SARS冠状病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的:SARS 冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳蛋白 N(nucleocapsid protein)单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)的制备及鉴定。方法:用基因重组的 SARS-CoV N 蛋白免疫 BALB/c 小鼠制备 McAb,并采用间接 ELISA、免疫印迹法进行筛选和鉴定。结果:筛选出2株抗 SARS-CoV N 蛋白 McAb 杂交瘤细胞株,间接 ELISA 证实这组单克隆抗体仅与 SARS-CoV 产生特异性反应,而与其他病原体无交叉反应,IgG 亚类鉴定1株为 IgG1,另1株为 IgG2b。2株抗体亲和常数分别为4.14×10~(-9)和3.19×10~(-9)。结论:获得特异性针对 SARS-CoV 的单克隆抗体,为 SARS-CoV 早期诊断试剂的研制奠定了基础。     

数种因子对人胎肺细胞分泌t─PA的影响

原代人胎肺细胞培养２０ｄ后，更换１％ＢＳ培养基，细胞生长停止，ｔ－ＰＡ分泌量低；在１％ＢＳ培养基中使Ｃａ２＋浓度增加到３．５ｍｍｏｌ／Ｌ，ＬＨ浓度增加到１％，细胞表现较高ｔ－ＰＡ分泌活性，与１％ＢＳ组差异显著。以此配方为基础培养基，再分别补充以下因子：５μｇ／ｍｌ转铁蛋白，５ｍｇ／ｍｌ白蛋白，２．５ｍｇ／ｍｌ葡萄糖，１ｍｇ／ｍｌ甘露糖，１μｇ／ｍｌ氢化可的松，２Ｕ／ｍｌ胰岛素，２ｍｍｏｌ／Ｌ谷氨酰胺，２０ｎｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠。除谷氨酰胺和甘露糖外，其他因子均显著提高肺细胞的ｔ－ＰＡ分泌活性（Ｐ＜０．０５）     

Avermectins菌丝提取液的分析与主要成分的分离富集

采用高效液相色谱（HPLC）-紫外检测（UVD）／蒸发光散射检测（ELSD）的方法分析avermectins菌丝提取液，发现主要成分为具有紫外吸收和无紫外吸收的物质。利用硅胶吸附柱层析方法分离富集了其中的主要成分。对几种有紫外吸收的组分（A1a、A2a、B1a、B2a）进行了核磁共振（NMR）分析，根据异核单量子相干谱（HSQC）对所有的^13C—NMR和^1H—NMR谱带进行了归属。鉴定了无紫外吸收的物质中含有糖类物质。     

重组人粒细胞刺激因子致急性嗜酸性粒细胞肺炎的病例分析

目的 探讨临床药师在识别药物不良反应（ADR）中的作用,提醒临床注意重组人粒细胞刺激因子引起药物性肺损伤的可能,并与感染性疾病相鉴别。方法 对1例粒细胞降低患者因使用重组人粒细胞刺激因子出现急性肺损伤的病例进行分析,评估重组人粒细胞刺激因子与急性嗜酸性粒细胞肺炎的关联并分析可能的机制。同时,临床药师对患者病情进行评估和判断,提出相应的治疗建议。结果 患者使用重组人粒细胞刺激因子后嗜酸性粒细胞增高,双肺炎症加重,抗感染治疗效果不佳,考虑为重组人粒细胞刺激因子相关嗜酸性粒细胞肺炎,及时停用抗感染及抗病毒药物,并予糖皮质激素治疗后,患者肺部症状好转,嗜酸性粒细胞恢复正常。结论 重组人粒细胞刺激因子可引起罕见嗜酸性粒细胞肺炎,临床药师参与临床治疗有助于提高对药源性疾病的识别和管理,从而调整治疗方向,保证临床治疗成功。     

地佐辛与酮咯酸氨丁三醇在颈髓过伸伤的镇痛效果比较

目的 回顾性分析比较地佐辛与酮咯酸氨丁三醇在颈髓过伸伤中不同疼痛程度的患者的镇痛效果,指导合理选择镇痛药物. 方法 回顾性分析2012年12月至2015年12月解放军第98医院80例颈髓过伸伤出现痛觉过敏患者的病历资料,以长海痛尺评分评定患者疼痛程度,长海痛尺评分≥3分为用药指征,随机分为观察组和对照组,观察组给于地佐辛7.5mg肌注,对照组给于酮咯酸氨丁三醇60mg肌注,比较2组对于不同疼痛程度患者用药后疼痛评分情况,3分以下为有效,≥3分为无效镇痛,并观察2组用药后发生的不良反应情况. 结果 从镇痛有效率比较,2组用药30min后,中重度疼痛,观察组有效率100.0%,对照组有效率94.7%,差异无统计学意义(P>0.05),均为有效镇痛.剧烈以上疼痛,观察组镇痛有效率95.0%,对照组有效率仅为42.9%,差异有统计学意义(P<0.01),地佐辛镇痛效果优于酮咯酸氨丁三醇.从镇痛前后疼痛评分比较,2组在中重度疼痛镇痛后评分差异无统计学意义(P>0.05);观察组与对照组剧烈以上疼痛镇痛后评分分别为(1.32±0.99)、(3.40±2.20),差异有统计学意义(P<0.05).观察组药品不良反应发生率(20.0%)高于对照组(7.5%),差异有统计学意义(P<0.05). 结论 在颈髓过伸伤的镇痛治疗中,中重度疼痛可选择地佐辛或酮咯酸氨丁三醇,剧烈以上疼痛地佐辛镇痛效果明显优于酮咯酸氨丁三醇,但地佐辛不良反应率较高,因此临床用药上建议根据疼痛评分来合理选择镇痛药.     

