凉血散血法治疗缺血性中风的机理探讨

从分析缺血性中风的病因病机入手,揭示在肝肾阴虚基础上形成的瘀热互结为缺血性中风的重要病机之一,并且对瘀热互结的临床证候特点进行了总结,认为在此基础上进行凉血散血治疗可以取得较好疗效。     

CYP2B6基因表达质粒的构建及在大肠杆菌中的表达

目的:构建CYP2 B6基因原核表达质粒,在大肠杆菌[Rosetta2(DE3)pLysS]中高效表达重组蛋白。方法:以质粒为模板,用PCR技术扩增出CYP2 B6基因,并将其分别插入pET-22b( )、pET-28b( )和pET-32a( )质粒中,经PCR、测序鉴定后,转化Rosetta2(DE3)pLysS,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:经PCR、测序鉴定,构建了CYP2 B6基因表达质粒;采用考马斯亮蓝染色法检测重组蛋白表达,pET-22b( )-CYP2 B6未见目的蛋白表达;pET-28b( )-CYP2 B6有目的蛋白表达,约占蛋白总量的5%;而pET-32a( )-CYP2 B6可以高效地表达CYP2 B6,在低浓度(50μmol/L)IPTG诱导3 h后,所表达的CYP2 B6蛋白约占细菌总蛋白的30%;质谱分析结果进一步证实所表达的蛋白为CYP2 B6。结论:成功地使CYP2 B6基因在原核系统中高效表达。     

布比卡因轻、重比重液腰麻效果比较

目的：探讨并比较轻、重比重液腰麻在下腹、下肢手术临床应用中的麻醉效果及并发症。方法：选择期下腹、下肢手术100例。随机分为两组,每组50例,行轻比重液腰麻（0．25％布比卡因6ml）。组2行重比重液腰麻（0．75％布比卡因2ml＋10％GS1ml）。观察麻醉全过程进行比较。结果：轻比重腰麻与重比重腰麻比较,麻醉起效时间晚,麻醉阻滞完全时间长,麻醉持续时间短,阻滞平面范围小,血压变化小（P〈0．05）,两组肌松效果,术后并发症无明显区别（P〉0．05）。结论：布比卡因重比重液腰麻起效快。阻滞时间长,但布比卡因轻比重液腰麻阻滞平面易于控制,持续时间较短,循环影响小,与重比重液腰麻有相当的阻滞效果,可用于麻醉后不需要改变体位的下肢手术。     

半椎板切开治疗椎管内肿瘤

目的探讨半椎板切开入路切除椎管内肿瘤的优缺点,方法回顾性分析2004~2006年经手术切除病理证实的椎管内肿瘤196例的临床资料。其中80例行了半推板入路肿瘤切除,与同期的116例全椎板切除患者进行比较。结果半椎板切除患者手术住院时间明显缩短,术后起床反应轻微,远期效果较全椎板好,对脊柱的稳定性影响小。结论单侧半椎板入路切除椎管内肿瘤损伤小,最有利于脊柱稳定性的维持。患者手术后住院时间短,反应轻微,远期疗效好。但也有暴露局限的缺点。     

解脲脲原体、抗心磷脂抗体与反复早期自然流产相互间关系的研究

目的:探讨反复早期自然流产(ERSA)与抗心磷脂抗体(ACA)、解脲脲原体(Uu)感染之间的关系,并进一步研究解脲脲原体感染与抗心磷脂抗体产生间的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测74例反复早期自然流产患者(ERSA组)静脉血中ACAIgM、IgG;荧光定量PCR法检测其宫颈分泌物中解脲脲原体;同样对60例自愿人工流产(AA组)和53例孕前咨询查体者(PE组)进行相应检测。结果:74例反复早期自然流产的ACAIgM、IgG,Uu阳性率分别为17.75%、22.97%、31.08%,明显高于人工流产组对应的5.00%、6.67%、11.67%(P<0.05)和查体组的1.89%、3.77%、3.77%(P<0.01)。ERSA中解脲脲原体阳性组ACAIgM、IgG阳性率分别为34.78%、43.48%,显著高于阴性组的9.80%、13.73%(P<0.01)。ERSA组中解脲脲原体定量≥1.0×104cp/μl组的A-CAIgM、IgG阳性率46.67%、46.67%与<1.0×104cp/μl组对应的12.50%、37.50%比较无显著性差异(P>0.05)。结论:反复早期自然流产与抗心磷脂抗体、解脲脲原体感染密切相关,且抗心磷脂抗体的产生与解脲脲原体感染具有相关性。     

