绒山羊和绵羊源东毕吸虫ITS rDNA的PCR扩增及序列分析

目的扩增绒山羊和绵羊源东毕吸虫的ITS rDNA序列并进行分析比较。方法运用PCR方法,以保守引物BD1和BD2扩增从黑龙江绒山羊和绵羊体内分离的东毕吸虫（Oriemobilharzia spp．）rDNA的内转录间隔区（ITS-1及ITS-2）。PCR产物经测序后进行序列分析。结果黑龙江绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列总长均为875bp,其中ITS-1序列长为384Up,5．8S序列长为159Up,ITS-2序列长为332Up。黑龙江绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列相似性为99．9％,只有一个碱基差异,存在于ITS-2序列中。结论本研究在国际上首次报道了绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列,证实绒山羊和绵羊源东毕吸虫代表同一个种。这些结果为东毕吸虫分子生物学的进一步研究奠定了基础,并为寄生虫分子系统学研究提供了新资料。     

人子宫内膜细胞原代培养方法的改良

目的 寻求一种简便高效的人子宫内膜上皮细胞和间质细胞分离、纯化与鉴定方法,建立稳定的子宫内膜细胞体外培养体系.方法 简化Ryan等的子宫内膜细胞原代培养方法的取材,分离和培养条件,分离出高纯度的子宫内膜上皮细胞和间质细胞进行体外培养和传代.结果 培养成功的子宫内膜上皮细胞与间质细胞均可稳定传代,体外生长10～50 d,纯度均达90%以上.结论 该方法简便高效,可建立稳定的人子宫内膜细胞体外培养体系.     

小鼠微小RNA miR-22真核表达载体的构建及功能初步研究

目的 从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段并克隆到pIRES2-EGFP,构建miR-22的真核表达载体.方法 利用PCR技术从基因组DNA扩增miR-22前体对应的基因组片段,克隆到质粒pUCm-T,测序正确后构建到真核表达载体pIRES2-EGFP中,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定,并进行序列测定.脂质体Lipofectamin 2000法转染Hela细胞后G418筛选获得稳定转染克隆,提取总RNA,通过RT-PCR方法对neo片段进行鉴定,采用Northern blot技术检测miR-22的表达.结果 PCR扩增得到的334 bp片段与预期的miR-22前体对应的基因组片段序列一致;成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/miR-22,测序结果正确.重组质粒转染Hela细胞后,经G418筛选成功获得阳性克隆.Northern blot分析显示miR-22在Hela细胞内高效表达.结论 本实验成功克隆了miR-22的前体对应的基因组片段,构建其真核表达载体,并在Hela细胞内获得高表达,为深入研究微小RNA miR-22的功能奠定了基础.     

一株具有抗稻瘟霉活性的海洋细菌32-11-2-2的筛选和分离鉴定

目的:从中国东海微生物样品中分离筛选活性细菌菌株,并对活性菌株32-11-2-2进行鉴定.方法:采用无限稀释和平板划线法分离微生物样品,利用稻瘟霉模型进行活性筛选;并对其中的活性菌株32-11-2-2的形态、培养特征以及生理生化特征进行研究,使用16S rDNA序列分析的方法对菌株32-11-2-2进行了分类鉴定.结果:分离得到421株细菌,包括活性菌株54株,其中活性菌株32-11-2-2是一株弱嗜盐菌,具有陆地芽孢杆菌的形态特点,能产生胞外淀粉酶、过氧化氢酶,液化明胶、石蕊牛奶反应阳性,16S rDNA序列分析该菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)同源性达到98%以上.结论:活性菌株32-11-2-2是一株适应了海洋环境的枯草芽孢杆菌.     

2003～2005年南宁市区涂阳肺结核病人转归队列分析

目的分析南宁市区世界银行贷款结核病控制项目实施以来,初、复治涂阳肺结核病人的治疗转归情况,以评价本地区肺结核传染源控制效果,为结核病控制的可持续发展提供技术政策依据。方法以2003～2005年登记的涂阳肺结核病例为该年队列分析的对象,分析登记满1年时的转归。结果3年初治肺结核病人治愈率逐年提高,分别为94.5%、94.7%和95.7%,复治病人治愈率分别为81.0%、89.6%、87.4%。结论用队列分析评价肺结核传染源控制效果,全面反映南宁市区传染源控制的实际情况,DOTS策略的实施使初、复治涂阳肺结核病人的治愈率维持在较高水平。     