六味热可解颗粒挥发油β-环糊精包合工艺研究

目的研究六味热可解颗粒中挥发油β-环糊精包合的最佳工艺。方法以包合物收得率和挥发油包合率作为评价包合工艺的指标,采用正交试验优选最佳包合工艺条件。结果最佳包合工艺条件为挥发油和β-环糊精包合比例1mL：6g,包合温度40℃,搅拌时间2h。结论正交试验优选的包合工艺合理,包合率高,工艺稳定。     

Stilbene C-glucosides from Cissus repens

Four new stilbene C-glucosides, namely trans-3-O-methyl-resveratrol-2-C-β-glucoside (1), cis-3-O-methyl-resveratrol-2-C-β-glucoside (2), trans-3-O-methyl-resveratrol-2-(2-p-coumaric)-C-β-glucoside (cissuside A) (3), and trans-3-O-methyl-resveratrol-2-(3-p-coumaric)-C-β-glucoside (cissuside B) (4), were isolated from the aerial parts of Cissus repens, along with known trans-resveratrol (5), trans-resveratrol-2-C-β-glucoside (6) and cis-resveratrol-2-C-β-glucoside (7). Their structures were established by spectroscopic methods. Stilbene C-glucosides were found in the genus Cissus for the first time.     

Active site of trichosanthin acting as a ribosome-inactivating protein

天花粉蛋白核糖体灭活活性部位的定位方法：羟胺特异裂解天花粉蛋白唯一ＡｓｎＧｌｙ肽键．制备性凝胶电泳获ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２二片段．免疫印迹确定天花粉蛋白上不同表位并筛选抗体．兔网织红无细胞系统测定天花粉蛋白及片段对蛋白合成的抑制活性．结果：ＨＡＴｆ１和ＨＡＴｆ２纯度各达９６６％和８０５％．ＨＡＴｆ１保留完整天花粉蛋白的抑制活性．第１４号和第１６号抗天花粉蛋白单抗与二片段显示不同免疫反应性，并用于封闭试验．第１４号单抗能封闭天花粉蛋白及ＨＡＴｆ１活性，而第１６号单抗则否．结论：天花粉蛋白抑制蛋白质生物合成的活性部位位于ＨＡＴｆ１侧，近二部分交界．     

Effects of malachite green on the mRNA expression of detoxification‐related genes in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) and other major Chinese freshwater fishes

The use of malachite green (MG) in fish farming is prohibited in China due to its potentially toxicological and carcinogenic nature, but it is still illegally used in some places. The aim of this study was to investigate the time and concentration‐dependent responses of xenobiotic metabolizing and detoxification‐related genes in diverse fishes exposed to MG both in vivo and in vitro. Experimental fish were administered to two exposure groups of malachite green (MG) (0.10 and 0.50 mg L^?1) for 8 h. The hepatocytes isolated from Nile tilapia were incubated with MG (0.5, 1.0, and 2.0 mg L^?1) for 8 and 24 h, respectively. In vivo, exposure to 0.10 and 0.50 mg L^?1 MG for 8 h caused significant changes of the detoxification‐related genes on the mRNA expression levels. Low‐concentration (0.10 mg L^?1) level of MG induced significant increase on the mRNA expression level of GSTR gene in Nile tilapia and other fishes. The mRNA expression of grass carp UCP2 was significantly induced when exposed to 0.5 mg L^?1 MG. However, the mRNA expression levels of GSTA, CYP1A, and GPX were inhibited significantly by 0.5 mg L^?1 MG in Nile tilapia, grass carp, and Taiwan snakehead. In vitro, the significant increase of mRNA expression of these genes was detected after exposure to 0.5 mg L^?1 MG (UCP2), and 1.0 mg L^?1 MG (CYP1A1, GSTA, GSTR, and UCP2). The induction of hepatic CYP1A1, GSTA, GSTR, and UCP2 in response to MG suggested a potential role of fish CYP1A1, GSTA, GSTR, and UCP2 in MG metabolism. © 2011 Wiley Periodicals, Inc. Environ Toxicol, 2013.