HPLC-MS/MS同时测定广金钱草中8种成分在大鼠胆汁中的浓度及其排泄动力学研究

建立同时测定灌胃给予大鼠广金钱草提取物后胆汁中7种黄酮和1种酚酸类化合物浓度的HPLC-MS/MS,并用于胆汁排泄研究。大鼠灌胃给予广金钱草提取物后,分别在0~1,1~2,2~4,4~6,6~8,8~12,12~24 h时间段收集胆汁。色谱柱采用Diamonsil C18column(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温40℃。以甲醇-0.01%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.8 m L·min~(-1)。质谱采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式下检测,多反应离子监测(MRM)模式进行定量。结果表明8种成分在测定浓度范围内线性关系良好(r≥0.991 5),日内、日间精密度RSD15%,准确度RE-15%~15%,稳定性良好。提取回收率63.2%,内标归一化的基质因子RSD均未超过15%,符合要求。大鼠胆汁排泄研究结果显示,8种成分在胆汁中的原型排泄率均比较小,并且不同个体之间差别较大。该研究方法灵敏度高,选择性好,样品处理简单,可用于灌胃给予大鼠广金钱草提取物后胆汁中8种成分的排泄动力学研究。     

傅青主火丹神方加味对肝经郁热型带状疱疹患者T细胞亚群及相关细胞因子的调控作用

目的:通过观察傅青主火丹神方对带状疱疹患者T细胞亚群及相关细胞因子的影响,探讨其临床疗效及机制。方法:选择136例带状疱疹患者随机分为观察组和对照组,每组68例。对照组予常规西药治疗,观察组加用傅青主火丹神方治疗,观察两组患者临床疗效,并测定比较两组患者治疗前后T细胞亚群,白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,实时荧光定量PCR测定血清信号转导和转录激活因子3(STAT3),磷酸化-STAT3(p-STAT3)mRNA水平。结果:观察组的总有效率为97.1%,明显高于对照组的83.8%(χ2=5.146,P0.05)。治疗后,两组患者的疼痛视觉(VAS)评分均较治疗前明显降低(P0.05),观察组较对照组下降更为明显(P0.05)。随访6个月,观察组的后遗神经痛发生率5.9%,明显低于对照组的26.5%(P0.05)。治疗后,两组患者CD3~+,CD4~+细胞比例均较治疗前明显升高(P0.05),观察组CD8+细胞明显降低(P0.05),CD4~+/CD8+明显升高(P0.05),且高于对照组(P0.05)。治疗后,两组患者IL-4,IL-6均较治疗前明显降低,TNF-α明显升高(P0.05),观察组变化更加明显(P0.05)。治疗前,两组患者的STAT3,pSTAT3在同一水平。治疗后,两组患者的STAT3,p-STAT3均较治疗前明显降低(P0.05),观察组降低更加明显(P0.05)。结论:在常规西药基础上,加用傅青主火丹神方治疗能更好的减轻临床症状,提高临床疗效,其机制可能通过调节机体免疫功能,减轻两面神激酶(Janus kinase,JAK)/STAT通路激活,减少炎症因子释放,并进一步减轻炎症反应有关。     

护心康片治疗不稳定型心绞痛36例临床观察

目的:观察护心康片治疗不稳定型心绞痛(UAP)的临床疗效及对冠状动脉血流量的影响。方法:选取不稳定型心绞痛且中医辨证属痰瘀阻络证患者73例,随机分为治疗组36例和对照组37例,对照组采用西药常规治疗,治疗组在对照组治疗基础上加服护心康片治疗。疗程4周,观察比较2组临床疗效及左冠状动脉(LAD)血流量。结果:总有效率治疗组为94.44%,对照组为86.49%,组间比较,差异有统计学意义(P0.05);2组冠脉血流量治疗前后组内比较及治疗后组间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:护心康片可提高不稳定型心绞痛痰瘀阻络证患者的冠脉血流量,改善患者症状,具有一定的临床推广意义。     

