SARS-CoV感染后人ACE2转基因小鼠肺组织一氧化氮合酶的变化

目的利用人血管紧张素转换酶2（ACE2）转基因小鼠模型研究一氧化氮（NO）在严重急性呼吸综合症（SARS）发病中的作用。方法用PUMC01株SARS-CoV感染野生型及人ACE2转基因小鼠,免疫印迹、免疫组化及分光光度法观察两组动物在感染后3、7d肺组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和血清NO的变化。结果免疫印迹显示,在接种病毒后3d和7d的转基因小鼠肺组织iNOS蛋白密度明显增高。免疫组化显示,接种病毒后3d和7d转基因小鼠肺组织巨噬细胞增多,iNOS表达呈明显的阳性反应。生化测定血清NO结果显示,接种病毒后3d,与攻毒前及相同时间的野生型小鼠相比,NO水平明显升高。结论NO在SARS发病的病理生理过程中可能发挥重要的作用。     

帕金森病α-Synuclein转基因小鼠模型的建立

目的建立人α-Synuclein野生型及两个突变型A53T和A30P基因的转基因动物模型,研究α-Synuclein在帕金森病发病过程中的作用。方法构建人α-Synuclein表达载体,利用显微注射法制备人α-Synuclein基因的转基因小鼠。通过PCR方法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。通过RT-PCR和Western blotting方法鉴定转基因小鼠脑组织中人α-Synuclein mRNA和蛋白表达情况。采用免疫组化鉴定人α-Synuclein在小鼠脑组织中的表达情况。通过Rotatingrod实验评价转基因小鼠的行为改变情况。结果得到表达水平不同的野生型人α-Synuclein转基因小鼠2个品系。得到表达水平不同的A53T突变型α-Synuclein转基因小鼠2个品系。得到表达水平不同的A30P突变型α-Synuclein转基因小鼠3个品系。免疫组化显示,转基因小鼠大脑海马、新皮层、纹状体区出现人α-Synuclein阳性标记的细胞。Rotating rod实验结果显示转基因小鼠表现出明显的进行性运动能力障碍。结论建立了转人α-Synuclein基因的帕金森病小鼠模型。     

清肝健脾法治疗妊娠期肝内胆汁淤积症临床观察

[目的]观察清肝健脾法治疗妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)的临床疗效及对围产儿预后的影响。[方法]选取昆山市中医院产科入院治疗的ICP患者61例。随机分为两组,治疗组予清肝健脾ICP方;对照组予地塞米松、门冬氨酸钾镁。观察两组ALT、AST、TBIL、TBA值及皮肤瘙痒程度的变化。[结果]清肝健脾法能降低妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇的ALT、AST、TBIL、TBA值,能减轻妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇皮肤瘙痒的程度;对围产儿预后有积极的影响。[结论]清肝健脾法治疗妊娠期肝内胆汁淤积症疗效确切。     

笑气吸入用于临床无痛分娩1000例临床研究

目的探讨笑气用于分娩镇痛的疗效及对母儿影响。方法对1000例笑气吸入镇痛和同期1000例非镇痛分娩的镇痛效果、产程进展、分娩方式、产后出血量及新生儿Apgar评分等指标进行比较。结果镇痛组在镇痛效果、缩短产程时间方面均优于对照组，差异有极显著性（P〈0.01）；两组在产后出血量、新生儿窒息发生率方面差异无显著性（P〉0．05）。结论笑气吸入对分娩疼痛有良好的镇痛效果，可缩短产程，降低剖宫产率，对母儿无不良影响，方法简便，容易掌握，是理想的分娩镇痛方法。     

医学院校课程教学质量多主体监控体系的实践探索

对课程教学质量定量和定性相结合的多主体监控体系进行了实践探索,在定量方面,将三者按照一定的比例整合起来,在定性评估方面,努力实现学生、督导员、同行专家教学信息的闭环化和反馈及时化,取得了较好的实践效果。     

