基于ISSR标记的麻花艽遗传多样性分析

目的探讨秦艽基原植物之一麻花艽Gentiana straminea的遗传多样性,并构建DNA指纹谱。方法在其自然分布区广泛取样,共涉及西藏、青海、甘肃及四川等地28个居群83份样本,应用ISSR分子标记技术,POPGEN软件分析遗传信息参数,NTSYS软件构建亲缘关系UPGMA聚类图。结果从100条引物中筛出7条多态性好、条带清晰的引物用于ISSR分析。共检测到95个条带,其中多态性条带88个,多态性条带百分率(PPL)为92.63%;麻花艽居群间的期望杂合度(H_e)为0.288 2,多样性信息指数(I_m)为0.437 1,种群间基因分化系数(G_(st))为0.678 3,基因流(N_m)为0.237 1,遗传距离为0.074 3~0.490 0。UPGMA树将麻花艽居群主要分为2大支。结论麻花艽种群遗传多样性水平较高,居群间遗传多样性水平高于居群内;其遗传变异主要存在于居群间;遗传特性与地理分布具有一定相关性。该工作可为麻花艽品种鉴定、物种就地保护、探讨环境等因素对于遗传分化的影响及药材道地性研究提供基础资料。     

舒胃汤对功能性消化不良大鼠胃排空、血清NO、血浆SP的影响

目的:探讨舒胃汤对功能性消化不良大鼠胃排空、血清一氧化氮(nitric oxide,NO)和血浆P物质(Substance P,SP)的影响。方法:将大鼠随机分为舒胃汤低剂量组(舒低组)、舒胃汤高剂量组(舒高组)、中成药组(木香顺气丸组)、莫沙必利组、空白组、模型组。采用夹尾刺激方法制造FD模型。实验结束后检测胃排空,硝酸还原酶法检测血清NO含量,用放射免疫法检测血浆SP水平。结果:大鼠模型组与空白组比较胃排空延迟,血浆SP含量明显减少而NO明显升高(均P0.05)。给药各组大鼠与模型组比较胃排空(%)改善(均P0.05),NO(μmol/L)降低(均P0.05),SP含量(pg/mg)明显升高(均P0.05);舒高组与中成药组,胃排空改善(P0.05),NO降低(P0.05)。结论:舒胃汤能够促进胃排空,调节血清NO、SP水平的变化,可能是舒胃汤治疗FD恢复胃肠道运动功能的作用机制之一。     

HPLC-DAD法同时测定黄芪护肝丸中5种活性成分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定黄芪护肝丸中芍药苷、橙皮苷、五味子醇甲、大黄素和大黄酚5种活性成分含量的方法。方法:采用ZORBAX SB-C18色谱柱;流动相:甲醇(A)-0.1%磷酸的水溶液(B),梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1.0 m L·min-1;检测波长:芍药苷为230 nm,橙皮苷和五味子醇甲为217 nm,大黄素和大黄酚为254 nm。结果:芍药苷、橙皮苷、五味子醇甲、大黄素和大黄酚的线性范围分别为5.12~102(r=0.999 6)、10.4~207(r=0.999 8)、2.58~51.6(r=0.999 7)、3.22~64.4(r=0.999 8)、2.45~49.0μg·m L-1(r=0.999 8),平均加样回收率(n=6)分别为98.6%、99.2%、98.9%、98.3%、98.3%,RSD分别为1.1%、1.0%、1.3%、1.2%、1.2%。结论:本法专属性强,结果准确,重复性好,可用于黄芪护肝丸的质量控制。     

实脾固肾化瘀方治疗慢性肾炎疗效观察

目的观察实脾固肾化瘀方治疗慢性肾炎的临床疗效。方法 60例慢性肾炎患者随机分为两组。治疗组32例采用实脾固肾化瘀方治疗,对照组28例给予蒙诺口服,疗程3个月。观察两组治疗前后证候积分、24h尿蛋白定量和肾功能变化。结果治疗后,治疗组部分证候积分明显降低（P〈0.01）,且治疗组低于对照组（P〈0.01）;治疗组24h尿蛋白定量明显降低（P〈0.05）;两组肾功能变化无统计学差异（P〉0.05）;治疗组的临床疗效优于对照组（P〈0.05）。结论实脾固肾化瘀方治疗慢性肾炎有较好的临床疗效。     

新疆限定城乡40岁及以上人群低视力与盲的患病率及病因调查

目的 了解新疆维吾尔自治区城乡居民低视力与盲的患病率及病因构成,为地区性防盲、治盲提供资料和依据.方法 采用整群随机抽祥原则,以世界卫生组织盲目分级为标准,对新疆乌鲁木齐市及库车县农村抽取8295例进行低视力和盲的流行病学调查.结果 双眼低视力与盲的患病率分别为5.26％(城市3.65％,农村6.82％)和2.51％(城市1.56％,农村3.44％);男性双眼低视力与盲的患病率分别为5.47％和2.75％;女性双眼低视力与盲的患病率分别为5.10％和2.33％; 60岁～组及70岁～组低视力和盲的患病率增高明显.结论 城乡低视力与盲的患病率差异较大,致低视力和致肓眼病均以白内障为首位,其他致盲眼病依次为青光眼、眼底病、眼表疾病等.     

