生化过程工程与中药现代化

在生化工程20余年的研究工作基础上。结合中药现代化开展了一些技术、材料与设备的研究开发工作。研究植物细胞、组织、器官大规模培养增殖技术，应用于细胞代谢产物、生物转化和人工育种及发根，实现了工厂化生产，并成功研制多种类型的生物反应器；在原有化学工程提取分离技术的基础上，发展了反应分离耦合、微波辅助提取等新技术，实现了高效浸出，并且节能、节水；此外，又发展了包括反胶团萃取、一步三相萃取青霉素、泡沫分级分离、膜分离、高速逆流色谱分离纯化等新技术。高速逆流色谱技术是一种没有固相载体的液一液多级逆流萃取技术，避免了不可逆吸附，已成功用于多种天然产物的分析和分离，作为研究中药指纹图谱的新方法具有很好的精密度和重现性。高效液相色谱、气相色谱、毛细管电泳、质谱等技术在指纹图谱研究中发挥了重要作用。与此同时，还研制了多种分离介质，并在药物的修饰与包埋方面做了大量工作。另外，在海洋药物研究领域，创造了连续培养连续采收的新流程、新技术．进行了转基因藻的培养。用于生产基因工程产品。     

ⅡB和Ⅲ期非小细胞肺癌预后相关因素的COX模型分析

目的 :研究影响ⅡB、ⅢA、ⅢB期非小细胞肺癌 (NSCLC)长期生存的预后因素。方法 :回顾性队列研究 113例ⅡB、ⅢA、ⅢB期NSCLC的病历资料 ,生存曲线用Kaplan Meier法绘制 ,预后价值判断用Logrank检验 ;所有变量均进入COXproportionalhazardregression模型。统计软件为SPSS 10 0 ,取α =0 0 5标准筛选变量。结果 :单因素分析显示 ,性别差异、年龄 >60岁、有无临床症状、有无吸烟史、腺癌或鳞癌等不同的组织类型、病灶直径 >3cm、受累的淋巴结直径 >2cm等对ⅡB、ⅢA、ⅢB期NSCLC患者 5年生存率无明显影响 ,P >0 0 5 ;KPS、有无体质量减轻、临床分期、病灶数目、受累淋巴结分期、组织分化、治疗手段等 7个因子对ⅡB、ⅢA、ⅢB期NSCLC患者生存时间有影响 ,经Logtest检验 ,P <0 0 5。COX模型分析 :唯独KPS、临床分期 2个因子P <0 0 1。结论 :生活质量 (KPS)、有无体质量减轻、临床分期、病灶数目、受累淋巴结分期、组织分化、治疗手段等 7个因子对ⅡB、ⅢA、ⅢB期NSCLC患者生存时间有影响 ,但唯独KPS、临床分期 2个因子具有独立预后价值作用     

喉鳞癌组织中p53蛋白的表达及其临床意义

目的　探讨p5 3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法　采用免疫组化技术检测p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁非典型增生组织及正常组织中的表达。结果　p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁和正常组织中阳性表达率分别为 5 3 .7%、3 8.1%和0 ,三者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;重度非典型增生组织与中、轻度增生、癌旁单纯增生和癌旁正常黏膜 p5 3阳性表达分别有显著性差异 ,表达率分别为 68.8%、2 1.4%、16.7%、8.3 %和 0 ;在肿瘤浸润的前沿部 p5 3阳性表达显著强于浅表部 (P <0 .0 5 ) ;且癌巢边缘 p5 3表达显著强于中央部 (P <0 .0 5 ) ;p5 3阳性表达与喉鳞癌的分化、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。 结论　p5 3的过度表达可能为喉鳞癌的早期发生事件 ,癌旁组织中已发生p5 3基因突变的细胞可能是肿瘤复发的根源 ;p5 3表达与喉鳞癌的浸润生长、分化及转移有关 ,为判断预后的 1个有意义指标。     

