酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402细胞的抑制作用及对NK细胞杀伤活性的影响

[目的]研究三肽化合物酪丝亮肽(tyroserleutide,YSL)对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的抑制作用及对自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤活性的影响。[方法]建立人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤模型,观察YSL对肿瘤生长的抑制作用;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测YSL对正常小鼠及人肝癌BEL-7402荷瘤鼠的NK细胞杀伤活性的影响。[结果]YSL[160μg(/kg·d)]能抑制BEL-7402的生长,肿瘤抑制率为72.23%,且能增强BEL-7402荷瘤裸鼠及正常小鼠NK细胞杀伤活性,与生理盐水组相比均具有显著性差异(P<0.05)。[结论]YSL对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤有抑制作用,并具有增强正常及荷瘤小鼠NK细胞杀伤肿瘤细胞活性的作用。     

骨巨细胞瘤p73、p15蛋白表达研究

目的观察骨巨细胞瘤（GCT）中p73、P15蛋白的表达，探讨其临床意义及相关性。方法30例骨巨细胞瘤标本分别按照Ennecking分期、有无复发、有无转移进行分组。应用S-P免疫组化方法检测标本组中的p73蛋白和P15蛋白的表达。结果p73蛋白和P15蛋白在GCT中的阳性表达率分别为40．0％和56．7％；p73蛋白和P15蛋白的表达强度随Ennecking分期的增高而增加（P〈0．01），二者在复发组的表达均高于无复发组（P〈0．05，P〈0．01）；此外，P15蛋白的表达在转移组高于无转移组（P〈0．01）；p73、P15蛋白在GCT中的表达呈正相关（P〈0．05）。结论p73、P15蛋白的表达与骨巨细胞瘤的生物学行为有相关性，有助于评估肿瘤的预后。p73和P15的相关性可能是肿瘤抑制性基因网络性结构复杂性的表现。     

结晶型硫化镍诱发细胞恶变过程中端锚聚合酶mRNA的表达

背景与目的:探讨结晶型硫化镍(NiS)诱发人支气管上皮细胞恶变过程中端锚聚合酶(tankyrase)mRNA的变化。材料与方法:用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测细胞tankyrasemRNA的表达。结果:Tankyrase在细胞恶变过程中不同阶段细胞的表达均高于正常细胞。结论:结晶型NiS诱发人支气管上皮细胞恶性转化涉及了tankyrase活性改变,tankyrase活性改变可能是结晶型NiS诱发肺癌的早期分子事件。     

结直肠癌组织Tip60蛋白表达及其临床意义探讨

目的:探讨结直肠癌组织中Tip60蛋白的表达及其临床意义。方法:选择2010-02-01-2011-02-01嘉兴市第一医院行手术治疗的结直肠癌患者100例和结直肠腺瘤患者20例,采用免疫组织化学检测Tip60蛋白在100例结直肠癌组织和相应癌旁正常组织(距离癌组织>3cm)及20例结直肠腺瘤组织中的表达及差异,观察Tip60和Ki-67及Bcl-2蛋白在结直肠癌组织中表达的相关性。结果:Tip60蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为24%(24/100),癌旁正常组织为72%(72/100),结直肠腺瘤组织为75%(15/20),结直肠癌中的表达明显低于癌旁组织,χ2=46.154,P<0.001;也低于腺瘤组织,χ2=19.761,P<0.001;癌旁组织及腺瘤组织的表达差异无统计学意义,χ2=0.075,P=0.781。Tip60的表达与患者性别(χ2=1.629,P=0.202)、年龄(χ2=1.170,P=0.279)、肿瘤浸润深度(χ2=3.102,P=0.078)及淋巴结转移(χ2=0.718,P=0.397)无关,而与肿瘤大小(χ2=14.649,P<0.001)、肿瘤分化程度(χ2=6.469,P=0.039)和Duke分期(χ2=4.702,P=0.030)相关。Tip60和Ki-67的表达呈负相关,r=-0.273,P=0.006,Tip60和Bcl-2蛋白的表达呈负相关,r=-0.216,P=0.031。Logistic回归分析发现,肿瘤大小是结直肠癌Tip60蛋白表达的独立相关因素,B=-1.833,P<0.001。结论:Tip60蛋白在结直肠癌组织中表达下调,且与结直肠癌的进展有关,Tip60可作为预测结直肠癌进展和预后的生物学指标。     