白色念珠菌黏附相关受体及基因的研究

白色念珠菌又称白假丝酵母菌，是人体常驻菌，是一种条件致病菌。它可引起浅表或深部的白色念珠菌病。在致病过程中，其黏附是第一步，也是最关键的一步。因此，明确其黏附相关机制，对预防及控制白色念珠菌病具有重要意义。     

mcpr1基因的真核表达载体的构建与鉴定

目的 :构建腭裂相关基因mcpr1与pcDNA3 .1/V5 HisB融合的高效真核表达载体 ,为研究mcpr1基因的功能奠定基础。方法 :根据mcpr1基因的核苷酸序列 ,设计并合成引物 ,通过PCR方法 ,从包含有mcpr1基因全长的克隆载体T easy/mcpr1中 ,扩增出该基因外显子片段 ,将扩增产物连接到真核表达载体pcDNA3 .1/V5 HisB中。对该重组体进行PCR和酶切鉴定 ,以及测序验证。结果 :以重组体为模板扩增出40 0bp左右的特异性基因片段 ,与mcpr1基因片段大小一致 ,酶切鉴定也显示有 40 0bp左右的基因片断。测序结果显示与已知基因序列一致。结论 :成功构建mcpr1基因的真核表达载体 ,为下一步研究mcpr1基因的功能奠定了基础。     

外科模板在游离腓骨瓣修复上颌骨缺损术中的应用

目的 探讨外科模板在上颌骨切除同期自体腓骨瓣移植修复术中的作用。方法 7例因上颌骨肿瘤需行上颌骨切除术并同期自体腓骨瓣修复的患者，术前取研究模型，根据拟行的手术范围进行模型外科设计，确定牙槽突缺损范围，并将模型修整成需要重建的理想解剖形态，制作模板。外科医生在术中根据模板对腓骨瓣塑形，并确定腓骨瓣固定的位置。术后取研究模型观测腓骨瓣的就位情况，三维CT评价腓骨与下颌骨的相对位置关系。结果 经过外科模板的术中定位，腓骨瓣与下颌骨达到正常相对位置关系，垂直向间隙适合常规叉齿或种植义齿修复。患者戴用义齿后的咀嚼效率明显提高。结论 外科模板是修复医生和外科医生之间有效的交流载体，为患者术后功能和外形的恢复创造了有利条件。     

人体微生物组在辅助2型糖尿病诊疗中的潜在应用

人体微生物组是指人体体表及内部的微生物的遗传信息总和,与人类健康与疾病状态存在密切关系。口腔和肠道微生物是最具多样化的微生物群落,两者可以交互影响,在疾病发生发展过程中共同发挥作用,并可以实时反映机体的健康与疾病状态。2型糖尿病是由遗传和环境因素引起的代谢紊乱,最近的研究指出微生物与糖尿病存在关联。本文结合近期的研究进展,就2型糖尿病患者口腔微生物和肠道微生物的特征进行综述,有望为探索基于微生物组特征的2型糖尿病风险预测、诊断和预后预测的疾病模型的建立提供参考依据。     

Microbial leakage evaluation of the continuous wave of condensation

Coronal leakage has been recognized as a cause of pulpal and periradicular disease. Although cleaning and shaping of the root canal system is considered paramount, obturation of the system is an important step in endodontic success. The purpose of this study was to evaluate coronal bacterial leakage in teeth obturated with the System B continuous wave of condensation technique, followed by an Obtura II backfill, versus teeth obturated using the lateral condensation technique. Sixty single-rooted bilaterally matched teeth were evaluated in this study. An anaerobic bacterial leakage model was used. Results indicate that microbial coronal leakage occurs more quickly using lateral condensation than with the System B continuous wave of condensation and Obtura II backfill. This difference was statistically significant (p < or = 0.05). However, there was no statistical difference between groups 1 and 2 in the numbers of teeth that demonstrated bacterial leakage at the end of the study.     

变形链球菌CH43变链素Ⅰ基因片段的克隆及表达

目的:获得编码变形链球菌CH43变链素Ⅰ前体肽基因片段,并诱导其在不杀伤工程菌的前提下高效表达。方法:用PCR技术从变形链球菌CH43基因库中扩增出编码变链素Ⅰ成熟肽mutA基因片段相应大小的DNA片段,将片段与pMD18 T载体连接后测序。将测序正确的mutA按照BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆入原核表达载体pProEX,将连接产物转化入E.coliDH5α,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白。以IPTG浓度、A600值、诱导时间各梯度优化表达。结果:PCR获得的mutA序列与GenBank报道的一致(为147bp)。优化了诱导条件使重组载体在E.coliDH5α中高效表达,融合蛋白经SDS PAGE,在相对分子质量为5. 7×103处有特异的蛋白条带,在A600为1. 666时,加入IPTG至终浓度为1. 0mmol/L,诱导6h,目的蛋白表达量最高,占菌体总蛋白量的20%左右。结论:成功克隆变形链球菌CH43变链素ⅠmutA基因片段,并在E.coliDH5α中高效表达。