电穿孔介导的pIRES-hVEGF165-EGFP转染对牵引成骨过程中早期血管生成的影响

目的 探讨电穿孔介导的基因治疗对下领骨牵引成骨过程中早期血管生成的影响.方法 32只新西兰大白兔随机分为4组:质粒+电穿孔组(A组),质粒组(B组),生理盐水+电穿孔组(C组),空白对照组(D组).各组动物分别于注射后1、3、7、14 d处死,取牵引区组织进行组织学检查、电镜观察、CD34免疫组织化学染色及微血管密度检测.结果 A、B组血管内皮细胞呈增殖活跃状态;C、D组多数血管内皮细胞部分呈现退变及凋亡早期改变.免疫组化染色发现,转染后第1天血管壁内皮细胞浆CD34表达较弱;第3、7、14天,牵引区肉芽组织血管内皮细胞均出现CD34阳性表达.A组CD34阳性表达较B组强,A、B组的CD34表达持续阳性且呈上升趋势;C、D组表达最弱,CD34阳性表达维持在第1天水平上平稳波动.结论 电穿孔介导的pIRES-hVEGF165-EGFP重组质粒体内转染能够促进牵引区早期微血管的生成,使局部血管增生、渗入,增加骨断端的血流量.对调节和促进骨的生长和修复过程具有重要作用.     

热激活蛋白70识别蛋白在脊髓缺血再灌注损伤后表达变化及其意义

目的:探讨热激活蛋白70识别蛋白(heat shock cognate protein 70,HSC70)在兔脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCIRI)后表达变化及其意义。方法:随机将36只新西兰白兔分成6组(每组6只),采用Zivin法建立兔SCIRI模型。A组只显露腹主动脉而不阻断血流,30min后关闭腹腔,取材(L3~L5段脊髓);B组阻断腹主动脉血流30min后关闭腹腔,取材;缺血再灌注组(C、D、E、F组)阻断腹主动脉血流30min后停止夹闭,再灌注6、12、24、48h时采用改良Tarlov评分分别进行运动功能评价后取材。应用差异蛋白质组学技术荧光差异双向凝胶电泳联合质谱分析筛选出应激相关蛋白HSC70,利用免疫印迹对质谱进行印证,结合免疫组化研究其在脊髓内的时空变化特点。结果:成功建立SCIRI兔模型,SCIRI后实验动物后肢功能逐渐好转,C~F组改良Tarlov评分分别为1.167±0.753、1.667±0.516、2.668±0.516和2.167±0.752分,再灌注24h达SCIRI早期最好水平,再灌注48h略有下降。应激相关蛋白HSC70在A组印迹清晰,B组印迹轻微加强,C组和D组印迹再次加强,E组印迹显著减弱至最低,F组印迹灰度回归至再灌注6~12h水平。A组灰质中部体积较小中间神经元胞浆见轻度免疫反应;B组灰质各部位神经元胞浆免疫反应程度与A组相当;C组胶质细胞核免疫反应加重;D组神经元免疫反应减轻,但胶质细胞及雪旺细胞核免疫反应较强烈;E组神经元免疫反应进一步减弱,低于A组水平;F组神经元胞浆免疫反应加重,胶质细胞及雪旺细胞核免疫反应仍强烈。结论:HSC70参与SCIRI发生和发展过程,可作为SCIRI预防、诊断和治疗的靶点。     

响应面法优化β-胡萝卜素液体发酵培养基

用响应面法对三孢布拉霉（Blakeslea trispora）液体发酵β-胡萝卜素的培养基进行了优化。首先用快速登高路径逼近β-胡萝卜素最大产量区域,然后根据快速登高法的实验结果进行响应面实验。运用逐步回归分析法,获得β-胡萝卜素产量与柠檬酸、棉籽油、黄豆粉的最优回归方程,且分析了各因子间的交互效应。最后,通过岭脊分析（Ridge max）得到β-胡萝卜素产量最大值时的组合为：柠檬酸3.10 g/dL、棉籽油11.28 g/dL、黄豆粉2.54 g/dL。β-胡萝卜素产量可达1.02 g/L,比优化前提高了25%。     

