水平的影响,探讨其治疗牙周炎的机制。方法实验采用SPF级雄性SD大鼠54只,随机分为3组:正常组,牙周炎组(参照吴亚菲等的方法复制大鼠实验性牙周炎模型),骨碎补总黄酮组(复制大鼠实验性牙周炎模型,并于建模后第5周开始用骨碎补总黄酮灌胃)。各组大鼠分别在建模后第4,6,8周分批处死,各时点每组处死动物数为6只。免疫组织化学方法检测牙周组织中IL-6、BGP的表达。结果牙周炎组牙周组织IL-6水平在6周和8周时显著高于正常组(P<0.05);骨碎补总黄酮组牙周组织IL-6表达水平在6周和8周时显著低于牙周炎组(P<0.05),并与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。牙周炎组牙周组织BGP水平在6周和8周时显著低于正常组(P<0.05);骨碎补总黄酮组牙周组织BGP表达水平在6和8周时显著高于牙周炎组(P<0.05)。结论骨碎补总黄酮促进牙周炎大鼠牙周组织BGP的表达,抑制IL-6的表达,对牙周炎的治疗具有重要意义。     

二氮嗪后处理对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞保护作用的体外研究

目的研究线粒体ATP-敏感性钾通道（mitoKTP）开放剂二氮嗪（diazoxide,DZ）后处理对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞的影响。方法体外培养原代成年大鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,随机分为5组：Normal组（在CO2培养箱中持续培养6h）;H／R组（缺氧3h复氧3h）;DZ组（缺氧3h复氧3h,在复氧5min时给予100mol／LDZ）;DZ＋5-羟葵酸盐（5-hydmxydecanoate,5-HD）组（缺氧3h复氧3h,在缺氧末给予100mol／L选择性mitoK。通道阻断剂5-HD,然后在复氧5min时给予100mol／LDZ）;5-HD组（缺氧3h复氧3h,在缺氧末给予100mol／L5-HD）。复氧3h末检测各组培养基中乳酸脱氢酶（LDH）漏出量和丙二醛（MDA）含量,TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数、测定心肌细胞收缩幅度。结果与Normal组相比,其他4组培养基中LDH漏出量和MDA含量明显升高,心肌细胞凋亡指数也显著增高,心肌细胞收缩幅度降低（P〈0．05）;与H／R组比较,DZ后处理使培养基中LDH漏出量及MDA含量减少、心肌细胞凋亡指数降低,复氧后心肌细胞收缩幅度明显增高（P〈0．05）,但是缺氧末即刻给予5-HD可以逆转DZ的作用（P〈0．05）;5-HD组与H／R组相比各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Dz后处理可以通过开放mitoK。通道对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞发挥保护作用。     

丹参浸膏真空带式干燥工艺的研究

目的研究并确定丹参浸膏真空带式干燥的最佳工艺条件。方法采用正交试验法和多指标综合评分法,以丹参浸膏干燥产品含水率和丹参浸膏干燥速率为考察指标,对影响丹参浸膏真空带式干燥过程的因素进行考察。结果丹参浸膏真空带式干燥的最佳工艺条件为丹参浸膏含水率40%,丹参浸膏进料速率1.5 mL/s,输送带速率5 cm/m in。结论采用真空带式干燥工艺生产丹参浸膏干燥颗粒,干燥产品含水率低,干燥速率快。     

人、兔、大鼠脂肪基质细胞的生物学性状对比

目的：探讨在同一质量控制条件下,人、兔、大鼠来源脂肪基质细胞(adipose tissue-derived stromal cells,ADSCs)的体外生物学性状的异同。方法：分离培养人吸脂来源ADSCs、兔及大鼠腹股沟皮下脂肪垫来源ADSCs,体外观察3种细胞原代和传代细胞的形态及生长情况,MTT法检测细胞增殖情况。以相同密度将第2代细胞接种于24孔板,并诱导其成骨及成脂向分化。成骨诱导培养基包含100 nmol/L地塞米松、50 μmol/L抗坏血酸二磷酸酯和10 mmol/L β-甘油磷酸钠,在成骨向诱导后的第3、7、14、21天行碱性磷酸酶染色,第14、28天行茜素红染色,定量分析3种细胞体外钙沉积能力。成脂向诱导培养基包含1 μmol/L地塞米松、10 μmol/L胰岛素、200 μmol/L 吲哚美辛和0.5 mmol/L异丁基黄嘌呤,在成脂向诱导后的第7、14天行油红O染色检测细胞的成脂分化状况。结果：3种来源的脂肪均可分离培养出“成纤维细胞样”细胞,均能成脂向分化和成骨向分化,但兔ADSCs在成骨向分化时碱性磷酸酶染色呈弱阳性,无明显钙结节形成,与其他两种细胞比较,兔ADSCs的成骨向分化能力较差。结论：与人来源和大鼠来源ADSCs比较,兔皮下脂肪来源ADSCs的体外成骨能力较差,将其用于体内成骨研究时需慎重。     