核酶对肝癌SMMC-7721细胞端粒酶活性及凋亡的影响

目的:观察针对人端粒酶RNA模板区的核酶对肝癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法:利用脂质体Lipofectamine介导,将已构建好的带有端粒酶核酶基因的重组质粒pBBS212Rz及空载质粒pBBS212转染肝癌SMMC-7721细胞,采用TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,用倒置相差显微镜及流式细胞仪观察细胞生长和凋亡情况。结果:重组质粒pBBS212Rz转染的肝癌SMMC-7721细胞的端粒酶活性明显下降,细胞生长速度明显变慢,凋亡加速。结论:端粒酶核酶对肝癌细胞端粒酶活性和细胞生长有抑制作用,可望成为肝癌基因治疗的方法。     

滴通鼻炎水对黏膜纤毛的毒性评价

目的 研究滴通鼻炎水对蛙口腔黏膜纤毛运动的影响.方法 采用蛙黏膜纤毛运动实验,用肉眼观察给药后小木屑在蛙上颚黏膜表面移动一定距离所需要的时间;用显微镜观察生理盐水组和滴通鼻炎水组对离体蛙口腔上颚黏膜纤毛持续摆动时间的影响;蛙口腔上颚黏膜用生理盐水或滴通鼻炎水浸润30 min后,分离蛙口腔上颚黏膜,用显微镜观察其纤毛持续摆动时间.结果 ①在整体动物实验中,滴通鼻炎水常用浓度、高浓度组给药前后对蛙黏膜纤毛运动均无明显影响(P＞0.05);②在离体实验中,滴通鼻炎水常用浓度、高浓度组对蛙黏膜纤毛运动亦无明显影响(P＞0.05);③在半在体法实验中,滴通鼻炎水对蛙纤毛运动持续时间有明显缩短作用(P＜0.05),但作用强度显著弱于阳性对照药去氧胆酸钠.结论 滴通鼻炎水在整体实验和离体实验中对蛙黏膜纤毛的功能无明显影响,但滴通鼻炎水浸润30 min后对黏膜纤毛运动有抑制作用.     

亚洲带绦虫成虫延伸因子-1基因的克隆和分析

目的分析和预测亚洲带绦虫成虫延伸因子-1（elongation factor 1,EF-1）基因及其编码的蛋白的结构和功能。方法利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心（NCBI,http：∥www.ncbi.nlm.nih.gov/）和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统（ExPASY,http：∥ca.expasy.org/）中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其它生物信息学分析软件包,从亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别延伸因子-1的全长编码基因并预测其蛋白的结构和功能。结果该基因是全长基因,长度988bp,编码区为67～868,编码269个氨基酸,无跨膜区;与GenBank中细粒棘球绦虫同源基因的一致性达87%,相似性达91%;预测三个主要的抗原表位位于135～140,126～131,157～162。结论应用生物信息方法从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出EF-1基因。     

原位杂交法检测肝组织中输血传播病毒

采用对称和不对称PCR法 ,以地高辛素标记双链和单链探针 ,用原位杂交法检测了 56例肝组织中输血传播病毒 (TTV)核酸 ,以探讨TTV的致病性。发现 51例非甲～非庚型肝炎肝组织中TTV总检出率为 2 7.5% ( 1 4 /51 ) ;5例非肝炎肝组织杂交阴性。TTVDNA主要定位于肝细胞核内 ,受染肝细胞见于急性、慢性和重症肝炎的肝组织。双链探针杂交结果与单链探针检测病毒基因链的结果一致 ,2例 ( 2 /6)例组织TTV基因链与互补链同时存在。提示TTV是导致肝炎的一种新病原 ,并且在肝脏内有复制     

小檗碱的体外降糖作用

目的 研究小檗碱能否通过刺激胰岛素分泌或直接作用于肝细胞而产生降糖作用。方法 检测HepG2细胞24h培养液中葡萄糖的消耗量。另外检测βTC3细胞胰岛素的释放量。结果 小檗碱5－100μmol/L可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加32％－60％（P＜0．01）,与1mmol/L二甲双胍相比无显著差异;小檗碱的降糖效能随着培养液中葡萄糖浓度的升高而降低;胰岛素对小檗碱的降糖作用没有明显的影响。小檗碱没有刺激βTC3细胞胰岛素分泌的作用。结论 小檗碱能通过肝细胞发挥非胰岛素依赖的降糖作用,但不能增加胰岛素的分泌。