心肌造影超声心动图评估心肌缺血程度的实验研究

本实验制作不同程度心肌缺血的动物模型，以声处理５％人血白蛋白为超声造影剂进行心肌灌注造影，探讨ＭＣＥ时间－强度曲线各指标与心肌缺血程度间的关系。结果表明：心肌显影的峰值强度和曲线下面积均与缺血程度呈显著负相关（相关系数分别为ｒ＝－０．９８，Ｐ值＜０．００５；ｒ＝－０．９４，Ｐ值＜０．０５），且能区分轻度、中度和重度三种程度的心肌缺血；而三项时间指标与心肌缺血程度间未发现显著性差异。本实验的初步结果表明，ＭＣＥ是一项活体评估局部心肌血流灌注的有效方法。     

Agilent 2100 Bioanalyzer在基因差异表达研究中的应用

目的观察Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(以下简称Bioanalyzer)在基因差异表达研究中的应用。方法应用限制性显示技术分别从正常和热休克处理后的酿酒酵母细胞中分离出cDNA片段,然后再用Bioanalyzer和传统的琼脂糖凝胶电泳技术对RD-PCR产物进行检测分析。结果Bioanalyzer能更快速、敏感地分离和显示差异表达的基因片段,并且通过对差异片段进行定量比较,发现了数个表达有明显差异的基因片段。结论Bioanalyzer在基因差异表达研究中具有重要的应用价值。     

来源于骨髓和脐带血的基质细胞基本特性的比较

目的比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性,为基质细胞的选择应用提供依据.方法用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞,以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区(CAFC),长期培养起始细胞(LTC-IC)为指标,比较两者的生长特性、成分及功能.结果①细胞生长特性:出现贴壁细胞时间,骨髓细胞为培养3d,脐带血细胞为培养5～6d;细胞融合成片时间,骨髓细胞为培养10～14d,脐带血细胞为培养12～18d;第21天细胞增殖数,骨髓比脐带血细胞增殖少;②细胞成分:21d培养后细胞成分,骨髓来源者以成纤维细胞为主,其次是巨噬细胞与内皮细胞,脂肪细胞最少;脐带血细胞来源者,以巨噬细胞为主,其次是内皮细胞、成纤维细胞,偶见脂肪细胞;细胞化学与上述结果基本一致;细胞表面抗原检测,CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞;③细胞功能:骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的CAFC和LTC-IC明显多.结论①生长特征:形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短,骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短;②细胞成分特性:骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主,脐带血来源者以巨噬细胞为主;③细胞功能特性:骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于CAFC、LTC-IC生长.     

抑制脑血栓形成的硫代磷酸酯脱氧寡核苷酸的亲和性研究

目的为抑制脑血栓形成,合成与TF基因启动子区切应力反应元件(SSRE)形成三链DNA的硫代磷酸酯寡核苷酸(TFO)。方法设计TFO序列14条,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成TFO。硫代磷酸酯修饰在TFO的3'末端进行。应用电泳迁移分析(EMSA)观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性。结果在设计合成的14条寡核苷酸中,与靶序列能形成三链DNA的TFO只有T21GTa、T14GTa和T15GTa,其Kd值分别为3.6×10-10、1.0×10-9和1.0×10-8(M),经硫代磷酸酯修饰后分别为:2.3×10-9、3.8×10-9和1.5×10-8。结论硫代磷酸酯修饰的T21GTa-ps、T14GTa-ps和T15GTa-ps能够与TF基因启动子SSRE的3个位点形成三链DNA。     

老年危重病人人工气道气囊压力监测及护理

[目的 ]探讨人工气道气囊压力监测在老年危重病人气管导管护理中的应用价值。 [方法 ]将 60例建立人工气道的老年危重病人随机分成两组 ,实验组应用PORTEX专用气囊压力监测表注气测压 ,对照组采用传统的手指捏感法注气 ;用呼吸机检查漏气情况 ,并比较两组病人的气囊注气容积、气囊压力及并发症发生率。 [结果 ]实验组气囊压力为 2 .45 2kPa±0 .490kPa时 ,气囊容积为 10 .0mL± 4.7mL ,呼吸机检查不漏气 ;对照组气囊压力为 3 .92 3kPa± 0 .73 6kPa时 ,气囊容积为 15 .0mL± 5 .1mL ,呼吸机检查不漏气。两组病人气管黏膜损伤、气囊破裂发生率比较有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;两组病人误吸、食管气管瘘发生率比较无统计学意义 (P >0 .0 5 )。 [结论 ]建立人工气道的老年危重病人气囊压力维持在1.961kPa～ 2 .942kPa ,能有效避免误吸的发生和气管黏膜的损伤。     

Adrenergic signalling between rat taste receptor cells

In taste buds, synaptic transmission is traditionally thought to occur from taste receptor cells to the afferent nerve. This communication reports the novel observation that taste receptor cells respond to adrenergic stimulation. Noradrenaline application inhibited outward potassium currents in a dose-dependent manner. This inhibition was mimicked by the β agonist isoproterenol and blocked by the β antagonist propranolol. The α agonists clonidine and phenylephrine both inhibited the potassium currents and elevated intracellular calcium levels. Inwardly rectifying potassium currents were unaffected by adrenergic stimulation. Experiments using the RT-PCR technique demonstrate that lingual epithelium expresses multiple α (α1a, α1b, α1c, α1d, α2a, α2b, α2c) and β (β1, β2) subtypes of adrenergic receptors, and immunocytochemistry localized noradrenaline to a subset of taste receptor cells. Collectively, these data imply strongly that adrenergic transmission within the taste bud may play a paracrine role in taste physiology.     

