噬菌体抗体库固相筛选条件的初步研究

目的:探讨噬菌体抗体库的固相筛选条件,为筛选方案的设计提供实验依据。方法:利用多种针对HEVNE2蛋白的特异性噬菌体人源抗体和非特异性噬菌体人源抗体,对噬菌体抗体与抗原的结合时间、抗原包被的浓度、洗涤强度和洗脱方式等多种筛选的条件进行初步探索。结果:阳性噬菌体抗体与抗原反应1min,就可较好结合,洗涤次数为20～30次、洗涤液的pH为5时,筛选得到的阳性率最高。包被抗原的浓度对筛选的阳性率没有明显影响,用10mg/L抗原竞争洗脱60min,可得到较高的阳性率。结论:噬菌体抗体库的筛选是一个非常复杂的过程,其中的各个条件之间有着密切的联系,应该根据具体情况进行调整。     

聚合酶链反应检测尖锐湿疣皮损内人乳头瘤病毒

１３个皮损组织取自１３例尖锐湿疣（ＣＡ）患者，１３例基底细胞上皮瘤（ＢＣＣ）组织作为对照，用溴化钠液分离表真皮，从组织中提出的 ＤＮＡ和溴化钠液分别用聚合酶链反应检测 ＨＰＶ ＤＮＡ。１１例ＣＡ表皮中检出 ＨＰＶ ＤＮＡ，ＨＰＶ６有７例，ＨＰＶ１１有４例。３例ＣＡ真皮中发现有ＨＰＶ ＤＮＡ，ＨＰＶ６有２例，ＨＰＶ１１有１例。２例标本因溴化钠液被ＨＰＶ污染未作统计。在ＢＣＣ组织中未发现有ＨＰＶ ＤＮＡ。在某些ＣＡ真皮内含有 ＨＰＶ ＤＮＡ可以解释散发病例的复发性。     

热休克蛋白70对兔未成熟心肌和心肌间质的影响

目的: 探讨热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌和心肌间质的影响. 方法:健康新生长耳大白兔12只随机分为2组. 对照组(C组):ip生理盐水0.4 mL,24 h后取离体心脏,常规建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注15 min转为工作心15 min后停灌45 min,恢复灌注15 min改为工作心30 min;实验组(E组):ip去甲肾上腺素, 24 h后取离体心脏,方法同对照组. 测定心肌细胞中HSP70含量、血流动力学指标、心肌含水量(MWC)、心肌肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET) 含量、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性及其Ca2 含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m,心肌超微结构. 结果:E组HSP70含量明显高于C组(P<0.01);MWC低于C组(P<0.05);ATP含量、SOD活性、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性、[ATP]m, HP含量优于C组(P<0.01),MDA含量、CK, LDH漏出率、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 含量、ET含量低于C组(P<0.01),心肌超微结构损伤较C组明显减轻. 结论:HSP70对缺血再灌注未成熟心肌和心肌间质具有明显的保护作用.     

非气腹腹腔镜手术的临床应用

目的 探讨非气腹腹腔镜手术的临床应用价值。方法 回顾分析91例非气腹腹腔镜手术的临床资料。结果 91例非气腹腹腔镜手术中，胆囊切除术51例，阑尾切除术15例，联合手术10例，手助腹腔镜结直肠癌切除手术15例。全组均获成功，未发生吻合口瘘等严重并发症，无手术死亡。结论 非气腹腹腔镜手术是一种实用、安全、可行的微创手术方法，可完成较复杂的肿瘤根治性手术，具有较高的临床应用价值。     

关节镜下运用4股腘绳肌腱同期重建前后交叉韧带损伤

目的 关节镜下运用Intrafix和可吸收界面螺钉固定自体4股腘绳肌腱，同期重建前交叉韧带（anterior cruciate ligament，ACL）、后交叉韧带（posterior cruciate ligament，PCL），评估其疗效。方法 ACL、PCL同时损伤的患者16例，关节镜下以自体4股胭绳肌腱作为重建移植物，应用可吸收界面螺钉固定移植物股骨端，Intrafix钉鞘和可吸收锥形钉固定胫骨端，同期行ACL和PCL损伤重建术。7例行内侧副韧带修补，4例行外侧副韧带复合结构修复，2例行内外侧同时修复。所有患者按照国际膝关节评分委员会（International Knee Documentation Committee，IKDC）评分标准进行术前评估，均为D级。术前Lysholm评分为（36．5±3．7）分。结果 随访时间为12～18个月，平均14．6个月。终末随访时，IKDC总体评价：A级6例（38％），B级9例（56％），C级1例（6％），无D级患者。Lachman试验0～2mm8例；3～5mm6例；6～10mm2例（P〈0．05）。屈70°前后总位移0～2mm10例；3～5mm5例；6～10mm1例（P〈0．05）。屈70°后位移0～2mm12例；3～5mm4例（P〈0．05）。术后2个月Lysholm功能评分为（90．4±2．9）分，终末随访时为（93．4±3．5）分，与术前相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论 关节镜下以自体4股胭绳肌腱作为移植物，应用可吸收界面螺钉、Intrafix钉鞘和可吸收锥形钉固定股骨胫骨端同期重建ACL和PCL损伤，有利于早期积极的功能康复，膝关节功能恢复满意。     

