非小细胞肺癌组织蛋白酶D和P选择素表达的临床研究

目的　探讨组织蛋白酶D(Cathepsin ,CD)和P选择素 (Pseleltin ,Ps)在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组织化学技术 (SP法 )检测 3 0例NSCLC石蜡切片组织中CD和Ps的表达。结果　CD和Ps的阳性率分别为 66 7%( 2 0 / 3 0 )、76 7%( 2 3 / 3 0 )。CD表达与肿块大小、病理分期及淋巴结转移呈正相关 (P <0 0 5 ) ,与 3年存活率呈负相关 (P <0 0 5 ) ,与患者年龄、性别、分化程度、病理类型无显著相关 (P >0 0 5 )。Ps表达则与患者年龄、性别、分化程度、肿块大小、病理类型、病理分期及 3年存活率均无关 (P >0 0 5 )。二者均阳性的患者 3年存活率为 2 5 0 %( 4 / 16) ,明显低于同时阴性者的 10 0 %( 3 / 3 ) (P <0 0 5 )。结论　CD可作为NSCLC淋巴结转移的重要标志 ,是高危预后指标。CD和Ps联合检测 ,可更精确地判断预后 ,为制定治疗方案提供依据     

骨折患者长期固定治疗尿脱氧吡啶啉变化的临床研究

目的　探讨骨折长期固定治疗患者尿脱氧吡啶啉的变化及其临床意义。方法　测定 3 7例 (男 2 2例 ,女 15例 )骨折长期固定治疗患者及 3 0例 (男 15例 ,女 15例 )健康对照者的血清钙 (Ca)、磷 (P)、总碱性磷酸酶 (AKP)、尿钙 /肌酐 (Ca/Cr)、尿脱氧吡啶啉 (DPD)的水平。结果　骨折长期固定治疗患者血清钙、磷水平较正常对照组显著降低 (P <0 0 5 ) ;AKP、Ca/Cr、DPD水平较正常对照组有不同程度的增高 (P <0 0 5 ,P <0 0 5和P <0 0 1)。其中以尿DPD的活性增高更为显著 (增高 5 98倍 )。而且 ,骨折长期固定治疗患者尿DPD的变化还与病程呈正相关。结论　尿DPD是反映骨吸收的一项敏感而特异的指标 ,尿DPD的监测对骨折长期固定治疗患者的临床治疗和预防发生新的骨折具有重要的参考价值。     

CGRP对缺氧缺血新生鼠脑细胞内游离Ca2+的影响

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对缺氧缺血新生鼠脑细胞内游离Ca2+的影响及对脑损伤的保护作用.方法 7日龄SD大鼠制成HIE模型.⑴药物治疗组于模型后即给CGRP 3μg*kg-1*d-1,腹腔内注射,共3d;⑵生理盐水组每天给予同剂量生理盐水腹腔内注射;⑶正常对照组(假手术组).各组于3d后断头取脑,采用钙荧光指标剂Fura-2AM法测定脑细胞胞浆游离钙浓度[(Ca2+)].结果生理盐水组脑细胞内钙含量最高,(129.47±17.21nmol/L)与正常对照组(93.72±24.16nmol/L)比较有显著差异P＜0.01,而药物治疗组(103.35±12.46nmol/L)与正常对照组比较无显著差异.结论 CGRP能阻止新生鼠缺氧缺血脑损伤后细胞钙内流,降低细胞膜对Ca2+通透性可能是CGRP对脑缺氧缺血保护作用的重要机制.     

自杀基因质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV.TK在鼻咽癌细胞中的构建及转染研究

目的 构建含TK自杀基因的质粒表达载体并进行转染研究。方法 根据已发表的Hsv-TK基因的核苷酸序列，设计并合成一对引物，以含TK基因的PGEM/TK质粒为模板扩增出TK基因全长CDS序列，将其克隆到质粒表达载体pcDNA3．1(-)CMV中，进行序列分析和酶切鉴定后，运用电穿孔法将重组体pCDNA3．1(-)CMV-CD车专人鼻咽癌CNE-2细胞中，观察其表达情况以及无毒前体药物GCV干预下对CNE-2细胞生长的抑制作用。结果 酶切和序列分析证明pcDNA3．1(-)(2MV．TK含完整的TK基因序列，RT-PCR从转染细胞总RNA中扩出预期片段；鼻咽癌CNE-2细胞在无毒前体药物GCV干预下，其生长受到抑制。结论 成功构建了质粒载体pcDNA3．1(-)CMVTK，可以将其作为鼻咽癌自杀基因治疗的一种载体。     

下咽环周缺损重建方法的选择

目的 比较下咽环周缺损的两种主要重建方法,即游离空肠移植术(简称游离空肠)和胃上提咽胃吻合术(简称咽胃吻合)的优缺点。方法 回顾性分析1979年7月-2002年7月行喉全切除下咽全切除的晚期下咽癌或喉癌复发患者共125例的资料,其中采用咽胃吻合术式92例,游离空肠术式33例。结果 咽胃吻合组出现并发症40例(43％),手术死亡10例(11％),游离空肠组并发症7例(21％),没有手术死亡病例,两组差异有显著性(P值分别为0.023和0.048)。多因素分析发现与重建有关的并发症发生的危险因素分别是:咽胃吻合术式(风险比2.97;95％可信区间1.14;7.76)和术前血浆白蛋白水平<40.0g/L(风险比2.87;95％可信区间1.33;6.16)。咽胃吻合组发生进食反流或梗阻的比例(76％)明显高于游离空肠组(12％),差异有显著性(P=0.00)。前者术后体重平均下降3.3 kg(95％可信区间-5.7;-1.0),后者术后体重平均增加了2.8kg(95％可信区间0.9;4.7)。结论 选择游离空肠术的患者手术死亡率、外科并发症均明显低于咽胃吻合术的患者,游离空肠组生活质量明显好于咽胃吻合组的患者。建议下咽环周缺损重建首选游离空肠移植术。     

