MMP-1、13 mRNA和DDR2表达与关节软骨退变的关系

目的探讨关节软骨基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMPs）-1、13mRNA及盘状结构域受体（discoidin domain receptor,DDR2）三者与关节软骨退变的关系。方法对58例关节软骨标本应用反转录-多聚酶链反应法（RT-PCR）测定MMP-1、13mRNA的表达,免疫组化法显色DDR2表达,进行图像分析研究。结果在轻度退变关节软骨中MMP-1、13呈低表达,在中重度退变软骨中MMP-1、13表达显著增高,在重度退变软骨中MMP-1,13有相对的下降,DDR2表达也呈现出与MMP-1、13相同的表达特点。结论MMP-1、13的过表达导致软骨Ⅱ型胶原的降解是软骨退变的重要原因,Ⅱ型胶原降解片段诱导DDR2表达增高进一步介导MMP-1、13的表达形成一个放大效应而加速了关节软骨退变。     

视黄酸影响斑马鱼胚胎心脏房室分化

目的观察外源性视黄酸对斑马鱼心脏前后轴发育即心脏房室分化的影响。方法采用化学遗传学方法在斑马鱼胚胎发育至12.5hpf(hours post fertilization)给予5×10-8mol/L和10-7mol/L外源性视黄酸处理1.5h。应用胚胎整体原位杂交观察视黄酸对心脏特异基因vmhc,amhc,nkx2.5和nppa表达的影响。结果vmhc,amhc探针的整体原位杂交结果显示视黄酸处理会导致斑马鱼胚胎心脏的前后轴发育异常,表现为vmhc表达细胞的范围缩小,amhc表达细胞的范围明显增大。视黄酸可以明显增强nppa在心脏的表达。视黄酸对心脏房室分化的影响在48hpf后表现得明显。结论5×10-8mol/L和10-7mol/L视黄酸在12.5hpf处理斑马鱼胚胎对斑马鱼心脏早期发生没有影响。斑马鱼发育过程中,视黄酸对心脏的房室分化过程起着重要的调控作用,视黄酸支持心房的分化和发育,同时抑制心室发育。     

RNA干扰技术抑制类风湿关节炎成纤维细胞COX-2合成

目的 体外合成针对人环氧化酶-2（hCOX-2）的小分子干扰RNA（siRNA）,并转染人人滑膜成纤维细胞,通过比较不同siRNA抑制COX-2 mRNA表达、COX-2蛋白合成以及下游产物PGE2水平,旨在确定特异性阻断人滑膜成纤维细胞COX-2的siRNA.方法 分离、培养和传代人类风湿关节炎（类风关）滑膜成纤维细胞.设计合成4条针对hCOX-2 mRNA siRNA（1#-4#siRNA）,1条随机序列siRNA.设立1#-4#siRNA和随机序列siRNA组（NC）及未转染对照组（CTL组）.应用Lipofect AMINE 2000将上述siRNA分别转染人滑膜成纤维细胞,4 h后各培养孔加入终浓度为100 nmol/L的佛波酯.转染36 h、48 h后,各组提取蛋白质和总RNA,应用RT-PCR检测hCOX-2 mRNA表达水平,通过Western Blot检测hCOX-2蛋白表达水平.采用ELISA方法检测各组上清液PGE2的水平.结果 转染36 h,PCR结果显示,CTL、NC、1#siRNA、2#RNA、3#RNA、4#siRNA、阳性对照HeLa细胞组hCOX-2 mRNA电泳条带密度值分别为1、0.72、0.3、0.25、0.4、0.04、2.1.Western Blot结果提示上述各组hCOX-2蛋白密度值分别为1、1.04、0.52、0.39、0.9、0和2.48.转染48 h后,各组hCOX-2蛋白条带密度值分别为0.05、0.52、0.51、0.9和0.15.转染24 h、48 h和72 h后,4#siRNA组培养上清液PGE2的水平较其他各组低.结论 4#siRNA能有效抑制人滑膜成纤维细胞COX-2 mRNA表达和COX-2蛋白的合成,且上清液中PGE2水平最低,证实4#siRNA能特异性阻断COX-2在滑膜成纤维细胞表达.     