清肝泻胃降酶汤治疗病毒性肝炎丙氨酸氨基转移酶反复异常68例疗效观察

我们自1998年10月-2002年10月，运用自拟清肝泻胃降酶汤治疗病毒性肝炎丙氨酸氨基转移酶（ALT）反复异常68例获得满意疗效，现报告如下：     

慢性肾功能衰竭升降失衡证红细胞膜Na~+、K~+-ATP酶的研究

对30例慢性肾衰升降失衡证患者按升降不及、升降反常分两组,用保元汤加大黄治疗,总有效率63.3%。同时测定红细胞膜 Na~ 、K~ -ATP 酶活性(μM/mg 蛋白·小时)和哇巴因抑制率(%)与30名健康人比较,两组酶活性分别降低71%、76%;抑制率分别降低31%、33%。其中16例治疗后酶活性均值分别由治疗前85.1、75.3,提高到219.9、185.9;抑制率均值分别由治疗前62.7、57.2,提高到77.2、70.2。临床症状好转,肌酐、尿素氮下降。表明细胞膜运转障碍与升降失衡证存在联系,中药对酶活性有调节作用。     

Laparoscopic Local Resection Based on Sentinel Node Evaluation for Early Gastric Cancer: A Preliminary Report

We previously reported that lymphatic mapping using isosulfan blue can be used to identify sentinel nodes (SNs). This study was undertaken to evaluate the feasibility of using the SN technique in treating early gastric cancer and to explore its usefulness for minimal invasive surgery. Twenty-three patients with early gastric cancer who underwent SN biopsy were retrospectively evaluated. Based on SN evaluation, individualized surgery was performed in five patients with T1N0M0 gastric cancer. When pathological examination of frozen sections revealed metastasis in SNs, we performed a standard D2 gastrectomy. Laparoscopic local resection was applied when the SN biopsy was negative. Our results showed that the success rate with SN biopsy in early gastric cancer was 100%, as were the accuracy, sensitivity, and specificity. All five patients with early gastric cancer had SNs negative for metastases both by frozen section and by postoperative pathology. Thus, all these patients underwent laparoscopic local resection without extended lymphadenectomy. We conclude that SN biopsy is a useful tool to individualize the operative procedure, and laparoscopic local resection can be safely performed using SN guidance in selected patients with early gastric cancer.     

输尿管无细胞基质移植物的制备和评价

背景：与小肠黏膜下层等材料相比，脱细胞血管具有天然管状结构，与输尿管形态结构相近，替代输尿管时仅需端端吻合即可，手术操作简单，血管外壁光滑，获取及制备方法简便等优点。 目的：拟应用同种颈动脉血管无细胞基质体外构建输尿管。 设计、时间及地点：观察性实验，于2006-09/2008-06在上海交通大学医学院附属新华医院动物实验中心完成。 材料：长风杂交白猪由上海松联实验动物公司提供。上海交通大学医学院实验动物中心提供的健康成年大鼠8只，用于血管无细胞基质的动物毒性实验。 方法：剥去猪颈动脉血管外膜，PBS冲洗若干遍，然后将血管置于pH 7.1 的PBS中4 ℃下振荡清洗，0.5%十二烷基硫酸钠振荡24 h，后使用双蒸水4 ℃下反复振荡洗涤1周，每日换双蒸水2次。对于解剖过程中肌肉残留相对稍多的血管，在双蒸水洗涤前以混合消化液37 ℃下振荡消化约2 h，再行双蒸水洗涤。制备的无细胞基质置于青、链霉素溶液中，4 ℃保存，完成脱细胞支架制备。 主要观察指标：光镜及电镜观察脱细胞后管壁无细胞基质片的主要成分。将同种异体来源内皮祖细胞培养增殖后植入血管无细胞基质，观察细胞生长情况，并进行血管无细胞基质动物毒性实验。拉力实验了解血管无细胞基质材料的收缩性能。 结果：颈动脉血管无细胞基质中已无细胞成分，无细胞基质主要由胶原成分组成。扫描电镜未见该材料表面存在细胞及细胞碎片，同时发现该无细胞基质存在孔隙样结构。体外同种异体来源的内皮祖细胞培养增殖后植入血管无细胞基质，细胞黏附于无细胞基质。血管无细胞基质按毒性分级属于无毒级。拉力实验说明该无细胞基质具有一定的韧性和牵张性。 结论：采用胰酶和十二烷基硫酸钠制备的颈动脉血管无细胞基质材料无细胞残留，具有一定的韧性和牵张性，种植于其中的种子细胞具备一定的生长能力。