湿性皮肤再生技术在皮肤擦伤的应用

目的:探导湿性皮肤再生技术治疗皮肤擦伤的疗效。方法:自2000年1月-2005年10月,治疗头面部、躯干和四肢急性皮肤擦伤共353例,其中采用湿润烧伤膏和暴露疗法治疗(新法组)185例,按传统疗法清创治疗(传统组)168例。结果:新法组7天内痊愈116例,占62．7％;14天内痊愈59例,占3713％;总有效率100％。传统组7天内痊愈82例,占48．8％;14天内痊愈58例,占34．5％;另外28例,占16．7％,发生不同程度的创面感染,痂下积脓,需作再次清创,碘伏湿敷或改用MEBO治疗,创面延期愈合,愈后瘢痕增生明显。结论:湿润烧伤膏和暴露疗法治疗皮肤擦伤与传统疗法比较,具有缩短创面愈合时间,愈后不留瘢痕等优点。     

局灶性脑缺血对细胞周期蛋白D1/CDK4基因表达的影响

目的观察脑缺血后细胞周期蛋白（cyclin）D1和它的酶CDK4基因表达，以及这种表达的改变是否影响神经细胞凋亡。方法成年雄性SD大鼠32只随机分为假手术组（n=4）和实验组（n=28），实验组再进一步分为7个亚组（再灌注2h，6h，12h，1d，3d，7d和14d，每组n=4）。应用线栓法建立SD大鼠大脑中动脉阻塞／再灌注模型．TUNEL法检测神经细胞凋亡。原位杂交检测cyclinD1和CDK4mRNA的表达。结果CyclinD1mRNA和CDK4mRNA的表达与凋亡细胞的区域基本相同。再灌注2h脑组织即开始出现神经细胞凋亡，并于1d分别在皮层区和纹状体区达高峰（分别为72．80±4．66和87．75±0．85）。神经细胞cyclinD1mRNA和CDK4mRNA的表达分别于再灌注2h和6h开始逐渐增强，并于12h和1d达高峰（皮质区分别为94．50±2．75和85．75±3．73，纹状体区分别为88．25±5．06和89．80±2．93）。结论CyclinD1和CDK4选择性地在形态学完整或已经有改变的缺血侧神经元和少突胶质细胞内表达。CyclinD1／CD1（4mRNA表达可能是诱导细胞凋亡的重要因素之一。     

慢性胃炎脾气虚证与脾胃湿热证的差异表达基因比较

目的：比较慢性胃炎脾气虚证与脾胃湿热证患者差异表达基因。方法:分别提取慢性胃炎脾气虚和脾胃湿热患者胃黏膜组织RNA各4例，逆转录荧光探针标记后杂交制作BiostarH-140 s基因芯片。采用荧光值ratio、生物信息学、t检验等方法分析结果，实时荧光定量PCR检测部分相关基因。结果:获得差异表达基因245条，主要为营养物质消化吸收运输、物质能量合成代谢、细胞周期增殖分化、免疫反应等相关基因；有显著意义的差异表达基因77条；实时定量PCR检测10条基因，6条与芯片结果一致。结论:慢性胃炎脾气虚和脾胃湿热2个证型基因表达存在明显差异，提示中医的临床辨证分型与基因差异表达有一定关系。     

泌尿生殖道支原体液体显色培养法与固体培养法的比较

目的以固体培养法为标准，探讨液体显色培养法培养支原体的敏感性、特异性和一致性。方法采用培养鉴定药敏一体化液体显色培养基和固体A7琼脂培养基平行检测155例泌尿生殖道标本的支原体。结果液体显色培养法培养的敏感性为96．5％，特异性为79．7％，一致性Kappa=0．7737，U=11．4767，P〈0．001，两种方法具有好的一致性。男性标本与女性标本比较，敏感性差异无统计学意义（Х^2=0．1298，P〉0．05），特异性差异有统计学意义（Х^2=5．4197，P〈0．025）。结论液体显色培养法可用于支原体培养初筛，结合固体培养法可以提高支原体培养的准确性。     

膜结合配体依赖的TRAIL抗肿瘤细胞旁观者效应

目的：研究TRAIL基因抗肿瘤作用旁观者效应的发生机制。方法：腺病毒Ad/Lac-Z转染肿瘤细胞后作为标记的旁观者细胞，腺病毒Ad/g-TRAIL 转染肿瘤细胞作为效应细胞，在6孔Transwell培养板上同一孔内应用隔离或混合培养旁观者细胞和效应细胞的方法，通过检测旁观者细胞Lac-Z酶的活性，以明确TRAIL基因旁观者效应的发生机制。结果：检测了不同来源的肿瘤细胞株，包括大肠癌细胞株DLD1和Lovo、肺癌细胞株A549、肝癌细胞株HepG2、乳腺癌细胞株MDA-MB231、卵巢癌细胞株DOV13。各株肿瘤细胞转染Ad/g-TRAIL后ELISA方法均未检测出培养液中出现可溶性TRAIL（s-TRAIL）；隔离培养效应细胞与旁观者细胞，旁观者细胞的Lac-Z活性与PBS及腺病毒Ad/CMV-GFP对照组无明显差异，而混合培养组其活性明显低于对照组（P<0.05）；混合培养效应细胞与旁观者细胞（1∶1），发现高密度细胞生长组其旁观者效应明显大于低密度生长组（P<0.05 ）；FACS检测Sub G0/G1 发现DOV13细胞在高密度生长组显著高于低密度生长组（P<0.05）；荧光及相差显微镜下观察发现TRAIL转染细胞可诱导周围旁观者细胞发生凋亡而自己并不首先发生凋亡。结论：腺病毒介导的TRAIL基因的旁观者效应是通过TRIAL蛋白表达并定位于细胞膜上，通过细胞接触结合于邻近肿瘤细胞膜上的TRAIL受体而诱导旁观者肿瘤细胞的凋亡，而不是通过水解膜配体形成s-TRAIL而发生旁观者效应，这种作用是细胞接触依赖的。     