不同亚型的半乳凝素-9对结肠癌LoVo细胞和内皮细胞体外黏附作用的影响

目的 研究不同亚型的半乳凝素-9对结肠癌LoVo细胞侵袭转移相关分子表达的调节作用,以及该调节作用对LoVo细胞与内皮细胞体外黏附作用的影响.方法 半乳凝素-9基因不同亚型的表达载体转染结肠癌LoVo细胞24 h后,分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测整合素β1、钙黏着素E、选择素E、细胞间黏附分子-1、CD44和基质金属蛋白酶-9表达的变化.LoVo细胞分别在转染半乳凝素-9、转染半乳凝素-9+半乳凝素-9抗体、转染半乳凝素-9+选择素E抗体和转染半乳凝素-9+β-乳糖条件下进行体外LoVo细胞与内皮细胞的黏附实验.结果 半乳凝素-9L能下调选择素E mRNA和蛋白的表达,半乳凝素-9M和半乳凝素-9S能上调选择素E mRNA和蛋白的表达.体外黏附实验中,转染空载体、转染半乳凝素-9L、转染半乳凝素-9M和转染半乳凝素-9S组的平均荧光强度分别为0.90±0.20、0.94±0.24、1.60±0.11和1.45±0.13.半乳凝素-9M和半乳凝素-9S可促进kVo细胞黏附于内皮细胞(P<0.05),而半乳凝素-9抗体、选择素E抗体和β-乳糖均可抑制此作用.结论 3种不同亚型的半乳凝素-9通过不同的方式调节LoVo细胞选择素E mRNA和蛋白的表达,影响LoVo细胞与内皮细胞的体外黏附;3种不同亚型的半乳凝素-9在介导肿瘤细胞转移过程中的作用可能是不同的.     

RNAi沉默MCM7基因对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤影响研究

目的探讨微小染色体维持蛋白7(miniehromosome maintenanceprotein7,MCM7)基因RNAi(RNA interference)的重组慢病毒载体,对人肝癌细胞SMMC-7721 MCM7基因表达和裸鼠移植瘤生长的影响。方法构建重组逆转录慢病毒载体MCM7-shRNA,以MCM7基因沉默重组慢病毒颗粒(LV-shRNA-MCM7)感染SMMC-7721细胞,作为实验组;以对照慢病毒颗粒(LV-shRNA-NC)感染SMMC-7721细胞,作为阴性对照组;空白对照组常规培养,不做任何处理。通过嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。3组细胞分别接种至裸鼠皮下,建立人肝癌裸鼠移植瘤模型。观察裸鼠成瘤情况、移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线;4周后测定肿瘤体积和质量,并用RT-PCR、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测移植瘤中MCM7的表达情况。结果 MCM7-shRNA慢病毒载体构建成功。裸鼠接种癌细胞后第6天均有肿瘤形成,与空白对照组和阴性对照组相比,实验组的肿瘤生长速度明显减慢,实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均体积分别为(27.72±7.80)、(81.86±10.91)和(79.75±16.61)mm3,差异有统计学意义,F=61.949,P<0.05;实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均质量分别为(0.19±0.06)、(0.501±0.14)和(0.509±0.18)g,差异有统计学意义,F=18.41,P<0.05。实验组MCM7mRNA的相对表达量为0.253±0.198,阴性对照组1.213±0.548,空白对照组1.201±0.744,实验组相比阴性对照组和空白对照组明显下降,差异有统计学意义,F=4.091,P<0.05;实验组MCM7蛋白相对表达量为0.207±0.015,阴性对照组1.116±0.062,空白对照组1.088±0.040,实验组相比阴性对照组和空白对照组明显下降,差异有统计学意义,F=292.778,P<0.05。MCM7蛋白在阴性对照组和空白对照组中阳性表达率均为100%(10/10),在实验组中为30%(3/10),实验组明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义,χ2=18.261,P<0.001。结论慢病毒沉默SMMC-7721细胞MCM7基因表达能有效抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,MCM7基因可能成为肝癌基因治疗的有效靶点。     

宫颈高危型人乳头瘤病毒感染的中医证候特征研究

【目的】 探究宫颈高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染者中医证候特征,为临床辨证论治提供参考。【方法】 收集2020年 9月至2022年10月于天津中医药大学第二附属医院妇科就诊行HPV检测确诊为宫颈HR-HPV感染者进行中医证候调查,总 结其病位、病性特点及证型分布。【结果】 宫颈HR-HPV感染者的临床特征主要以阴道分泌物异常为主,占63.40%。病位证 素为胞宫、脾、肝、肾、经络、胃、心神、心,其中以胞宫、脾、肝最多见,分别占67.00%、58.80%和55.80%。病性证素 为湿、热、气滞、血瘀、气虚、阳虚、阴虚、痰、寒,其中以湿、热、气滞、血瘀最多见,分别占 66.40%、56.60%、 36.00% 和 31.80%。各年龄段病位证素均以胞宫为主,病性证素均以湿、热为主。双病位证素以胞宫-脾最常见,三病位证 素以胞宫-脾-肝最常见。双病性证素以湿-热最常见,三病性证素以湿-热-血瘀最常见。根据聚类分析结果,结合临床实 际,发现宫颈HR-HPV感染者的主要证型分布为湿热瘀阻、肝郁气滞、心肾不交、脾胃阳虚。【结论】 宫颈HR-HPV感染者 的中医病位证素主要在胞宫,兼脾、肝、肾多脏腑合病;病性证素以湿、热为主,呈现虚实错杂的特点;中医证型主要是 湿热瘀阻、肝郁气滞、心肾不交、脾胃阳虚。     