施多宁、佳息患联合治疗与国产药去羟肌苷散、司他夫定和奈韦拉平三联治疗艾滋病的疗效比较

目的比较施多宁、佳息患联合治疗与国产药物去羟肌苷散、司他夫定和奈韦拉平三药联合治疗人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者1年时的疗效及不良反应。方法HIV感染者分为2组,一组26例,给予施多宁、佳息患联合治疗;另一组（对照组）38例,给予国产药物去羟肌苷散、司他夫定和奈韦拉平3药联合治疗,均随访1年,监测患者的血浆病毒载量及CD4^＋T淋巴细胞计数,并评价药物不良反应。结果经过1年治疗两组患者血浆中HIV RNA含量均明显降低,CD4^＋T淋巴细胞数量增加,药物不良反应轻微。结论施多宁、佳息患联合治疗组和国产药物三联治疗组在一年的观察中均能有效抑制HIV病毒的复制,机体免疫功能也有所改善。两组疗效和不良反应的差别无显著性意义。     

骨髓间充质干细胞透明质酸钠溶液修复大鼠早期退变椎间盘的作用

目的研究无外源性生长因子及细胞支架的作用下,应用体外培养传代的骨髓间充质干细胞（bonemesenchymal stem cells,BMSCs）与透明质酸钠混合溶液修复大鼠早期退变椎间盘的作用。方法取同种基因大鼠的BMSCs,通过贴壁法培养传代,与医用透明质酸钠混合配制。10只SD大鼠,尾椎上取相邻3个椎间盘,由近端至远端设为细胞植入组、椎间盘退变组、正常对照组。分别于细胞植入组、椎间盘退变组建立退变模型。1周后,细胞植入组注射BMSCs与透明质酸钠溶液。3周后,X线片比较椎间盘高度指数（discheightin-dex,DHI）,组织病理学方法行病理观测并评分,RT-PCR测定Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的mRNA表达。结果细胞植入组的DHI值与椎间盘退变组相比无明显改善且远低于对照组。病理切片结果提示植入组髓核纤维环的形态得到保留,髓核纤维环边界清晰,细胞产生增殖分裂,其病理学评分明显高于椎间盘退变组。RT-PCR结果提示细胞植入组Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的mRNA表达水平较椎间盘退变组明显提高。结论在椎间盘退变早期植入BMSCs与透明质酸溶液可以延缓椎间盘的退变,而不需要外源性细胞因子和三维支架的作用。     

80例成人肝移植的供肝动脉变异、损伤与植入前重建

目的研究供肝肝动脉变异、取修肝损伤与植入前重建的相互关系,对动脉并发症的影响。方法回顾分析2004年3月至2006年7月单个医疗组完成的80例成人肝移植资料。植入前供肝动脉重建方法:整形获得变异或受损动脉的根部袖片或斜面端口,与合适部位吻合成具有共同主干的动脉树,尽可能单次吻合。3mm以下吻合口采用8/0prolene线间断缝合,3mm及以上吻合口采用7/0prolene线四点连续锁边缝合。术后以彩色多普勒超声、CT或MRI动脉造影监测动脉血流情况,随访6～34个月。结果供肝动脉变异发生率25.0%(20/80),变异肝左动脉6.25%,变异肝右动脉12.50%,二者并存3.75%,变异肝总动脉2.50%。全组取修肝动脉损伤发生率7.5%(6/80),变异组与无变异组损伤发生率(25.0%vs1.7%)有统计学差异(P<0.01)。损伤部位以变异肝右动脉损伤最为常见,占42.9%(3/7),占变异组损伤部位的50.0%。损伤时间在取肝、修肝期各占一半(3/6),变异组损伤的60.0%(3/5)发生在修肝期,无变异组未发生修肝损伤。取肝期动脉损伤率,在变异组与无变异组间(10.0%vs1.7%)存在统计学差异(P<0.05)。全组植入前动脉重建率13.8%(11/80),变异组为55.0%(11/20),76.9%的变异肝右动脉接受了植入前重建,均来自肠系膜上动脉。无变异组未行重建。动脉重建组中,63.6%(7/11)的变异/损伤动脉与脾动脉吻合。随访期内,全组无肝动脉血栓形成,肝动脉狭窄发生率3.8%(3/80)。变异组与非变异组肝动脉狭窄发生率(5.0%vs3.3%)比较,植入前重建组与非重建组(9.1%vs2.9%)比较,均无统计学意义(P>0.05)。全组假性动脉瘤发生率1.25%,吻合口出血发生率1.25%,均在无变异组。结论肝右动脉变异是供肝动脉变异的最常见类型,常需要植入前整形重建。供肝动脉变异增加取肝、修肝过程的动脉损伤发生率,本组变异肝右动脉损伤最常见。供肝动脉变异、合适的植入前重建并不增加移植后肝动脉血栓形成、动脉狭窄的发生率。     