腹腔镜针对复杂性胆囊及胆总管结石术中的临床决策及处理技巧

目的 探讨腹腔镜术中处理复杂性胆囊结石及胆总管结石的不同方式对手术的影响。方法回顾性分析青岛市市立医院收治的复杂性胆囊及胆总管结石患者136例,总结并归纳术中情况及相对应处理技巧及经验。结果 本研究中腹腔粘连病例占全组120例（88.2%）,其中炎症粘连73例,手术后粘连47例,术中遵循“宁伤胆囊、远离肝门”的处理原则及相应的处理技巧,98例（81.7%）腹腔粘连患者按照原定手术方式顺利完成,但22例（18.3%）腹腔粘连患者因术中胆总管或胆囊颈管辨别不清、术中发现胆囊癌变等原因施行中转开腹手术。结石嵌顿病例占全组16例（11.8%）,包括胆囊颈管及胆总管结石嵌顿,术中应用推挤法、直接取石法、液电碎石等技巧联合应用胆道镜、碎石仪及扩张球囊等设备,手术均在腹腔镜下完成。结论 腹腔粘连和结石嵌顿是腹腔镜下复杂性胆囊结石及胆总管结石手术中较常见的困难,相应的术中决策和处理技巧能够为提高患者安全、降低手术风险、减少术后并发症等提供更多的方法与思路。     

Nucleostemin特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖能力的影响

目的：检测肿瘤细胞Nucleostemin（NS）的表达，研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响。方法：提取6种肿瘤细胞总RNA，用 RT-PCR和Northern blot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞，观察转染的HeLa细胞（简称NS-siRNA-HeLa细胞）体内外增殖的变化。结果：6种肿瘤细胞中NS明显高表达。体外培养的NS-siRNA-HeLa细胞中NS表达显著低于对照组，G0/G1期细胞百分率显著升高。体内致瘤实验显示，NS-siRNA-HeLa细胞在裸鼠体内增殖显著低于对照组。结论： NS在肿瘤细胞中高表达具有普遍性。NS特异性RNA干扰使HeLa细胞进入S期受阻，并可明显降低HeLa细胞体内外的增殖能力。     

Human Sperm Immotility Caused by Degeneration in the Epididymis

The maturation of human sperm normally takes place in the epididymis[1 ] .During epididymal maturation,sperm undergo physiological and biochemicalmodifications. One of the most prominent changes in sperm is the development ofsperm' s ability to move. Fully mature sperm demonstrate active,progressivemovement.However,some infertile patients presented very low sperm motility andeven totally immotile sperm in their ejaculates[2～ 4] .Unfortunately,in some suchcases,the mechanisms of sperm immotil…     

肺癌MDR1基因表达与临床病理特征的关系

目的 探讨ＭＤＲ１基因表达与肺癌病理特征的关系。方法 应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术对原发性肺癌,癌旁组织及淋巴结中ＭＤＲ１基因的表达进行检测分析。结果 肺癌组织及癌旁组织中ＭＤＲ１阳性率分别为５４％和１０％,两者比较差异显著（Ｐ〈０．００１）;转移淋巴结组织ＭＤＲ１阳性率为５３％,而非转移淋巴结组织未见ＭＤＲ１阳性表达;各病理类型中不同分化程度肿瘤的ＭＤＲ１阳性分布不同,高分化腺癌     

抗纤软肝冲剂对肝星状细胞胶原降解相关基因表达的影响

目的 从细胞分子水平研究抗纤软肝冲剂对肝星状细胞(HSC)胶原降解的影响。方法 抗纤软肝冲剂药物血清温育传一代HSC，以生理盐水和秋水仙碱为对照。ELISA法测定细胞上清I型胶原，并测定细胞层总蛋白以校正胶原含量；半定量RT—PCR法检测间质胶原酶(MMN)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1）的mRNA表达。结果 抗纤软肝冲剂组细胞上清中的I型胶原含量明显低于其他两组(P＜0．05或P＜0．01)；明显促进细胞MMN的mRNA表达(P＜0．05或P＜0.01)，显著抑制细胞TIMP-1的mRNA表达(P＜0．05或P＜0．01)。结论 抗纤软肝冲剂能促进MMN基因表达，抑制TIMP-1基因表达，从而促进胶原降解，这可能是该方抗肝纤维化的细胞分子学机制之一。