特异性小干扰RNA沉默Itch基因增强小鼠T细胞对MFC胃癌细胞的免疫杀伤作用

背景与目的：Itch蛋白是一种具有调节T细胞免疫应答起始的关键分子,属于E3泛素转移酶家族,广泛参与细胞内多种信号蛋白如ZAP70、P85、VAV、PLC-γ和PKC-θ等的泛素化修饰过程,在肿瘤诱导机体免疫耐受中起着重要作用。Itch通过调节T细胞表面受体活性及转移生长因子-β信号通路来介导T细胞免疫无反应性,诱导外周组织Treg细胞增殖。因此,通过改变Itch蛋白表达活性有望成为一种治疗自体免疫性疾病和肿瘤的有效途径。我们利用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默T细胞Itch基因的表达,观察转染T细胞对小鼠MFC胃癌细胞的体外免疫杀伤作用。方法：分离615小鼠脾脏T细胞,筛选高效特异性沉默Itch基因的siRNA序列转染T细胞,蛋白质印迹法检测各分组Itch蛋白的表达水平;转染72 h后,利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞因子IL-2、INF-γ分泌情况,比较空白组、空转组及转染组T细胞与小鼠MFC胃癌细胞混合培养肿瘤杀伤率。结果：转染48 h后,与对照组相比,转染T细胞Itch蛋白表达率降低至16%;转染72 h后,检测转染组、空转组、空白组细胞因子IL-2分泌水平分别为(1891.96±141.91)pg/mL,(1241.69±91.67)pg/mL,(1175.03±89.14)pg/mL(P<0.001),转染组、空转组、空白组细胞因子INF-γ分泌水平分别为(958.33±75.46)pg/mL,(683.33±66.67)pg/mL,(691.72±68.72)pg/mL(P<0.05)。在体外实验中,与空白组及空转组T细胞相比,转染组T细胞能更高效地杀伤小鼠MFC胃癌细胞,最高杀瘤率达到(54.18±2.96)%。结论：利用特异性siRNA技术沉默Itch基因能够促进小鼠T细胞因子IL-2、INF-γ分泌,增强T细胞对小鼠MFC胃癌细胞的体外免疫杀伤作用。     

Notch3在肿瘤发生发展中的作用

Notch信号通路是一个高度保守的信号通路,在脊椎动物发育过程中扮演重要角色。研究发现Notch受体介导的信号通路在多种肿瘤中异常表达。近年来研究表明Notch3与多种肿瘤的发生发展有着密切的联系,Notch3在调控肿瘤细胞的凋亡、增殖和分化中起着重要作用,本文就Notch3在各类常见肿瘤中的研究进展进行综述,重点探讨Notch3异常表达与肿瘤形成、发展的分子机制,以期推动Notch3作为药物作用靶点的研究。     

多瑞吉对恶性肿瘤治疗相关性疼痛止痛作用的前瞻性研究

目的 探讨用芬太尼贴剂(多瑞吉)治疗恶性肿瘤放化疗所致中重度口腔黏膜疼痛的可行性及安全性.方法 采用前瞻性随机对照研究的方法,将恶性肿瘤放、放化后出现口腔疼痛视觉评分(VAS)≥4分的患者,随机分为研究组和对照组:对照组仅给予VitBco漱口水含漱;研究组在此基础上加用多瑞吉治疗,起始剂量为2.5 mg,每3天更换,据疼痛程度调整.结果 研究组疼痛缓解率为87.8﹪,而对照组为43.48﹪,差异有统计学意义(P＜0.05);多瑞吉平均起效时间2.78±0.96天.研究组和对照组在进食时疼痛评分、进食恐惧感、对普鲁卡因的依赖、对治疗的信心及睡眠等方面的差异有统计学意义(P＜0.05).不良反应主要表现为头昏、呕吐等,经对症治疗后可明显改善,未出现对多瑞吉成瘾及其他严重的不良反应.结论 多瑞吉对恶性肿瘤放化疗所致口腔疼痛有较好的止痛效果,且较迅速、安全,对放化疗所致中重度口腔疼痛而服用止痛药物困难的患者又提供了一个好的止痛方法.