子宫平滑肌瘤的克隆性分析

目的 根据女性细胞中两条X染色体上甘油磷酸激酶（PGK）基因多态性,建立克隆性分析技术,并探讨子宫平滑肌瘤的克隆性。方法 从新癣子宫平滑肌瘤组织中提取DNA,用限制性内切酶HpaⅡ消化样品后,PCR扩增,产物再经BstXI内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳显示结果。结果 在扩增成功的32例标本中,10例（31％）具有BstXI酶切位点的多态性。其中1例X染色体失活发生了严重的偏移,不适合作克隆性分析。对其中7例标本、15个肿瘤结节进行了克隆性分析。结果显示,7例中15个肿瘤结节全部为单克隆性起源,其中2例（分别有2个肌瘤）的肿瘤结节起源于不同的克隆,1例中相邻的6个肌瘤结节具有相同的酶切带型,提示不同肿瘤结节起源于同一克隆。结论（1）运用PGK克隆性分析技术有助于局灶性或结节性病变性质的确定;（2）子宫平滑肌瘤是单克隆细胞群体;多发性平滑肌瘤中,多数病例不同肿瘤结节相互独立,有的病例不同的瘤结节具有相同的细胞起源。     

显影固体栓塞剂含钡明胶微球的研制

目的　研制用于介入治疗的可显影固体栓塞材料含钡明胶微球 .方法　采用乳化聚合法制备微球 ,以均匀设计优化微球制备工艺 ,对微球的外观、粒径、显影性、分散性、膨胀系数及稳定性等进行了研究 .结果　微球分散性良好 ,通过控制实验条件 ,制备直径分布范围不同的微球 .微球中硫酸钡的含量为 (19± 3) % .微球在生理盐水中的膨胀系数约为 1.2 6 7.体外实验证实其在干燥及浸泡状态下 X-线显影性良好 .结论　微球的制备工艺成熟 ,制得的硫酸钡 -明胶微球分散性良好 ,硫酸钡含量较高 ,X-线下显影清晰 ,膨胀系数较大 ,可长时间显影 ,是一种较为理想、具有广泛临床用途的新型固体栓塞材料     

大库容量人源性天然单链抗体库的构建

目的：构建一个大库容量（＞10^8）的人类天然单链抗体库。方法：从正常人400mL外周血分离林巴细胞,提取mRNA后反转录出cDNA第一链, 行半套式PCR扩增VH和VL基因片段,依次插入含Loxp和Loxp511序列的pDNA5,电转化TG1大肠杆菌,构建初级库进一步用初级库感染BS1365使其VH,VL发生重组从而获得次级库。结果：所有VH,VL亚类基因都得到了扩增,scFv克隆效率为99．9％,重组效率为每个单克隆BS1365中含至少8种不同的scFv基因。初级库容量为10^7,次级库容量至少为10^11。结论：我们采用细胞内重组的方法构建了10^11的人类天然抗体库。     

iNOS、p53在幽门螺杆菌相关胃病中的表达

目的 :研究幽门螺杆菌 (H pylori)感染时不同胃粘膜病变中诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)与p5 3的表达情况 ,探讨H pylori感染与胃癌形成的分子机制。方法 :采用免疫组化法检测 12 6例患者胃粘膜iNOS与p 5 3的表达情况。H pylori检测采用尿素酶试验法和Warthin—Starry银染法。结果 :12 6例患者中H pylori阳性 72例 ,H pylori阴性 5 4例。iNOS在炎性细胞的表达率CSG和CAG组明显高于DyS和GC级 (P <0 0 5 )。iNOS在腺上皮细胞的表达率DyS和GC组明显高于CSG和CAG组 (P <0 0 5 )。结论 :炎性细胞来源的iNOS起引发凋亡的作用 ,而腺上皮细胞产生的iNOS有抑制凋亡的作用。H pylori感染激活iNOS通过p5 3介导凋亡可能是H pylori诱发癌变的机制之一。     

昆明种系小鼠胚胎干细胞的分离培养及特性鉴定

目的 提高昆明小鼠胚胎干细胞（ES细胞）建株的成功率。方法 收集小鼠3．5d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,经两次亚克隆分离培养ES细胞;进行相差显微镜观察、碱性磷酸酶染色和体内外分化能力鉴定。结果 获得两个稳定ES细胞集落,传至第11代。ES细胞呈集落样生长,碱性磷酸酶染色强阳性,体外分化的细胞沿拟胚体外向性生长,形态多样,在体分化可形成来源于3个胚层的组织。结论 两次亚克地获得的细胞具有ES细胞主要的生物学性状,有助于提高昆明小鼠ES细胞建株的能力。