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目的 采用聚合酶链式反应(PCR)技术和胶体金技术建立一种呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条检测方法,并对其检测效果进行评价。 方法 根据GenBank数据库选择真菌内转录间隔区(ITS)基因片段作为靶基因,应用DNAMAN软件对真菌ITS基因片段进行分析,并分别在真菌通用引物5'端用生物素(Biotin)和异硫氰酸荧光素(FITC)进行修饰标记;建立PCR体系,进行体系的最佳条件优化;确定胶体金免疫层析试纸条标记链霉亲和素的最佳标记量和质控线及检测线最佳包被物浓度,组装核酸胶体金试纸条,对试纸条的特异度、灵敏度、重复性和稳定性进行验证。 结果 水煮法提取白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌DNA,浓度为180 μg·L-1以上,纯度为1.60~2.10;在pH 7.0条件下,每100 μL胶体金溶液中制备胶体金标记链霉亲和素最佳标记量为 3.3 μg,质控线包被Biotin化牛血清白蛋白(BSA-Biotin)浓度为2.00 g·L-1,检测线包被抗FITC抗体浓度为1.00 g·L-1。核酸试纸条的特异度与电泳结果一致,仅白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌出现阳性结果,与金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌等常见呼吸道感染细菌无交叉反应。灵敏度检测,白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌的DNA浓度分别为10-4、10-2和10-3 mg·L-1时核酸试纸条仍可准确检出,而普通PCR电泳结果显示白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌最低检测浓度分别为0.01、1.00和0.10 mg·L-1;重复性检测,在不同实验室不同操作人员对核酸试纸条进行验证,结果一致,重复性良好;稳定性检测,核酸试纸条在第6、9和12个月进行检测,结果符合预期,稳定性良好。 结论 本研究建立的呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条可以检测白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌等真菌,特异度和灵敏度均较高,操作简便且快速。 相似文献
72.
73.
[摘要]目的: 利用心肌分层应变及心肌做功技术对长期腹膜透析的尿毒症患者的左心室功能进行研究,评估其在长期腹膜透析下的心功能变化。方法: 选择长期规律进行腹膜透析且经常规超声心动图检查提示左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)正常的尿毒症患者14例,测量其常规二维超声心动图参数,利用二维斑点追踪及心肌分层应变技术测量左心室整体纵向收缩期峰值应变(global longitudinal peak systolic strain,GLS)及内膜层、肌层和心外膜层3层心肌的纵向收缩期峰值应变(longitudinal peak systolic strain,LS),并结合血压得出左心室心肌整体做功参数,共同评估左心室心肌功能,随访5年并比较腹膜透析5年前后相关数据变化。结果: 规律腹膜透析5年后,尿毒症患者LVEF改变无统计学差异;GLS在四腔心切面明显减低(P=0.018),并从心内膜减低至心外膜(LS心内膜层 P=0.029,LS肌层 P=0.017,LS心外膜层 P=0.004);心肌整体做功参数以整体无用功(GWW)升高为主(P=0.048),整体有用功(GCW)、整体做功指数(GWI)及整体做功效率(GWE)无统计学差异。结论: 长期规律腹膜透析5年的尿毒症患者,其左心室整体心肌功能尚保持稳定,但局部心肌收缩功能进一步受损,主要体现在后间隔和侧壁的各层心肌,心肌做功以GWW升高为主。 相似文献
74.
神经症的性压抑与心理因素的相关性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
研究神经症患者潜在人格与性压抑和情绪的相关性.方法:对124例神经症患者进行了婚姻质量问卷(性生活、婚姻质量部份)、抑郁自评量表(以下简称SDS)、焦虑自评量表(以下简称SAS)及自编的性生活调查问卷、主题统觉测验(以下简称TAT)测评.结果:1、神经症伴性障碍组TAT潜在人格与对照组相比,在支配、性、援助、躯体社会攻击、财产破坏欲求、自我攻击、情绪变化欲求和情绪言语攻击性、躯体社会攻击、引诱、缺乏、丧失、灾害、丧失支持、躯体伤害压力上均较对照组显著增高,而成就欲求下降(P<005-001);与神经症无性障碍组相比,神经症伴性障碍组的成就、支配、教养、性欲求得分显著增高,情绪言语攻击欲求得分下降(P<001~005);2、神经症伴性障碍组的性生活质量低,性频度、性后快感均低.3、SDS、SAS与TAT中的负性欲求呈明显的相关性,性行为调查与婚姻质量量表中的性行为呈正相关.结论:神经症的性压抑与其潜在人格有密切的相关性. 相似文献
75.
