犬同种异体脱钙骨基质复合骨髓基质干细胞片层与内皮祖细胞的体外培养

目的:观察犬骨髓基质干细胞(bone marrow stroma stem cells,BMSCs)细胞片层及内皮祖细胞(endothelial progenilor cells,EPCs)在脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)上的生长情况,探讨利用其复合体构建功能性血管化组织工程骨的可行性.方法:应用细胞片层技术制备BMSCs细胞片层,培养犬内皮祖细胞,制备犬同种异体DBM.将DBM分别与BMSCs细胞片层、内皮祖细胞复合.测量DBM孔隙率,倒置相差显微镜、扫描电镜下观察DBM的结构及BMSCs细胞片层、EPCs在DBM上的附着、生长情况.结果:成功构建DBM/BMSCs细胞片层、DBM/EPCs复合体,BMSCs细胞片层、EPCs在DBM上的附着、生长状况良好,增殖迅速.结论:DBM/BMSCs细胞片层、DBM/EPCs复合体能够为生成具有骨样结构的组织工程骨提供良好的条件,并为组织工程骨的血管化创造有利的环境.     

饥饿期粪肠球菌生物膜毒力因子明胶酶E表达研究

目的:研究粪肠球菌生物膜形成相关毒力因子明胶酶E(gelE)在饥饿期及药物作用后的表达情况。方法:体外建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型,分别以1%、2.5%、5.25%次氯酸钠溶液作用于各时期粪肠球菌生物膜后,用Real-time PCR对gelE的基因表达相对量进行检测。结果:gelE基因表达相对量,饥饿期高于稳定期及对数期(P<0.05);用药后,3个期gelE基因表达相对量,5.25%次氯酸钠溶液组低于2.5%次氯酸钠溶液组和1%次氯酸钠溶液组(P<0.05)。结论:饥饿期粪肠球菌生物膜形成相关毒力因子gelE较对数期及稳定期表达增强。次氯酸钠浓度依赖性可抑制粪肠球菌毒力因子gelE的表达。     

真核表达载体pIRES2-EGFP-PELP1的构建及其在人牙周膜干细胞中的表达

目的 克隆人源脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(proline-,glutanic acid-,leucine-rich proteinl,PELP1)基因全长,构建PELP1基因全长过表达载体,研究PELP1基因表达特点,为PELP1基因在不同组织细胞中的功能性研究奠定基础.方法 采用反转录PCR法从MCF-7细胞总RNA中克隆PELP1基因全长,与含有EcoR I与Xho I双酶切位点的真核过表达载体pIRES2-EGFP质粒载体连接,构建重组质粒pIRES2-EGFP-PELP1.经双酶切及测序鉴定重组质粒中PELP1基因的完整性及正确性.运用脂质体将重组质粒转染至人牙周膜干细胞中,运用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及蛋白质印迹法分别从基因和蛋白水平对转染细胞中PELP1的表达进行检测.结果 成功克隆出PELP1基因全长,并将其插入至pIRES2-EGFP过表达载体中,经双酶切鉴定和测序鉴定证实目的质粒片段插入无误.重组质粒pIRES2-EGFP-PELP1转染48 h后PELP1基因水平是转染空质粒人牙周膜干细胞的(148.0±1.3)倍,二者差异有统计学意义(P＜ 0.005).蛋白质印迹法结果显示,与转入pIRES2-EGFP的人牙周膜干细胞中PELP1蛋白相对表达量(0.3300±0.0117)相比,转入pIRES2-EGFP-PELP1重组质粒的人牙周膜干细胞中PELP1蛋白相对表达量(0.6200 ±0.0045)显著增高,二者差异有统计学意义(P＜ 0.005).结论 本项研究成功运用qRT-PCR反应从MCF-7细胞中克隆出PELP1全长基因,并成功构建pIRES2-EGFP-PELP1真核过表达载体.     

肾综合征出血热发热期加用黄芪注射液合参麦注射液疗效观察

目的观察黄芪注射液合参麦注射液对肾综合征出血热（HFRS）患者各期的影响。方法将36例HFRS患者分为黄芪注射液合参麦注射液治疗组（19例）及对照组（17例）。分别于发热期在西药治疗基础上给予黄芪注射液合参麦注射液或单纯西药治疗。结果治疗组越低血压休克期(94.74％)、越少尿期率(94.74%),均明显多于对照组（分别为64.71％和58.82％,P均<0.05）;治疗组多尿期、尿素氮、蛋白尿持续时间〔分别为（4.14±3.11）日,(6.17±3.45)日和(5.14±3.45)日〕与对照组〔分别为(7.15±2.81）日,(10.13±4.19）日和(9.56±4.43)日〕比较明显缩短,P均<0.01。结论黄芪注射液合参麦注射液可加强HFRS患者的抗病能力,减少休克期、少尿期发生率,缩短其它各期发病时间,最终缩短病程。     

