胚胎干细胞移植治疗帕金森病的研究进展

帕金森病(PD)是一种以中脑多巴胺神经元丢失为特征的中枢神经系统退行性疾病。近年来发现,胚胎干细胞(ESC)在体外可诱导分化为多巴胺能神经元,认为ES细胞是移植治疗PD较为理想的细胞,有着广泛的治疗前景。本文综述近年来治疗PD的临床研究、胚胎干细胞体外诱导产生多巴胺能神经元的方法及其应用进展。     

Angiotensin-(1-7)对血管平滑肌细胞钙化的影响及信号转导通路

目的:在钙化大鼠主动脉血管平滑肌细胞上观察血管紧张素-(1-7)[Angiotensin-(1-7)]对钙化的影响及其信号通道。方法:用β-磷酸甘油制备钙化的大鼠血管平滑肌细胞,再以血管紧张素-(1-7)、血管紧张素Ⅱ、血管紧张素Ⅱ 血管紧张素-(1-7)、选择性蛋白激酶A(PKA)或蛋白激酶C(PKC)抑制剂等干预,通过Von Kossa染色及检测钙含量、碱性磷酸酶活性、骨钙素浓度和Cbfa1 mRNA表达来探讨血管紧张素Ⅱ对钙化的影响及其信号通道。结果:血管紧张素-(1-7)抑制钙化大鼠血管平滑肌细胞的钙含量、碱性磷酸酶活性(P>0.05)、骨钙素浓度和Cbfa1 mRNA表达(P<0.05),也抑制血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞的钙含量、碱性磷酸酶活性、骨钙素浓度和Cbfa1 mRNA表达的促进作用(P<0.05);血管紧张素-(1-7)提高血管平滑肌细胞内cAMP浓度(P<0.05),PKA抑制剂可阻断血管紧张素-(1-7)对钙化血管平滑肌细胞的钙含量、碱性磷酸酶活性、骨钙素浓度和Cbfa1 mRNA表达的抑制作用(P<0.05)。结论:血管紧张素-(1-7)可抑制β-磷酸甘油诱导的血管平滑肌细胞钙化,并拮抗血管紧张素Ⅱ促进的血管平滑肌细胞钙化;这些效应与cAMP-PKA-Cbfa1信号途径有关。     

不同结合状态硫酸软骨素多糖链对体外二维三维培养背根节神经突起生长影响研究

目的构建鸡胚背根节细胞3D生长模型,观察CSPG对不同浓度的琼脂糖水溶胶培养基对鸡胚背根节神经突起生长的影响。方法①利用多肽缩合剂1’1羰基二咪唑介导CS-B长链与琼脂糖凝胶共价结合。②分别配制0.5%、0.75%、1%、1.25%、1.5%的SeaPrep琼脂糖凝胶溶液和共价结合了CS-B多糖长链的琼脂糖凝胶溶液。取孵育9~10天后鸡胚背根节加入上述凝胶溶液加培养液培养。③培养24小时之后在24 h、48 h7、2 h、96 h进行观察拍照。观察各时间点神经突起生长情况。结果①鸡胚背根节神经突起在1.25%的琼脂糖凝胶溶液中开始呈3D生长,在小于1%的琼脂糖溶液中只能2D生长。②在同一时间点,呈2D生长的背根节突起和呈3D生长的背根节突起在突起长度方面没有统计学差异(P>0.05)。③3D生长的DRG神经突起在共价结合了CS-B的琼脂糖凝胶中生长长度明显短于普通琼脂糖水凝胶(P<0.05),并且可观察到部分突起长出短而直的成束突起。但是对于呈2D生长的DRG突起长度在两种培养基中却未见差异(P>0.05)。结论鸡胚背根节神经元周围突起生长长度在3D培养中与在2D培养中有没有明显的差异。硫酸软骨素能够有效抑制呈3D生长的神经节突起生长,并且影响到神经突起的生长方式。但是在2D培养基中,未能看到上述的抑制作用。     

人体跟骨宽带超声衰减参数测量方法的研究

探讨超声测量骨钙密度的重要参数—宽带超声衰减(BUA)的测量方法,提出了用脉冲信号作为发射信号,通过数值平均法提高信噪比,采用最小二乘法,提取宽带超声衰减参数。实验结果表明,该方法简单有效,可以准确地从接收的超声波信号中,提取宽带超声衰减参数。     

IL-2对中子照射后肠上皮细胞生长和凋亡的影响及其机制

目的:观察中子照射对体外培养的IEC-6细胞生长的影响及IL-2对其损伤后增殖和恢复的作用,并进一步探讨IL-2调节受照射肠上皮细胞生长的相关机制。方法:单独用IL-2(1×105U/L)或同时施加JAK1激酶阻断剂(A77-1726)处理受4Gy中子照射的IEC-6细胞,并于照后10、15、30min和1、3、6、12、24、48及72h,用MTT比色法和流式细胞术检测受照射后IEC-6细胞的增殖活力和死亡方式的改变。以免疫细胞化学染色和Western blot检测IEC-6细胞上IL-2Rβ的表达和JAK1活化情况。结果:4Gy中子照射后24h,IEC-6细胞的增殖活力明显降低;而IL-2处理组该细胞的增殖活力有显著提高(P<0.05)。受中子照射的IEC-6细胞经IL-2作用24h,其凋亡率明显降低(P<0.05),而坏死率变化不明显。以IL-2刺激中子照射的IEC-6细胞后,于10及15min可见JAK1发生明显磷酸化活化,24h时IL-2Rβ的表达明显增多。同时应用A77-1726和IL-2处理受中子照射的IEC-6细胞后,其增殖活力明显低于单纯IL-2处理组。结论:IL-2可促进受中子照射的IEC-6细胞增殖,具有抗辐射作用。IL-2Rβ和JAK1活化参与了IL-2对中子损伤的IEC-6细胞生长的调控。     