淫羊藿水提取液局部麻醉作用的研究

目的：研究淫羊藿水提取液(HE)的局部麻醉作用。方法：采用蟾蜍离体坐骨神经动作电位法、豚鼠皮丘法、椎管麻醉法、表面麻醉法。结果：5％、10％的HE可使蟾蜍离体坐骨神经动作电位消失,且与1％的盐酸普鲁卡因相当。1096、20％HE有浸润麻醉作用,而且肾上腺素可明显延长其局麻时间。其浸润麻醉效果与1％的盐酸普鲁卡因相当。20％、30％HE对家兔可产生明显的椎管内麻醉作用。10％、20％HE对家兔角膜具有一定的表面麻醉作用,其表面麻醉效果较1％的普鲁卡因更弱。结论：HE水提取液有明显的局部麻醉作用。     

外周血缺氧诱导因子-1αm RNA表达与结直肠癌侵袭转移的关系

目的探讨外周血缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达与结直肠癌侵袭转移的关系。方法采用荧光RT-PCR技术检测我院2010年1月～2010年10月间40例结直肠癌患者及20例健康对照者外周血中HIF-1αmRNA表达情况。结果 40例结直肠癌患者中检测出HIF-1αmRNA表达的17例,检出率为42.5%(17/40),两组比较差异有统计学意义(P<0.01);且HIF-1αmRNA表达与肿瘤分期密切相关(P<0.05)。结论外周血HIF-1αmRNA可作为检测结肠癌患者肿瘤细胞转移的分子标志之一。     

9可溶性髓样细胞触发受体1在脓毒症中的表达和临床意义

目的探讨血清可溶性髓样细胞触发受体1（sTREM-1）在脓毒症中的表达和临床应用价值。方法采用ELISA检测68例脓毒症患者、40例非感染全身炎症反应综合征（SIRS）患者和20例正常对照血清sTREM-1、降钙素原（PCT）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细9胞介素10（IL-10）水平,免疫比浊法检测血清高敏C反应蛋白（hsCRP）水平,分析比较sTREM-1、PCT和hsCRP对脓毒症的诊断和预后判断价值。序贯器官衰竭估计（SOFA）评分系统评价脓毒症患者的严重程度,对sTREM-1、PCT和hsCRP与SOFA评分、TNF-α和IL-10之间分别进行相关分析。结果各组血清sTREM-1、PCT、hsCRP、IL-10水平和IL-10/TNF-α比值比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;各组血清TNF-α水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）。脓毒症组sTREM-1、PCT及hsCRP水平较非感染SIRS组显著升高（P〈0.05）。根据ROC曲线分析,sTREM-1、PCT和hsCRP对脓毒症及非感染SIRS进行诊断的曲线下面积（AUC）分别为0.772（95%CI 0.674～0.871）、0.718（95%CI 0.601～0.835）和0.664（95%CI 0.532～0.797）。脓毒症患者中死亡组sTREM-1和PCT水平较存活组显著升高（P〈0.01）,hsCRP水平与存活组间差异无统计学意义（P〉0.05）。脓毒症患者sTREM-1水平与SOFA评分、血清IL-10和IL-10/TNF-α比值呈明显正相关（r值分别为0.453、0.301和0.417,P均〈0.05）;与血清TNF-α无明显相关性（P〉0.05）。PCT与SOFA评分呈明显正相关（r=0.436,P〈0.05）;hsCRP与SOFA评分无明显相关性（P〉0.05）。结论血清sTREM-1水平不但有助于脓毒症的诊断,而且在一定程度上能作为判断疾病严重程度及预后的指标。sTREM-1和PCT可能在脓毒症诊断、预后判断和病情评估方面优于hsCRP。     

