赖型钩端螺旋体601株OmpL1蛋白的表达、纯化及功能分析

目的对钩端螺旋体黄疸出血群赖株ompL1基因进行克隆、表达及产物的纯化。方法从我国钩端螺旋体黄疸出血群赖株基因组中扩增全长ompL1基因片段,克隆至pGEM-T载体,回收经EcoRⅠ HindⅢ双酶切产物,将其与表达载体pET32a连接,通过酶切图谱和序列分析法筛选出重组质粒。将含重组质粒的宿主菌诱导表达后,提取全菌总蛋白进行SDS-PAGE电泳分析。结果获得pET9L重组质粒,经诱导表达后得到分子量为31000的重组蛋白。测序得到的ompL1基因核苷酸序列与已发表ompL1基因序列(GenbankI61405)同源性为99.8%,所推导的氨基酸序列(GenbankLA3138)的同源性达100%。结论成功构建了ompL1基因的原核表达系统,为进一步制备以OmpL1为检测靶抗原的免疫层析试剂盒奠定基础。     

羊膜细胞培养液对胎儿卵巢组织雌二醇分泌的实验研究

目的观察胎儿卵巢在体外培养条件下及羊膜细胞培养液条件培养液对分泌雌二醇(E2)的影响,旨在为卵巢移植提供较好的供体培养方法。方法取20～28周妊娠水囊引产的胎儿卵巢,将其切成碎块进行一般培养液直接培养(A组)及加羊膜细胞培养液培养(B组)。培养后测定两种不同培养液中E2含量并进行比较。结果胎儿卵巢在一般培养液和加羊膜细胞培养液培养条件下能产生E2,随培养时间延长,E2分泌量增加。而加羊膜细胞培养液组E2分泌量高于一般培养液直接培养(P<0.05)。结论胎儿卵巢在一般培养液培养条件下能分泌E2,而加羊膜细胞培养液能促进培养的卵巢组织的E2分泌,可作为卵巢移植的供体培养的较好培养液。     

BACTEC 9050自动血培养仪的临床应用

目的 评价BACTEC 9050自动血培养仪的临床应用情况。方法 分析2年来自动血培养仪检测的阳性率、阳性报警时间、菌种鉴定及临床分析。结果 检测2424份血培养标本，分离出328株菌，总阳性率为13．5％（328／2424），其中革兰阴性菌167株（50．91％，167／328），阳性菌112株（34、15％，112／328），真菌49株（14．94％，49／328）。分离率居前三位的细菌是大肠埃希菌（22．86％），金黄色葡萄球菌和肺炎克雷白菌（10．36％），白色念珠菌（7、32％）。在全部328例阳性瓶中，24h阳性报告率为51．36％，48及72h阳性率分别为78．5％、92．3％。结论 BACTEC 9050自动血培养仪对肠杆菌、葡萄球菌及真菌具有较好的检测能力。     

ErbB2 mRNA表达和细胞凋亡在柔红霉素致大鼠心肌病中的作用

目的研究柔红霉素对心肌细胞的损伤及致心肌病的机制。方法建立柔红霉素致大鼠心肌病的模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织ErbB mRNA表达。光学显微镜下观察心肌病理改变,采用TdT介导的脱氧核苷酸缺口末端标记技术(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,超声检查心脏射血功能,检测大鼠心肌组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果与对照组比较,柔红霉素损害的大鼠心脏组织ErbB2 mRNA表达下降(P＜0．05),凋亡指数增加(P＜0．01),病理积分升高(P＜0．05),左室射血分数下降(P＜0．05),ROS、MDA产生增加(P＜0．05),SOD、GSH- PX活性减低(P＜0．05)。结论Neuregulin-ErbB信号传导削弱所致的凋亡和脂质过氧化损伤参与柔红霉素心肌病的发生。     

多普勒超声对妊娠自然终止患者血流动力学变化的研究

目的应用多普勒超声评价妊娠自然终止患者子宫动脉和卵巢动脉的血流动力学的变化。方法选择在北京妇产医院就诊的273名患者进行超声检查,其中正常早期妊娠者156例,自然妊娠终止患者117例(胚胎停止发育52例,无胚胎妊娠65例)。应用经腹超声测量孕妇双侧子宫动脉上行支和卵巢动脉,并对数据进行统计学分析。结果妊娠自然终止患者优势侧和非优势侧子宫动脉的搏动指数(pulse index,PI)、阻力指数(resistant index,RI)、收缩期最大血流速度与舒张期最小血流速度比值(ratio between the peak of systolic velocity and the end of diastolic velocity S/D)测量值均明显低于正常早期妊娠妇女,差异均有统计学意义。而胚胎停止发育和无胚胎妊娠患者之间差异无统计学意义。卵巢动脉血流动力学变化在3组之间差异无统计学意义。结论子宫动脉上行支的PI、RI值可用来辅助判断妊娠是否终止,当优势侧子宫动脉上行支的PI、RI值明显减低时(PI<1.80,RI<0.77),提示妊娠终止的可能性极大。     