转矩作用对微植体矫治力系内收上前牙影响的三维有限元研究

目的研究转矩力的作用对于微植体矫治力系内收上前牙的影响。方法利用MIMICS软件和有限元软件ABAQUS,建立微植体矫治力系的有限元模型,并在该模型上计算分析有无转矩及转矩作用区域对中切牙和侧切牙移动趋势的影响。结果不加转矩时,中切牙和侧切牙都表现出舌向倾斜的趋势。在100g·cm转矩力的作用下,随着转矩作用区域的增大,中切牙的唇向移动趋势逐渐减小,侧切牙由舌向移动逐渐转为唇向移动。结论转矩能够有效改变牙齿的移动方式,如果转矩从中切牙之间开始向两侧远中方向逐渐减少,效果会更好。     

siRNA抑制外源绿色荧光蛋白在neuro-2a细胞株中的表达

目的：用RNAi技术抑制哺乳动物神经元中外源报告基因的表达，并探讨该过程中RNAi的时间及剂量效应，为利用RNAi技术研究神经元基因功能提供参考。方法：采用神经细胞来源的细胞系neuro-2a小鼠神经瘤细胞为模型，将外源绿色荧光蛋白（GFP）基因转染到neuro-2a细胞内，利用体外转录法合成siRNA，分为3个剂量组对其进行干扰。结果：Neuro-2a细胞可以被有效地转染，而且siRNA在neuro-2a细胞内可以有效发挥干扰作用。这种干扰作用呈现出一定的剂量效应。结论：RNAi技术可以成功用于neuro-2a细胞抑制基因的表达，这种对GFP表达规律及RNAi剂量效应的研究为利用RNAi技术研究神经元基因功能提供了一定的理论参考和依据。     

HIV-1 B''亚型R5或R5/X4嗜性毒株在GHOST细胞的感染性分析

目的分析我国HIV-1B′亚型R5或R5／X4嗜性毒株在GHOST细胞的感染性。方法采用传统的共培养方法从HIV-1感染者PBMC中分离并培养病毒，用表达CD4和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GHOST细胞系，测定毒株的辅助受体利用情况，使用相同病毒量即2mg的HIV-1 p24分别感染表达不同受体的GHOST细胞系，通过流式细胞仪检测分析绿色荧光蛋白（GFP）的表达反映病毒感染细胞的能力。结果35例B′亚型毒株利用CCR5受体，占22例（62．85％），双嗜性即CCR5／CXCR4均阳性占13例（37．15％）。GHOST-R5／X4细胞的感染性分析结果显示，R5／X4双嗜性毒株的感染性明显高于CD4〉200／μl的R5毒株的感染性（P〈0．05）；R5／X4毒株与CD4≤200／μl的R5毒株感染性比较差异无统计学意义（P〉0．05）；CD4〉200／μl的R5毒株与CD4≤200／μl的R5毒株感染性比较差异有统计学意义（P〈0．05）；GHOST-CCR5细胞感染性分析结果显示：R5／X4双嗜性毒株的感染性明显下降，与CD4〉200／μl的R5毒株的感染性比较差异无统计学意义（P〉0．05）。利用相同剂量的双嗜性毒株分别感染R5、X4或R5／X4的GHOST细胞系，显示双嗜性毒株可同时利用CCR5和CXCR4辅助受体，但69．23％的R5／X4毒株以CCR5受体为主，30．77％的R5／X4毒株以CXCR4受体为主。结论HIV-1B′亚型R5／X4病毒不仅有更广泛的宿主细胞嗜性，而且在GHOST-R5／X4细胞中感染性明显提高。持续使用CCR5受体的毒株在疾病进展的过程中虽然辅助受体的利用是一样的，但病毒感染细胞的能力增加。     

青少年网络行为问卷的编制及信效度分析

目的:编制青少年网络行为问卷,为系统评估网络成瘾青少年的网络相关行为特点提供工具。方法:通过开放式访谈和文献复习,建立问卷的初始条目库。采用探索性因素分析技术筛选条目。在湖南永州和长沙市分别取样490例和606例,进行问卷的有关信效度检验。结果:青少年网络行为问卷最终由56个条目构成,其中反映网络使用时间和上网条件等一般情况的条目16条,余40个条目可归纳为9个因子,分别为信息与技术、性与游戏、娱乐放松、网络人际关系、网络效能感、对网络的积极评价、消极评价、上网焦虑、网络满意度。9因子累计可解释方差变异的51.651%。验证性因素分析表明,9因子结构拟合良好,χ2/df=2.780,NFI=0.961,RFI=0.957,IFI=0.975,TLI=0.972,CFI=0.975,RMSEA=0.054。除少数分量表外,各分量表的"系数和重测相关系数较高。结论:青少年网络行为问卷具有较好的结构效度和信度。其实证效度有待进一步检验。     

16层螺旋CT图像后处理技术在鼻咽部肿瘤诊断中的临床应用

目的探讨16层螺旋CT图像后处理技术在鼻咽部肿瘤诊断中的临床应用价值。方法对本院123例鼻咽部肿瘤患者行16层CT扫描后进行图像后处理，结合轴扫资料，与鼻咽纤维镜和活检病理所见对照分析。结果与轴扫资料对比，采用后处理图像提供病变细节，增加诊断信息43例；复杂部位病变准确定位15例；直观显示病变范围及其与周围组织关系60例；无明显增加诊断信息5例。结论鼻咽部16层螺旋cT图像后处理技术可有效增加和提高轴扫CT诊断信息及临床应用价值。