肝移植后急性造血功能停滞4例报告与文献复习

目的报告4例异体原位肝移植后发生急性造血功能停滞和复习相关文献。方法临床病例报告与文献综述。结果肝移植后合并急性造血功能停滞是临床罕见的血液系统严重并发症,与肝移植相关移植物抗宿主病、病毒感染等因素相关。治疗原则为祛除病因,环境保护,预防和控制感染,促进造血,预防出血等。结论肝移植后急性造血功能停滞,如及时诊断,积极治疗,预后较好。     

学龄前儿童与成人汉语听觉失匹配反应的特征比较

目的考察学龄前儿童与成人汉语听觉失匹配反应(MMR)的特点。方法9 名学龄前健听儿童与8 名健听成人采用被动Oddball 模式进行事件相关电位测试,刺激为/bal/、/pal/辅音对。结果所有被试均诱发出明显MMR,成人表现为典型失匹配负波,学龄前儿童表现为宽大正向位移,出现的时间较晚,振幅较大。多因素方差分析显示,组别的主效应显著,学龄前儿童的MMR潜伏期长于成人,振幅大于成人(P<0.05)。结论获得了3~6 岁儿童和成人较为稳定、各具特点的MMR波形和指标值。     

超声诊断甲状腺内鱼刺异物1例

鱼刺异物上消化道异物中最常见的异物之一,常停留在腭扁桃体、会厌谿、梨状窝、食管等处,其穿透食管壁进入甲状腺者,比较少见。鱼刺异物损伤消化道以及颈部甲状腺组织,形成穿通伤,没有损伤颈部大的血管以及神经者更是罕见。现将我院收治的此类颈部异物损伤典型病例报告如下。     

大连地区儿童肺炎链球菌耐药及血清分型研究

目的研究大连地区住院儿童感染肺炎链球菌（SP）的耐药性及其血清分型。方法 SP菌株均从5岁以下儿童患者鼻咽抽吸物中分离。血清分型通过多重PCR方法鉴定,药敏试验通过E-test方法来判断,而耐药基因ermB及mefA/E则由PCR方法来检测。结果从2010年7月到2013年6月,共分离得到131例SP。药敏结果显示所有的131例菌株对红霉素以及克林霉素全部耐药,大约有39.8%的菌株对青霉素G不敏感,而所有的菌株则均对左氧氟沙星和万古霉素敏感。此外,有129例（98.5%）属于多种耐药菌株。血清分型结果显示本地区SP血清型以19F（28.2%）、19A（19.1%）、6B（17.6%）及23F（14.5%）为主。且在这些血清型中的SP中,青霉素不敏感肺炎链球菌（PNSP）对阿莫西林、头孢曲松及头孢噻肟的不敏感性要显著高于青霉素敏感肺炎链球菌（PSSP）（P〈0.05）。7价疫苗（PCV7）和13价疫苗（PCV13）覆盖的血清型分别占68.7%和87.8%。此外,49株（37.4%）单独携带ermB基因,而82株（62.6%）同时携带ermB和mefA/E两种耐药基因。结论大多数分离的SP对青霉素G仍然相对敏感,所有菌株对左氧氟沙星和万古霉素敏感。本地区SP血清型以19F、19A、6B及23F为主。鉴于19A血清型的高流行率,引入PCV13更能有效地预防儿童肺炎链球菌的感染和控制耐药菌株传播。     

三种功能障碍评估量表在麦肯基疗法治疗腰椎间盘突出症疗效评估中的应用

目的：探讨三种功能障碍评估量表在麦肯基疗法治疗腰椎间盘突出症疗效评估中的应用。方法：腰椎间盘突出症患者42例,均进行麦肯基疗法治疗。治疗前后采用简式 McGill疼痛问卷（SF-MPQ）、中文版Oswestry功能障碍指数（CODI）、汉译Roland-Morris功能障碍调查表（CRMDQ）进行评定。结果：治疗2周后,42例患者的SF-MPQ、CODI、CRMDQ评分均较治疗前明显下降（P＜0．01）。结论：麦肯基疗法可有效改善腰椎间盘突出症患者的疼痛和功能障碍;SF-M PQ、CODI及CRMDQ等功能障碍评估量表可有效地应用于评估腰椎间盘突出症患者疼痛及功能状态的临床工作中。     

成人急性淋巴细胞白血病患者异基因造血干细胞移植预后相关因素探讨

目的：回顾性分析影响成人急性淋巴细胞白血病（ALL）异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后疗效的相关因素。方法：选择1995年-2011年于南方医科大学南方医院血液科接受a110—HSCT的200例ALL患者,分析影响移植疗效的因素,包括年龄、免疫分型、BCR／ABL融合基因、移植前疾病状态、HLA配型、预处理方案、移植物抗宿主病（GVHD）及CsA减免和供体淋巴细胞输注（DLI）等。结果：中位随访时间为891d（367~6212d）,复发55例,总复发率为27．5％。死亡82例,总病死率为41．0％。单因素及Cox回归模型分析均显示具有BCR／ABL融合基因及移植时非CR状态是复发与死亡的危险因素。结论：ALL患者预后较差,allo-HSCT后复发率及病死率较高,复发与死亡的危险因素有Ph染色体和移植时非CR状态。