胆囊切除术后残余胆囊结石56例诊治及预防

目的:探讨胆囊切除术后残余胆囊结石的诊治和预防方法,减低此并发症的发生率。方法:对56例残余胆囊结石再次手术的病例进行回顾性分析。56例中初次手术行经典胆囊切除术18例,小切口胆囊切除术16例,腹腔镜胆囊切除术22例;急诊手术30例,择期手术26例;初次手术在三级以下医院施行42例,在三级以上医院施行14例。结果:除1例因粘连严重并发门脉高压症,分离时引起大出血被迫终止手术外,55例再次手术成功,切除残留胆囊及结石后,症状均消失,疗效满意。结论:合理掌握胆囊切除术的手术时机、和术式,在术中解剖清楚胆囊管、肝总管、胆总管三管关系,然后距胆总管0.3~0.5cm切断结扎胆囊管,是预防残余胆囊结石的关键。     

依托咪酯和丙泊酚诱导对心脏瓣膜置换术病人血流动力学的影响

目的:观察丙泊酚或依托咪酯全麻诱导对心脏瓣膜置换病人血流动力学的影响。方法:选择心功能Ⅲ级,择期行心脏瓣膜置换病人50例,随机分为丙泊酚组(P组)及依托咪酯组(E组),每组25例,分别静脉注射丙泊酚2.5m g/kg和依托咪酯乳剂0.3m g/kg,再给予维库溴铵0.15m g/kg和芬太尼4μg/kg,3m in后行气管内插管。记录诱导前、诱导后1m in、3m in以及插管后1m in、3m in和5m in时的心率(HR)、动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(SDP)、平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)和脉搏血氧饱和度(SpO2)。结果:用药后两组病人血压和心率均呈不同程度下降,诱导后3m in,丙泊酚组SBP、DBP比诱导前显著降低(P<0.01)、HR显著减慢(P<0.05),而依托咪酯组SBP、DBP、HR与诱导前比较无显著差异。气管插管后两组SBP、DBP和HR均上升,但与诱导前比较均无显著差异。组间比较,两组病人诱导后3m in,丙泊酚组SBP、DBP明显降于依托咪酯组(P<0.05)。结论:对心功能差的心脏瓣膜置换术患者,依托咪酯比丙泊酚诱导可获得平稳的血流动力学,有效地抑制插管时的心血管不良反应。     

PCNA及nm^23、p53的表达和细菌L型感染在卵巢肿瘤发生中的临床意义

目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)及nm23、p53和细菌L型感染在卵巢肿瘤中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法和革兰染色方法检测101例卵巢肿瘤中的PCNA及nm23、p53、基因的表达及细菌L型的检出率。结果PCNA及p53在恶性肿瘤中的表达率明显高于良性肿瘤(P<0.01);nm23蛋白在恶性肿瘤的表达率则低于良性肿瘤(P<0.01);PCNA及nm23肿瘤转移抑制基因、p53抑癌基因的指标与肿瘤的病理分级及患者预后明显相关(P<0.01~0.05)。细菌L型检出阳性率与病理分级有显著差异(P<0.005),腹腔淋巴结有转移比无转移者、有腹水比无腹水者有显著差异(P<0.01)。结论增殖细胞核抗原(PCNA)及nm23、p53基因在卵巢肿瘤中有不同程度的异常表达,PCNA的表达有助于卵巢良、恶性肿瘤的诊断和鉴别,两种基因均可作为判断卵巢肿瘤生物学行为及患者预后参考指标。L型感染极有可能成为诱发肿瘤因素之一,它们与癌基因可能有协同致瘤作用。     

胚胎干细胞来源神经前体细胞在缺氧缺血性脑损伤海马内的分化

目的 研究胚胎干细胞（ESC）来源的神经前体细胞移植入缺氧缺血性脑损伤（HIBD）脑内后，在海马的迁移和分化。方法小鼠ESC体外培养和诱导分化，制作小鼠HIBD模型。术后第2～3天，将细胞植入损伤侧侧脑室。对脑组织进行病理学、聚合酶链反应（PCR）、X-gal和免疫荧光组化染色等检测。结景小鼠ESC在特定条件下，能成功诱导分化为神经前体细胞。细胞移植后，经PCR检测和X-gal染色发现能长期存在于脑内，并迁移、分布于受损海马，构成海马结构，经进一步免疫荧光检测发现可分化为神经元；同时病理学检测亦发现细胞移植后受损海马内的神经细胞数量明显增加。结论体外经过特定的诱导分化后。ESC被定向诱导分化为神经前体细胞，植入HIBD小鼠脑内后，能迁移至损伤海马，分化为神经元，替代损伤或坏死的神经细胞。是其发挥治疗作用的可能机制之一。     

肿块型慢性胰腺炎的手术治疗

目的总结肿块型慢性胰腺炎的诊治经验,探讨肿块型慢性胰腺炎的诊断与治疗方法。方法回顾性分析10年中8例肿块型慢性胰腺炎误诊为胰头癌的临床病例资料。结果本组病例表现为腹痛者8例,伴黄疸者5例,伴食欲减退者3例,术前均误诊为胰头癌,术后病理学检查均为慢性胰腺炎。本组病例行child术5例,行胆管空肠Roux-en-Y吻合术2例,行剖腹探查术1例。术后7例腹痛症状得到缓解,发生胰瘘2例,死亡1例。结论肿块型慢性胰腺炎与胰头癌的术前鉴别存在一定困难。术中若不能明确排除胰头癌,则行胰十二指肠切除术;术中若发现同时合并整个胰腺慢性炎症,经穿刺活检阴性,可行保留十二指肠的胰头切除术或各种内引流术。