中医专业七年制学生临床科研能力培养的实践与思考

在中医专业七年制学生的临床教学中,坚持并深化教育教学改革,通过规范毕业论文管理、定期举办"研究生论坛"、设立"萌芽计划"科研基金、开设专题学术讲座、培养学生科技创新意识等措施,致力于培养学生的临床科研能力,取得了显著成效。     

肺癌高危人群癌症防治核心知识认知情况调查

目的 探讨肺癌高危人群对癌症防治核心知识认知情况并对其影响因素进行分析.方法 以2017年3月至2019年12月在上海市某医院胸外科完成肺癌高危人群筛查并判断为肺癌高危人群的居民为研究对象,开展癌症防治核心知识知晓情况调查,采用描述流行病学分析方法对癌症防治核心知识掌握情况进行分析,并采用单、多因素分析方法对知识掌握影...     

格列齐特缓释片对2型糖尿病患者血管功能的影响

目的观察格列齐特缓释片对2型糖尿病(T2DM)患者血管功能的影响。方法72例T2DM患者随机均分为对照组(口服格列齐特片,80 mg／次,每日2次)和试验组(口服格列齐特缓释片,60 mg／次,每日1次),疗程为12周。采用高分辨率超声测定肱动脉内皮依赖性血管舒张功能(FMD)和硝酸甘油介导的非内皮依赖性血管舒张功能(GNTMD)的变化,并测定血清一氧化氮(NO)及内皮素-1(ET-1)的水平。同时选择40名年龄和性别相匹配的健康志愿者(正常组)作为基线对照。结果与正常组比较,治疗前试验组和对照组的血清ET-1水平显著升高(P值均<0.01),血清NO水平及GNTMD、FMD值显著下降(P值均<0．01)。与治疗前比较,治疗12周后试验组和对照组血清ET-1水平显著降低(P值均<0．01),NO水平和GNTMD、FMD值显著上升(P值均<0．01)。试验组和对照组均能有效降低空腹和餐后2 h血糖及糖化血红蛋白水平,差异均有统计学意义(P值分别<0．05、0．01)。结论格列齐特缓释片和普通片可在有效降低T2DM患者血糖的同时,改善血管内皮功能。     

1992～2005年珠海口岸出入境人员HIV监测结果分析

目的 通过对珠海出入境人员艾滋病病毒感染者的流行病学调查,掌握口岸艾滋病流行现状及特点,为艾滋病防控提供依据.方法 对珠海口岸1992～2005年出入境人员艾滋病监测资料进行统计分析.结果 珠海口岸共对308 453名出入境人员艾滋病血清学检测,共检出HIV抗体阳性者44例,总检出率0.014%.其中2005年检出率最高,为0.052%.在HIV感染者中,青壮年感染数较多,占93.18%,劳务人员占43.18%,外籍人员占40.91%;中国籍(包括澳门)占59.09%.结论 在珠海口岸出入境人员HIV感染呈上升趋势下,有必要加大珠海口岸HIV监测与防控力度.