阿哌沙班的合成工艺研究

目的研究阿哌沙班的合成工艺。方法以环戊酮肟为原料,经重排、双氯取代、缩合、亲核取代3步反应得到关键中间体3-吗啉-4-基-1-(4-硝基苯基)-5,6-二氢-1H-吡啶-2-酮(5);再以对甲氧基苯胺为起始原料,经Japp-Klingmann反应得到中间体2-氯-2-[2-(4-甲氧基苯基)腙]乙酸乙酯(6);中间体5与中间体6经过1,3-偶极环加成、脱吗啉基、还原、酰胺化、环合、胺解6步反应得到目标化合物。结果与结论目标化合物的结构经1H-NMR、MS谱确证。总收率达32.5%(以环戊酮肟计)。与文献报道的工艺相比,该路线原料易得、操作简便、条件温和、收率较高,有利于工业化生产。     

新型鼻咽通气道联合超声引导下神经阻滞在骨科下肢手术中的应用

目的 评估新型鼻咽通气道联合超声引导下神经阻滞麻醉在骨科手术中供氧的有效性及呼气末二氧化碳分压(PetCO2)监测的准确性.方法 选取择期行骨科下肢手术的40例患者为研究对象,行腰丛+坐骨神经阻滞麻醉,轻度镇静下置入新型鼻咽通气道,连接供氧管,监测PetCO2,行桡动脉穿刺,监测血气分析结果,术中持续小剂量丙泊酚泵入进...     

木瓜超氧化物歧化酶粗提物颗粒的加工及生物学效应研究

目的 研究木瓜超氧化物歧化酶粗提物颗粒的加工工艺,并评价其生物学效应.方法 1%纤维素酶酶解木瓜匀浆,β-环糊精和γ-环糊精包埋,制得超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)粗提物,50只小鼠分为5组:空白对照组、模型对照组、3个试验组(样品剂量分别为1000、2000、3000 U/kg).对照组予同质量基础饲料,除空白对照组外,各组给予5 Gy60Coγ射线全身照射1次,3 d后处死,测定血清和各组织MDA含量及SOD活性.结果 酶解后单位体积的上清液中SOD的活力比酶解前降低了7.8%,但是由于出汁率大大提高,使得单位质量木瓜所得上清液中SOD总活力提高近10.65%.采用3%的γ-环糊精包埋木瓜SOD,并运用喷雾造粒技术制备PC-SOD,其SOD活性保留率为67.8%.动物实验显示:各剂量组中小鼠血清和组织中的MDA含量均低于模型对照组,各剂量组中小鼠血清和组织中的SOD活性均高于模型对照组.结论 木瓜的本方法SOD粗提物颗粒(PC-SOD)的加工工艺效果好.产品PC-SOD对降低小鼠血清和组织中的MDA有显著作用,且对提高小鼠血清和组织中的SOD活性也有明显的效果.     

青蒿琥酯对人子宫内膜癌细胞RL95-2的生长抑制作用

目的 研究青蒿琥酯在体外对人子宫内膜癌RL95-2细胞的生长抑制作用及其可能机制.方法 通过MTT法实验观察青蒿琥酯在体外对RL95-2细胞的抑制作用;透射电镜观察癌细胞的形态学改变;免疫组化检测细胞浆Caspase3活性;流式细胞术观察青蒿琥酯对细胞周期的影响及检测细胞线粒体膜电位△ψm和细胞内ROS水平.结果 青蒿琥酯对RL95-2细胞具有增殖抑制作用,其半数细胞抑制浓度(IC50)为26.29 μg/ml.透射电镜见:细胞呈早期凋亡改变:核染色质聚集于核膜周围,呈团块状;免疫组化检测细胞浆Caspase3表达阳性;流式细胞仪检测:细胞周期阻滞发生在G0/G1期;细胞内ROS升高(P<0.05);细胞线粒体膜电位△ψm降低(P<0.05).结论 青蒿琥酯在体外作用于人子宫颈癌RL95-2细胞,可能通过诱导细胞凋亡抑制癌细胞增殖.     

封闭野生型p53表达使卵巢癌细胞药物敏感性增加的机制

目的：观察p53状态对卵巢癌细胞的顺铂药敏性的影响。方法：将pCMV-MDM2质粒转染于p53状态为野生型A2780卵巢癌细胞系，同时转染pCMV空载体作为对照。通过Western blot证明转染后细胞在受到损伤时p53表达被封闭。通过集落形成实验检验A2780在p53状态改变前后细胞药敏性，并通过流式细胞技术检测其细胞周期的改变，原子吸收光谱仪测定DNA-顺铂结合物以检验其核苷酸切除修复功能是否丧失。结果：(1)p53失表达的细胞集落形成率与对照组相比，在给予顺铂后明显下降，提示对顺铂的药物敏感性增加。(2)实验组细胞在给以顺铂治疗后，出现了明显的S期阻滞，而在p53功能完整的对照组细胞却主要出现G2／M期阻滞。(3)给予顺铂后，所有细胞的铂吸收量相同。p53被封闭后，细胞的铂结合量增加。结论：封闭野生型p53表达增加了卵巢癌细胞A2780对顺铂的敏感性，这是由于p53参与细胞周期检查点的调节和DNA修复过程而致。