胶质细胞源性神经营养因子在小鼠生精恢复过程中的表达和意义

目的:分析并探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在小鼠恢复生精过程中的表达变化,及其与精原干细胞增殖与分化的关系。方法:间隔24 d 2次腹腔注射白消安建立小鼠生精恢复过程的动物模型。根据第二次给药后的不同时间随机分为1、2、3、4、6、8、10周共7组(8只/组),8只正常小鼠作对照组,分别于相应时点取材,进行光镜和电镜的研究。采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时间GDNF mRNA的表达变化;并采用原位杂交技术检测GDNFmRNA表达定位。结果:2次给药后第1-2周,GDNF mRNA的表达明显增强,在第2周达到高峰;在给药后第3-4周明显下降,并在第4周达到低谷;随后几周内表达又逐渐增强,于第10周恢复到正常水平。原位杂交显示,GDNF由sertoli细胞表达。结论:在小鼠生精恢复过程中,GDNF的高水平表达促进精原干细胞自我更新,对于维持生精上皮干细胞数量的稳定具有十分重要的意义。     

窒息新生儿脐血神经肽Y含量变化及意义

目的　探讨神经肽Y(neuropeptideY ,NPY)与新生儿窒息的关系。　 方法　采用放射免疫法测定 37例有新生儿窒息孕妇 (窒息组 )及 33例正常妊娠妇女 (对照组 )静脉血及脐血中NPY含量。　结果　 (1)窒息组脐血中NPY含量为 (187.4 7± 4 6 .6 3)ng/L ,对照组为 (115 .33±2 9.4 2 )ng/L。两组比较差异有显著性 (t =3.113,P <0 .0 1) ,重度窒息组与轻度窒息组间差异也有显著性(t=2 .0 0 1,P <0 .0 5 )。 (2 )窒息组母血浆NPY含量为 (78.94± 19.5 2 )ng/L ,对照组为 (85 .73±2 2 .95 )ng/L ,两组间差异无显著性 (t =1.72 1,P >0 .0 5 ) ,且轻、重度窒息组间差异也无显著性 (t =1.5 12 ,P >0 .0 5 )。(3)窒息组脐动脉血血气分析 :pH为 (7.0± 0 .1) ,PO2 为 (1.2± 0 .3)kPa ,PCO2为 (8.9± 0 .8)kPa ;NPY水平与脐血pH及PO2 显著负相关 (r =- 0 .4 5 1及 - 0 .4 92 ,P <0 .0 1) ,与PCO2 显著正相关 (r =0 .4 38,P <0 .0 1)。两组母血NPY水平无差异。　结论　NPY参与了新生儿窒息的病理变化过程 ,与新生儿窒息的发生发展密切相关。     

妊高征患者胎盘组织血管紧张素Ⅱ 1型受体和血管紧张素原的表达

目的　探讨血管紧张素Ⅱ 1型受体 (angiotensinⅡtype 1receptor ,AT1R)和血管紧张素原 (angiotensinogen ,AGT)在妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者胎盘组织中表达的变化及其在妊高征发病中的意义。　方法　采用免疫组织化学染色法 (免疫组化 )和逆转录聚合酶链反应法 (RT PCR) ,检测 2 0例中、重度妊高征患者 (妊高征组 )和 15例正常妊娠妇女 (正常组 )的胎盘组织AT1R水平及AT1RmRNA和AGTmRNA的表达。　结果　 ( 1)AT1R主要定位于胎盘绒毛滋养细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞。 ( 2 )免疫组化定量灰度分析 ,妊高征组胎盘组织AT1R阳性表达( 112 .4 3± 11.75 )显著强于正常组 ( 170 .4 7± 10 .5 9) (P <0 .0 1)。 ( 3)妊高征组胎盘组织AT1RmRNA的表达水平 ( 0 .96± 0 .2 0 )高于正常组 ( 0 .5 6± 0 .14 ) (P <0 .0 1)。妊高征组胎盘组织AGTmRNA的表达水平 ( 1.0 8± 0 .2 2 )亦显著高于正常组 ( 0 .6 0± 0 .12 ) (P <0 .0 1)。　结论　在妊高征患者胎盘组织中 ,AT1R和AGT表达均有明显增加 ,说明胎盘组织局部肾素 血管紧张素系统与妊高征发病有相关性     