胆管癌组织中TGF-β1、TβRⅡ及p27kip1蛋白的表达及其意义

目的探讨胆管癌组织中TGF—β1、TβRⅡ及p27^kip1表达的相互关系及它们在胆管癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学S-P法检测49例肝外胆管癌及8例正常胆，营，管组织中TGF—β1、TβRⅡ、p27^kip1的表达，分析其与临床病理学特征的相关性。结果49例胆管癌组织TGF—p1、TβRⅡ和p27^kip1阳性表达率分别为71．43％（35／49）、36．73％（18／49）和40．82％（20／49），而在正常胆管组织分别为12．50％（1／8）、100．00％（8／8）和87．50％（7／8）；TGF-β1、p27^kip1蛋白表达与胆管癌临床分期及转移相关，Ⅲ～Ⅳ期胆管癌的TβRⅡ阳性表达率（25，81%）明显低于Ⅰ～Ⅱ期（55．56％），P〈0，05；TGF—β1及其Ⅱ型受体的共同表达与胆管癌临床分期相关（P〈0．05）；TβRⅡ与；p27^kip1在胆管痛中的表达呈正相关（γs=0．724，P〈0．01）；p27^kip1表达与TGF—β1及TBRⅡ共同表达相关（P〈0，01）。结论TGF-β1表达增高伴TβRⅡ、p27^kip1表达降低提示胆管癌生物学行为不良；胆管癌中p27^kip1蛋白的调控可能与TGF-β1信号转导有关。     

前列腺癌三维适形放疗中体位对靶区和正常组织体积及照射剂量的影响

目的对比研究仰、俯卧体位下前列腺癌三维适形放疗对靶区和周边重要器官体积改变和照射剂量变化。方法临床穿刺细胞学证实的分期为T1~T2N0M0期的前列腺癌8例,行对称六野三维适形放疗。定位前1 h排空膀胱,定位前1.0、0.5 h口服造影剂各400 ml,每例病例同一时间分别行前列腺癌仰、俯卧位CT定位扫描,定位后勾画靶区及盆腔重要器官结构,三维计划设计。分别评估CTV、PTV、直肠、膀胱、股骨头和盆腔小肠体积,CTV、PTV、直肠、膀胱、股骨头、盆腔小肠平均照射剂量,50 Gy膀胱、直肠和30 Gy股骨头受照体积及盆腔小肠最大照射剂量,对比仰、俯卧位各器官结构体积变化以及照射剂量差别。结果无论是仰卧位还是俯卧位,靶区均能得到均匀理想的剂量分布。直肠体积在不同体位下变化较大。仰、俯卧位各正常组织的平均体积分别为:膀胱(306±58)、(325±69)cm3,直肠(59±20)(、144±96)cm3,小肠(94±51)、(75±18)cm3。CTV、PTV、股骨头体积变化不明显。CTV、PTV、膀胱、股骨头、小肠平均照射剂量在不同治疗体位下差别不大。仰、俯卧位直肠平均照射剂量分别为(3364±995)(、2221±1176)cGy。DVH分析显示直肠在俯卧位保护最好,仰、俯卧位50 Gy直肠体积分别占总体积的39.5%±19.7%、19.8%±15.7%。俯、仰卧位小肠最大照射剂量分别为(234±143)(、275±220)cGy。结论前列腺癌俯卧位三维适形放疗使直肠体积明显增大,可因减少直肠照射而起一定保护作用。     