基于通用中间件接口服务器的远程医疗信息系统 总被引:1,自引:0,他引:1
在远程医疗信息系统共享平台的设计中,提出一种构建通用中间件接口服务器实现多家医院信息系统HIS与PACS的无缝连接方案。着重介绍了DICOM中间件、HL7消息中间件、生态识别和PKI技术在系统集成中的应用。 相似文献
76.
目的:检测IgG受体(FcγR)在炎症细胞因子刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)上的表达。方法:采用ELISA、免疫组化染色法、免疫荧光法和RT-PCR等方法,检测FcγRII及其表达。结果:未经细胞因子刺激的正常HU-VEC可表达低水平的FcγRIIa;经2×105U/L TNF-α和1×105U/L IFN-γ联合刺激3d后,FcγRIIa的表达提高16倍(P<0.01)。免疫荧光法检测显示,TNF-α和IFN-γ诱导的FcγRIIa表达于HUVEC表面。RT-PCR结果显示,FcγRIIamRNA表达量在TNF-α和IFN-γ刺激24h后有明显提高。结论:TNF-α和IFN-γ可通过调节FcγRIIa的转录和翻译,增强其在HUVEC上的表达。FcγRIIa的表达可能与血管炎条件下,免疫复合物在血管上的特异性定位有关。 相似文献
77.
目的 对一个中国良性家族性新生儿惊厥(benign familial neonatal convulsions,BFNC)家系进行基因诊断,并探讨其分子发病机理。方法 对该家系进行详细的临床检查及疾病基因的连锁分析。应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)-DNA直接测序,并用PCR-单链构象多态(single strand conformation polymorphism,SSCP)对先证者、家系内16人及家系外72名无血缘关系的正常入进行KCNQ2基因突变分析。结果 连锁分析提示该家系与KCNQ2基因连锁,并排除与KCNQ3基因连锁。PCR—DNA直接测序在先证者发现.KCNQ2基因突变193ldelG,PCR—SSCP发现家系内其他患者均出现与先证者相同的异常SSCP条带,而72名正常人未出现此异常条带。结论 KCNQ2基因突变是中国人BFNC的发病原因之一,193ldelG是国内外未曾报道过的新突变,连锁分析结合基因突变分析可对BFNC患者进行基因诊断。 相似文献
78.
老年与中青年癌症病人心理健康状况比较研究 总被引:2,自引:0,他引:2
癌症是一种心身疾病 ,心理社会因素在癌症的发生、发展及预后中均起着重要作用。反过来 ,癌症对病人来说又是一种恶性刺激 ,会给病人带来沉重的心理负担 ,影响疾病的康复和生活质量 ,并可加速癌症的恶性进展 ,造成不良后果。有研究表明 ,老年与中青年癌症病人因社会地位、社会经验及社会责任的不同而各具特点[1] 。了解不同年龄癌症病人的心理状况 ,并采取相应的处理策略 ,对癌症的治疗和康复具有积极作用。我们对 1999年 7月~ 2 0 0 0年 8月收治的 12 6例老年和 96例中青年癌症病人的心理健康状况进行了对比分析 ,结果总结如下。1 材料和… 相似文献
79.
文拉法辛与阿普唑仑治疗广泛性焦虑症比较 总被引:1,自引:0,他引:1
广泛性焦虑症是一种慢性、进展性精神障碍,以传统抗焦虑药治疗时,副作用大,病人难以耐受,依从性差,往往导致治疗中断。文拉法新是一种选择性5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂,对抑郁和焦虑症状均有良好的治疗作用。本研究以阿普唑仑为对照药物,初步探讨文拉法辛对广泛性焦虑症的疗效。 相似文献
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