精浆尿酸的检测及其与精液参数的相关性研究

目的：建立精浆尿酸（UA）的检测方法并探讨精浆UA水平与精液参数的相关性。方法：根据检测血清UA的方法加以改良建立检测精浆UA的方法,并观察批内变异和不同技术人员检测结果之间的差异以评价方法的可接受性。同时分析138例男性精浆UA水平与患者年龄、禁欲时间、精液量、pH、精子密度、活动率、a＋b级精子百分率和正常形态精子百分率之间的相关性。结果：精浆UA检测方法的批内变异为9.16%,2位技术人员的检测结果没有显著性差异（P=0.541）。精浆UA水平与正常形态精子百分率呈正相关（r=0.350,P=0.025）,与精子活动率和a＋b级精子百分率有呈正相关的趋势（r=0.147和0.156,P=0.085和0.068）,而与精液分析其他参数如精液量、pH、精子密度、禁欲时间以及患者年龄等无相关性。结论：通过对血清UA检测方法加以改良可以建立可接受的精浆UA检测方法。精子形态学、活动率及a＋b级精子百分率可能与精浆UA水平高低有关。     

营养素食预防化疗患者便秘的效果观察

目的 观察营养素食预防化疗患者便秘的效果。方法 选择128例化疗患者，随机分为观察组和对照组各61例，对照组常规正常饮食，观察组于化疗开始当天实施营养素食．连续7～10d，比较两组患者便秘发生率及体重、血红蛋白、白蛋白等指标。结果　对照组便秘发生率显著高于观察组（P〈0．01）；两组化疗后营养指标比较，差异无显著性意义（均P〉0．05）。结论　营养素食对化疗患者便秘有较好的预防作用。     

Effects of α1-adrenergic receptor on the proliferation of cholangiocarcinoma cells

Objective To investigate the correlation between α1-adrenergic receptor and the pathological behavior of cholangiocarcinoma, and the effects of norepinephrine (NE) on the proliferation of cholangiocarcinoma cell line QBC939. Methods Thirty-six samples of cholangiocarcinoma were resected in Southwest Hospital from August 2002 to March 2008. The expression of α1-adrenergic receptor in the 36 samples of cholangiocarcinoma tissue and 4 samples of normal bile duct tissue were detected by SABC technique. The proliferation of cholangio-carcinoma cell line QBC939 was detected after processing the cells with NE, phentolamine and prazosin. All the data were analyzed by chi-square test. Results The high positive expression rate of α1-adrenergic receptor was 68% (17/25) in patients with lymph node metastasis, which was significantly higher than 9% (1/11) in patients without lymph node metastasis (χ2=10.604, P<0.05). The high positive expression rate of α1-adrenergic receptor was 85% (11/13) in patients with middle and low positioned cholangiocarcinoma, which was significantly higher than 30% (7/23) in patients with hilar cholangiocarcinoma (χ2=9.753, P<0.05). NE promoted the proliferation of cholangiocarcinoma cell line QBC939 by stimulating the expression of α1-adrenergic receptor, and in a concentration-dependent manner. The proliferative effect was weakened as time passed by, and it was eliminated by phentolamine and prazosin. Conclusions The expression of α1-adrenergic receptor is diverse due to lymph node metastasis and the location of the tumor, α1-adrenergic receptor with high expression may play an important role in the proliferation and metastasis of cholangiocarcinoma.     

阴茎包埋对海绵体内一氧化氮合酶的影响

目的:探讨阴茎包埋对海绵体内一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。方法:通过建立大鼠隐匿阴茎模型获得实验标本,分2个月组、4个月组和6个月组进行观测,每组80只大鼠。各阶段中包括包埋组(n=50)、假手术组(n=15)和正常组(n=15)。称量大鼠体重和海绵体重量后,采用化学比色法检测海绵体内NOS活性。结果:各阶段包埋组阴茎海绵体重量、体重及两者的比值与正常组和假手术组比较均无显著性差异(P>0.05);包埋降低大鼠阴茎海绵体组织的NOS活性(2个月组P>0.05,4个月组P<0.05,6个月组P<0.01)。结论:阴茎包埋可影响海绵体内NOS活性,且与包埋时间呈正相关,但对海绵体外观和重量无明显影响。     

重组人白细胞介素6对SW872脂肪细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨白细胞介素 6(IL 6)对SW872脂肪细胞增殖及凋亡的影响。方法　体外培养SW872脂肪细胞 ,0 .6mmol/L油酸诱导SW872前脂肪细胞分化 ,化学比色法检测细胞内三酰甘油的总量 ;油红O染色观察细胞内脂肪的聚积 ;MTT法检测不同浓度IL 6对SW872前脂肪细胞增殖活力的影响 ;流式细胞仪分析IL 6对SW872成熟脂肪细胞凋亡的影响。结果　 0 .6mmol/L油酸刺激 72h ,几乎 10 0 %SW872前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞 ,细胞内三酰甘油的含量明显增加 ,油红O染色胞浆内可见丰富的脂滴 ;5 μg/LIL 6对SW872前脂肪细胞的增殖没有影响 ,10～ 5 0 μg/LIL 6明显抑制SW872前脂肪细胞的增殖 ;IL 6对SW872成熟脂肪细胞的凋亡无影响。结论　IL 6能明显抑制SW872前脂肪细胞的增殖 ,其抑制效应呈剂量依赖性 ,表明IL 6可能与肥胖有关 ,高剂量IL 6可降低肥胖的程度。