HSP90在原发性肾病综合征发生和治疗中的意义

【目的】热休克蛋白90（HSP90）是糖皮质激素受体（GR）的伴侣蛋白，本研究探讨HSP90在原发性肾病综合征（INS）发生和糖皮质激素（GC）在治疗中的作用本质。【方法】以INS患者和GC敏感、抵抗的细胞株为研究对象。分析其HSP90、GR表达水平及HSP90的亚细胞分布；并采用HSP90特异性阻断剂研究HSP90对GC反应性的影响。【结果】与对照组比较，INS患者HSP90mRNA表达水平明显增高；而且INS患者中GC抵抗组HSP90 mRNA表达显著高于GC敏感组（P〈0．05）。深入研究发现对照组的HSP90主要分布在细胞浆中，核内仅有微量分布；INS患者的HSP90表达有所增加，并且GC抵抗组与敏感组比较，HSP90明显趋向细胞核内分布（P〈0．001）。用HSP90特异性阻断剂后发现激素敏感细胞株的GC反应性也显著下降（P〈0．01）。【结论】研究表明HSP90的异常表达及亚细胞分布变化可能是导致GC抵抗的重要机制，其一方面可能影响内源性GC对神经-内分泌-免疫网络的功能调节，进而影响机体免疫内环境的稳定，从而参与INS等免疫损伤性疾病的发病；另一方面则可能干预患者对外源性GC的治疗反应，影响临床疗效。     

IL-15cDNA转染人喉癌细胞系的建立及其表达的研究

目的建立转人白细胞介素-15(hIL-15)基因的喉癌细胞株,并研究hIL-15的表达情况。方法将携带人白细胞介素-15的质粒pcDNA3.1( )-hIL-15转导入人喉表皮样癌细胞Hep-2中,G418筛选阳性克隆,RT-PCR、Westernblot和ELISA法对hIL-15的表达进行检测。结果IL-15基因成功地转导入Hep-2细胞中并能高效表达。RT-PCR电泳结果显示hIL-15基因在mRNA水平有表达;ELISA法测得106个转染阳性细胞24h内培养上清液中hIL-15的含量为(185.0±12.2)pg/ml,空载体转染及未转染的细胞未检测到hIL-15。结论hIL-15基因成功转染人喉癌细胞系Hep-2细胞且能持续大量表达。     

微阵列技术结合免疫组化分析BRCA2在肺鳞癌中的表达

目的研究BRCA2(乳腺癌易感基因2)在肺鳞癌中的表达情况,以筛选肺鳞癌分子标志物。方法利用cDNA微阵列技术研究6个分期为Ⅰ期的手术切除鳞癌标本的基因表达谱,重点分析BRCA2的表达情况,并利用免疫组化方法测定其蛋白表达水平。结果BRCA2基因在全部6个肺鳞癌标本中均呈下调表达,免疫组化结果显示BRCA2蛋白在20个肺鳞癌标本中表达较低(与20例正常肺组织比较),与cDNA微阵列技术检测结果相符。结论cDNA微阵列技术结合免疫组化可用于肺鳞癌分子标志物的筛选,BRCA2可初步作为肺鳞癌的侯选分子标志物。     

血液灌流过程中常见并发症的处理及临床护理

血液灌流是指将患者的血液引入装有固态吸附剂的灌流器中，以清除某些外源性或内源性毒素，并将净化了的血液输回体内的一种治疗方法。1999～2005年我科对83例病人进行血液灌流治疗，效果良好。本文对血液灌流过程中可能出现的常见并发症的处理方法及护理体会进行总结并报告如下。     

长期静脉补铁改善血液透析患者肾性贫血的作用

目的探讨血液透析患者长期静脉补铁改善肾性贫血的效果以及对促红细胞生成素(EPO)作用的影响。方法选择56例病情稳定的血液透析患者随机分成两组:静脉组和口服组,各28例,疗程6个月。静脉组:于每次透析时补给100mg右旋糖酐铁,共10次,然后每2周给予维持量100mg。口服组:前3个月口服硫酸亚铁525mg/d,后3个月停服,按上述方法改用静脉补铁。比较两组贫血治疗效果、铁代谢和生化指标的变化、EPO用量以及不良反应发生情况。结果治疗后静脉组血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、血清铁蛋白(SF)、转铁蛋白饱合度(TSAT)进行性升高,3个月后80%以上的患者贫血得到纠正,EPO用量较基数减少约28%。口服组治疗3个月时,Hb和Hct增幅不大,而SF和TSAT则逐月降低;第4个月起改用静脉补铁后,SF、TSAT很快升高,贫血迅速得到改善,EPO用量开始明显减少。结论长期静脉补铁不仅能及时有效地改善血液透析患者的贫血,减少EPO用量,而且经济、安全。