既往腹部手术史对行腹腔镜辅助根治性全胃切除术患者的影响

目的探讨既往腹部手术史对行腹腔镜辅助根治性全胃切除术患者的影响。方法2008年1月至2010年12月间福建医科大学附属协和医院对328例胃癌患者施行腹腔镜辅助根治性全胃切除术,其中既往有腹部手术史者（PAS组）57例,无腹部手术史者（NPAS组）271例。比较两组患者术中及术后情况．并对影响术后并发症发生的危险因素进行单因素及多因素分析。结果PAS组和NPAS组平均淋巴结清扫数目分别为（30．2±10．5）和（31．1±9．4）枚／例,差异无统计学意义（P〉0．05）。与NPAS组相比,PAS组患者手术时间更长[（247．0±60．5）min比（214．7±57．0）min,P〈0．01]、术后并发症发生率更高[21．1％（12／57）比11．1％（30／271）,P〈0．05];但两组患者术中出血量、术中输血例数、中转开腹率、术后下床时间、术后排气时间、进食流质时间、胃管拔除时间和术后住院时间的差异均无统计学意义（P〉0．05）。多因素分析显示,既往腹部手术史并不是影响患者术后并发症发生的独立危险因素（P〉0．05）。结论既往有腹部手术史的胃癌患者行腹腔镜辅助根治洼全胃切除术是可行的。既往腹部手术史虽然会延长手术时间,但其并不是术后并发症的独立危险因素。     

国产超声刀在普外科开放手术中的临床应用：附视频

目的探讨国产超声刀在普外科开放手术应用中的有效性及安全性。方法将2008年9月至2010年2月60例行开放手术的患者,随机分为试验组和对照组,各30例。试验组运用国产BBT超声手术系统,对照组运用美国强生超声刀,观察并比较两组患者组织切割时间、血管凝同时间、术中出血量、术后住院天数、术后腹腔引流管引流量等指标。结果试验组和对照组之间术中出血量无明显差异[（89．50±27．65）mlvs5（95．23±22．95）ml,P=-0．298],而且术后住院时间【（17.3±8．8）dvs（16．1±9．9）d,P=0．6041及术后腹腔引流[（180．6±61．0）ml口s（174．9±44．4）ml,P=0．674]在两组之间差异均无统计学意义;但与对照组相比,试验组的组织切割平均时间[（6．95±1．41）s vs（4．32±1．11）s,P〈O．05]和血管凝同时间[（6．00±0.314）s vs（2．68±0．123）s,P〈0．001]要长。结论国产BBT超声手术系统安全有效,符合临床使用的要求,可以在临床推广运用。     

肺耐药蛋白在胰腺癌细胞中的表达及意义

目的探讨肺耐药蛋白(lungresistanceprotein,LRP)在胰腺癌细胞株中的表达及意义。方法采用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测8株胰腺癌细胞株(SW1990、PCT-2、PCT-3、PCT-4、Aspc-1、Capan-1、Mia-PaCa-2及Panc-1)中LRP在基因水平和蛋白水平的表达。结果RT-PCR结果显示,在胰腺癌细胞株PCT-2中未检测到LRPmRNA的表达,在PCT-4、Aspc-1和Panc-1中,LRPmRNA表达条带较强;在SW1990、PCT-3、Capan-1和Mia-PaCa-2中LRPmRNA表达条带较弱;半定量平均表达水平为0.56±0.33。免疫细胞化学结果证实,在PCT-2细胞中无LRP蛋白表达,PCT-3细胞中LRP蛋白弱表达,SW1990、Aspc-1和Capan-1细胞中LRP蛋白中度表达,而在PCT-4、Mia-PaCa-2和Panc-1细胞中可见LRP蛋白的过度表达。结论在胰腺癌细胞中存在LRP的先天性表达,LRP过表达可能是介导胰腺癌细胞先天性耐药的重要机理之一。     