人工肩关节置换与锁定钢板内固定治疗复杂肱骨近端骨折的疗效分析

目的：探讨应用人工肩关节置换术和锁定钢板内固定术治疗复杂肱骨近端骨折的临床疗效.方法：接受治疗的复杂肱骨近端骨折37例,按照Neer分型,三部分骨折21例,四部分骨折16例.采用随机数余数分组方法,将患者随机分为人工肩关节置换组（19例）和锁定钢板内固定组（18例）.采用Neer评分及美国肩肘外科医师协会评分（ASES）对两组间的临床疗效进行评价.结果：34例患者获得随访,按Neer评分标准评定,人工肩关节置换组优7例,良8例,可2例,优良率88.2%,评分平均（84.4±2.6）分;锁定钢板内固定组优7例,良7例,可1例,差2例,优良率82.3%,平均（85.8±3.2）分.两组疗效比较结果无统计学差异,P＞0.05.按照ASES评分,人工肩关节置换组术后6周平均68.53分,术后3月平均69.72分,术后6月平均70.91分;锁定钢板内固定组术后6周平均61.73分,术后3月平均69.35分,术后6月平均71.26分.两组术后6周患肢功能评分结果有统计学差异,P＜0.05;术后3月及6月两组患肢功能评分结果无统计学差异,P＞0.05.结论：采用人工肩关节置换术与锁定钢板内固定术治疗复杂肱骨近端骨折均可获得较为满意的疗效.人工肩关节置换术可在术后更快恢复肩关节功能,但长期疗效并无明显优势.     

原发性肝癌患者外周血自然杀伤细胞受体NKG2D的表达及意义

目的 探讨原发性肝癌患者外周血自然杀伤(NK)细胞受体NKG2D表达的变化,并分析其对NK细胞杀伤活性的影响.方法 用流式细胞仪分析20例原发性肝癌、23例乙型肝炎后肝硬化、20例慢性乙型肝炎及20名健康者的外周血NK细胞数量及其NKG2D的表达情况,并用酶标仪检测各组样本NK细胞的细胞毒活性.结果 原发性肝癌患者的NK细胞杀伤率、NK细胞NKG2D的表达率(中位数)、NKG2D+NK细胞数(中位数)、NK细胞中NKG2D的表达水平(中位数)及NK细胞数[(25±7)%、6%、0.7×107/L、15、(1.1±0.6)×108/L]均明显低于正常组[(63±7)%、36%、8.3×107/L、116、(27±1.1)×108/L]和乙肝组[(41±8)%、16%、2.8×107/L,49、(1.9±1.1)×108/L],差异均有统计学意义(均P＜0.05);与肝硬化组[(29±10)%、7%、0.6×107/L、29、(1.5±1.2)×108/L]比较也略低,但只有NK细胞NKG2D的表达水平两组差异有统计学意义(P＜0.05),其余两组间差异均无统计学意义(均P＞0.05).NK细胞的活性与NK细胞数、NK细胞NKG2D的表达率、NKG2D+NK细胞数、NK细胞NKG2D的表达水平均呈正相关关系(r=0.657、0.770、0.927、0.734,均P＜0.01).结论 原发性肝癌患者外周血NK细胞活性及其细胞表面NKG2D的表达明显降低,NKG2D的表达与NK细胞的活性密切相关,提高NK细胞表面NKG2D的表达水平可为原发性肝癌的过继免疫治疗开创新的思路.     

HIV-1感染相关细胞因子激活BC-3细胞中潜伏感染的人类疱疹病毒8型的复制研究

目的:研究证实HIV-1感染相关细胞因子能够诱导原发性渗出性淋巴瘤(PEL)的另一细胞系BC-3中潜伏的人类疱疹病毒8型(HHV-8)发生可溶性周期复制。方法:将TNF-α和HIV-1感染CD4~+ T淋巴细胞常释放的细胞因子IFN-γ、HGF/SF、OSM,连续加入到BC-3细胞中作持续刺激,分别于刺激后的第3天和第7天收集BC-3细胞。采用免疫组化染色法(IHC)检测HHV-8免疫原性蛋白ORF59表达;电子显微镜观察病毒的形成;Northernblot和 定量PCR检查次要衣壳蛋白ORF26 mRNA转录。结果:IFN-γ、HGF/SF、OSM和TNF-α均能不同程度上调ORF26 mRNA表达。其中,IFN-γ刺激BC-3细胞第7天,HHV-8 ORF26 mRNA表达上升了6.1倍;ORF59蛋白表达上升到20％,与此同时,BC-3细胞中可观察到成熟的病毒粒子。另外,TNF-α刺激BC-3细胞第7天,HHV-8 ORF26 mRNA表达也上升了2.5。结论:TNF-α和HIV-1感染释放细胞因子能够诱导PEL另一细胞系BC-3中潜伏的HHV-8发生可溶性周期复制。