基于双重信号放大的电化学免疫法对前列腺特异性抗原的检测

以谷胱甘肽修饰的CdTe量子点(GSH-CdTe QDs)与金纳米粒(AuNPs)形成复合材料(AuNPs@GSH-CdTe)为信号标记物,并在还原氧化石墨烯(rGO)和AuNPs双重信号放大的作用下,建立了一种高灵敏检测前列腺特异性抗原(PSA)的三明治免疫夹心式电化学方法。在rGO/AuNPs表面固定二抗蛋白(Ab₂),捕获目标物PSA和标记有一抗蛋白(Ab₁)的AuNPs@GSH-CdTe信号物,形成“三明治”免疫夹心结构。经HNO₃溶解后,采用方波溶出伏安法(SWSV)测定酸解的Cd²⁺的峰电流用于定量分析PSA。其中AuNPs较大的比表面积以及较好的生物相容能力,达到了成功装载抗体以及放大信号的效果,同时具有较大表面积的rGO起到了协同放大的作用。所构建的免疫分析方法实现了对肿瘤标志物PSA的检测,其线性范围为0.5~200 ng/mL,检测限为5.0 pg/mL,并且该方法专属性、重复性以及稳定性好。此外,在实际样品的检测中,加标样回收率为98.20%~106.2%,结果准确度良好,为检测PSA提供了准确可靠且灵敏度高的新方法。     

围术期外源性褪黑素干预对老年患者术后谵妄和血清S100β的影响

目的　探讨围术期外源性褪黑素干预对老年患者术后谵妄和血清S100β的影响。方法　择期全麻下行全髋置换术患者60例,年龄65~75岁,体重50~80 kg,ASA分级Ⅰ~Ⅱ级。采用随机数字表法,将其分为两组：对照组（C组,n=30）和褪黑素组（M组,n=30）。M组于麻醉前3天晚,术前90 min及术后1天晚分别服用褪黑素6 mg;C组给予服用安慰剂。分别于麻醉前（T0）、手术结束6小时（T1）、术后24小时（T2）、术后48小时（T3）、术后72小时（T4）采集右颈内静脉血监测S100β。采用意识错乱评估方法（CAM）记录T0、T2、T3、及T4时点术后谵妄发生情况。结果　与T0比较,C组T1-2时点S100β明显升高（P<0.05）。与T0比较,M组T1-4时点S100β差异无统计学意义（P>0.05）。与C组比较,M组T1-2时点S100β明显降低（P<0.05）。术后72小时内M组谵妄的发生率与C组比较明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论　围术期口服褪黑素能够减少老年患者术后谵妄的发生,降低术后血清S100β的表达水平。     

阿奇霉素与左氧氟沙星门诊治疗慢性支气管炎急性发作的对照研究

目的比较口服阿奇霉素与左氧氟沙星门诊治疗慢性支气管炎轻-中度急性发作的疗效和安全性。方法采用随机、开放、对照方法分为两组,共入选慢性支气管炎轻-中度急性发作门诊就诊者65例,阿奇霉素组32例(实际完成治疗30例),口服阿奇霉素500mg,1次/d,连续5d;左氧氟沙星组33例(实际完成治疗32例),口服左氧氟沙星500mg,1次/d,连续7d。结果治疗后第10天、第24天两组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组临床症状改善所需时间、平均症状严重程度评分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。两组细菌清除率、非典型病原体感染率间差异均无统计学意义(P>0.05)。两组不良反应发生率均较低,且差异无统计学意义(P>0.05)。结论口服阿奇霉素5d与口服左氧氟沙星7d门诊治疗慢性支气管炎轻-中度急性加重均有效且安全。     

青岛市冬春季儿童腹泻腺病毒感染分子流行病学特点

目的 了解青岛市2007年冬春季儿童腹泻腺病毒(EADV)感染的流行病学特点.方法 收集2007年1～5月临床诊断为病毒性腹泻病儿的粪便标本,采用ELISA及PCR方法检测EADV.结果 106例标本检测阳性率为38%,随机抽取10例阳性标本进行DNA诊断,均为EADV.结论 青岛市冬春季儿童腹泻与EADV感染有关,流行株为40、41型的病毒株.     

大豆胰蛋白酶抑制剂对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的 探讨大豆胰蛋白酶抑制剂(Soybean trypsin inhibitor,SBTI)对人宫颈癌细胞(hela)体外增殖的影响.方法 选用hela细胞进行体外培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测SBTI对细胞增殖的影响.结果 在药物浓度为0.50～10.00 g/L浓度时,随着药物浓度的增加,随着作用时间的增加,SBTI对细胞增殖的抑制率明显增强;在光镜下可以看到细胞凋亡的特征形态.结论 SBTI对hela细胞的增殖有明显的抑制作用,呈现量效,时效关系.