吉西他滨与胰腺癌化疗耐药

目的探讨胰腺癌对吉西他滨化疗产生耐药性的相关机理。方法复习近年国、内外相关文献，对介导胰腺癌吉西他滨耐药性的主要基因及信号通路加以综述。结果癌基因c—Src与bcl—X1、NF-κB炎症信号通路、细胞因子IL-1β及NO等与介导胰腺癌对吉西他滨的耐药性密切相关；多药耐药基因MDR1／P-gP与胰腺癌吉西他滨耐药的相关性仍有待研究。结论癌基因c—Src与bcl—X1、NF-κB炎症信号通路等可能成为新的治疗靶点以增加胰腺癌的化疗敏感性；介导胰腺癌化疗耐药的关键基因与中心信号通路尚有待阐明。     

结直肠癌肝转移组织中胸苷磷酸化酶表达

目的 检测胸苷磷酸化酶(TP)在人结直肠癌肝转移组织中的表达,分析该表达与肿瘤相关巨噬细胞(TAM)及与患者预后的相关性.方法 采用抗TP的单克隆抗体654-1及1C6-203、抗巨噬细胞标记物cD68的单克隆抗体PG-M1,对28例人结直肠癌肝转移标本进行免疫组织化学染色分析,对3种抗体阳性细胞进行细胞计数,计算各种阳性细胞之间,以及各种阳性细胞与患者预后的相关性.结果 28例标本中,转移癌细胞表达TP甲阳性的仅2例,癌组织中表达TP的阳性细胞主要是癌巢周围的间质细胞,特别是肿瘤相关巨噬细胞(TAM).通过对3种阳性细胞计数发现,2种TP抗体染色阳性细胞数相关(r=0.697,P<0.01);654-1阳性细胞数与TAM细胞数相关(r=0.703,P<0.01);而1C6-203阳性细胞数与TAM细胞数相关较弱,无统计学意义(r=0.359,P=0.06).16例死亡患者的术后生存时间与3种阳性细胞数目均无相关(P>0.05).结论 在人结直肠癌肝转移组织中表达TP阳性的细胞主要是TAM,组织中TP阳性细胞及CD68阳性巨噬细胞的多少与患者预后生存的时间无相关.     

糖尿病与结直肠癌及其生物学行为的关系

目的探讨糖尿病与结直肠癌发生及生物学行为的关系。方法对2006—2009年南方医科大学附属南海人民医院486例结直肠癌患者（结直肠癌组）与533例同期收治的非结直肠癌患者（对照组）进行病例对照研究,比较两组患者糖尿病并发情况及糖尿病病程对结直肠癌发生的影响。并对结直肠癌组患者中合并糖尿病对肿瘤生物学行为的影响进行分析。结果结直肠癌组和对照组的糖尿病并发率分别为12．1％（59／486）和7．1％（38／533）,差异有统计学意义（P〈0．01）;进一步经多因素分析结果显示．糖尿病是结直肠癌发生的独立危险因素（OR=1．886,95％CI：1．450．3．571）。糖尿病病程5。20年者结直肠癌发生危险性显著升高（P〈0．05）．而病程5年以内或超过20年者,其结直肠癌发生风险未见增高（P〉0．05）。结直肠癌患者是否并发糖尿病对肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及脉管栓塞均无明显影响（P〉0．05）。结论糖尿病患者罹患结直肠癌的风险增高．但并发糖尿病并不会改变结直肠癌的肿瘤生物学行为。     

静脉穿刺后两种拔针法临床对比观察

目的 观察病人对两种不同拔针法的疼痛反应及针眼出血和皮下瘀血情况。方法 对100例住院输液病人进行同体双侧手背同部位静脉穿刺后拔针对比观察,专人操作。左侧采用旧拔针法(对照组,用无菌干棉签按压穿刺点上方,迅速拔出针头);右侧采用新拔针法(观察组,迅速拔出针头,用无菌干棉签按压穿刺点上方)。结果 对照组疼痛反应发生率明显高于观察组(P<0.01);两组均能达到止血效果。结论 新拔针法能显著减轻病人的疼痛。