微血管密度在声门上型喉鳞状细胞癌中的分布及其预后

目的 :研究微血管密度 (MVD)在声门上型喉鳞状细胞癌 (SGLSCC)中的分布及对预后的影响。方法 :应用CD31两步系统免疫组织化学染色方法研究 5 9例手术治疗的原发SGLSCC标本 ,并以 19例声带息肉(VCP)标本做良性对照。结果 :SGLSCC的间质中可见大量微血管存在 ,而VCP上皮下结缔组织中微血管数明显减少。Kendall等级相关分析表明 ,在SGLSCC各临床病理参数中 ,MVD仅与淋巴结转移有中等程度的正相关 (P <0 .0 1)。N0 与N 、SGLSCC与VCP间的MVD值差异经独立样本均数 t检验显示均有统计学意义 (均P <0 .0 1)。Kaplan Meier生存分析显示 ,MVD与SGLSCC患者术后累积生存率有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :血管生成在肿瘤形成、侵袭与转移中有重要作用 ;MVD对颈淋巴结转移有预示作用 ;MVD与SGLSCC患者的预后有关。     

CD30在变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中的表达

目的 :探讨CD30在变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中的表达 ,分析其在变应性鼻炎发病中的作用。方法 :应用免疫组织化学SP法和苏木精 伊红染色对 31例变应性鼻炎患者的下鼻甲黏膜 (变应性鼻炎组 )和 2 6例肥厚性鼻炎患者的下鼻甲黏膜 (对照组 )标本中CD30的表达进行检测 ,并进行统计学分析。结果 :变应性鼻炎组CD30细胞数显著高于对照组 ,其差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :在变应性鼻炎的鼻黏膜组织中存在着Th2细胞主导的黏膜反应 ,通过研究CD30的表达水平可了解变应性鼻炎中Th2反应的状态。     

豚鼠耳蜗部分外支持细胞的分离法

目的 :探讨豚鼠耳蜗部分外支持细胞 (Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞 )的分离方法 ,并建立细胞活性的鉴别标准。方法 :选取健康杂色豚鼠 5只 ,解剖出耳蜗基底膜 ,采用酶解加机械吹打法分离Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞。结果 :可以获得较多数量、活性良好、长短不一的Deiter细胞和Hensen细胞 ,8h内细胞活性较好 ;但外柱细胞数量较少 ,存活时间较短。评价Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的活性标准 :①细胞膜无膨胀或扭曲 ;②细胞核无肿胀、移位 ;③在相差显微镜下细胞呈半透明状态 ,存在双折射现象 ;④细胞内无呈布朗运动的颗粒。结论 :熟悉耳蜗的解剖特性、分离出完整的基底膜 ,增加酶的浓度和加大机械吹打力度是获取活性良好的Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的关键 ;评价外毛细胞活性的 4项标准同样可用于判断Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的活性     

LASEK对人眼波前像差的影响

目的　探讨准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术 (laserepithelialkeratomileusis,LASEK)对人眼波前像差的影响。 方法　观察 5 2例 (98眼 )LASEK患者术前及术后的裸眼视力(uncorrectedvisualacuity ,UCVA)、屈光等效球镜度 (spericalequivalent,SE)、最佳矫正视力 (bestcorrectedvisualacuity ,BC VA) ,并采集 6 .5mm瞳孔直径时术前及术后眼部的波前像差 ,将所得数据进行统计学处理。结果　术前平均BVAC为5 .0 7± 0 .4 2 ;术后 10dUCVA为 4 .93± 0 .15 ,BCVA为 5 .0 2±0 .0 9;术后 1个月平均UCVA为 4 .95± 0 .11,BCVA为5 0 4± 0 .0 4 ;视力在术后有逐渐好转趋势 ,术后 10dSE为轻度远视或正视状态 ,随时间延长向近视方向漂移。术后高阶像差增大为术前 1.5倍以上 ,术后 10d时为术前的 2倍 ,高度近视组以 5阶二次彗差为最 (P <0 .0 5 ) ,中低度近视组以 6阶二次球差为最 (P <0 0 1)。术后 1个月时高阶像差比术后10d减小 (P <0 .0 5 ) ,但不能恢复术前水平。总像差术后较术前减小。 2组患者 ,术前像差比较除 5阶二次彗差外差异均无显著性意义 ,术后高阶像差的差异均出现显著性意义 (P<0 .0 5 )。结论　LASEK术后高阶像差比术前明显增大 ,以5阶二次彗差和 6阶二次球差为最 ;随时间的推移像差有所减小 ,但不     

急性高眼压大鼠视网膜睫状神经营养因子的表达

目的 :探讨大鼠急性高眼压前后睫状神经营养因子 (CNTF)mRNA在视网膜组织中的表达变化及意义。方法 :利用前房高眼压灌注法 ,使大鼠右眼维持在 110mmHg高眼压 30min ,然后恢复视网膜血供 ,并分别于灌注后 1d、3d处死大鼠 ,用半定量RT PCR方法检测大鼠视网膜组织中CNTFmRNA的表达情况。结果 :在正常大鼠视网膜组织中 ,CNTFmRNA有微量表达 ,急性高眼压后 ,其表达明显增高 ,第 1天、第 3天分别比对照组增加 37.0 9%和 2 2 7.4 2 %。结论 :大鼠急性高眼压损伤后 ,可通过内源性CNTF表达增加来应答视网膜神经节细胞 (RGCs)及其他细胞的损伤 ,保护视网膜及视神经 ,为外源性营养因子的应用提供理论依据。