胸腺肽α1单克隆抗体的制备及其鉴定

目的:研制胸腺肽α1(Tα1)单克隆抗体，为Tα1作用机制的阐明奠定基础。方法:用戊二醛将Tα1和牛血清白蛋白进行交联，以其交联物为抗原，按常规淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体，并采用间接酶联免疫吸附(ELISA)法和Western免疫印迹来鉴定单克隆抗体的特异性。结果:建立了分泌抗Tα1抗体的杂交瘤细胞株，能特异性地与Tα1结合，但与单纯牛血清白蛋白、酵母抽提物和转染Tα1酵母未诱导表达产物无反应。其抗体效价为1：10240，Ig亚类为IgG2b。结论：本研究建立了针对Tα1高效价、高特异性单克隆抗体细胞株。     

未破裂型输卵管妊娠腹腔镜手术和剖腹手术的临床研究

目的　比较腹腔镜和剖腹手术在保守性治疗未破裂型输卵管妊娠的效果。　方法　选取经临床或腹腔镜确诊的输卵管峡部、壶腹部或伞部妊娠的未破裂型住院病例 ,分成腹腔镜手术和剖腹手术 2组进行保守性手术治疗 ,2组各 112例 ,记录术前病史体征、术中和术后情况 ,并随访其术后 1年内的妊娠结局。　结果　腹腔镜组术中出血量 (30 .6± 13.8) m l、手术时间(4 1.3± 11.2 ) m in、排气时间 (11.5± 5 .3) h、抗生素应用时间 (2 .6± 2 .1) d、术后最高体温 (36 .8± 0 .4 )℃、术后住院时间 (4 .3± 1.2 ) d及术后 3个月后子宫输卵管造影 (hystero salpingo graphy,HSG)通畅率 83.9% (78/ 112 ) ,明显优于剖腹组 (P<0 .0 5 ) ;腹腔镜组和剖腹组术后血β- HCG恢复正常时间分别为 (9.6± 5 .1) d、(10 .2± 4 .9) d;术后发生持续性宫外孕率分别为 (6 .3% ,5 .4 % )、术后 1年内的宫内妊娠率分别为 (87.9%、 76 .5 % )及宫外孕发生率分别为 (12 .6 % ,2 3.5 % ) ,2组间差异无显著 (P>0 .0 5 )。　结论　腹腔镜保守治疗未破裂型输卵管妊娠具有手术时间短、出血少、术后恢复块、 HSG通畅率高     

Meynert基底核注射冈田酸致大白鼠空间记忆障碍

目的：研究蛋白磷酸酯酶2A (PP2A)下调能否引起大白鼠空间记忆障碍。方法：向大白鼠Meynert基底核注射冈田酸(OA) 0.4 μmol，检测PP2A、PP1的活性，脑内乙酰胆碱(Ach)水平及大白鼠空间记忆。结果：OA 0.4 μmol对PP2A活性的抑制率约60.0%，可致大白鼠空间记忆缺损，注射后24 h鼠脑Ach水平降低。结论：PP2A的下调在阿尔茨海默病(AD)病理变化中起着重要的作用。     

贝那普利联合氨氯地平治疗中重度原发性高血压的临床观察

目的　探讨贝那普利联合氨氯地平治疗中重度原发性高血压的疗效、安全性、耐受性。方法　62例中重度原发性高血压的病人 ,应用贝那普利联合氨氯地平进行治疗 ,观察其降血压的效果及不良反应。结果　服药 2周 ,显效 3 7例 (59 68% ) ,有效 2 3例 (3 7 10 % ) ,无效 2例 (3 2 2 % ) ,总有效率达 96 78%。不良反应少而轻 ,持续时间短暂。结论　贝那普利与氨氯地平两药联合应用在治疗中重度原发性高血压 ,效果好 ,平稳 ,依从性好 ,耐受性好 ,方便 ;两者可以常规联合应用 ,值得推广应用     

反相高效液相色谱法同时测定血清中阿魏酸和川芎嗪浓度

目的：建立一种用水浴去蛋白，利用反相高效液相色谱法(RP HPLC)同时测定血清中阿魏酸和川芎嗪浓度的方法。方法：采用RP HPLC以甲醇∶水(1%冰醋酸)＝7∶18为流动相，C18ODS(4.6 mm×250 mm，5 μm)紫外检测波长280 nm。结果：阿魏酸在30.2～70.8 μg·mL 1范围内线性关系良好，相关系数为r＝0.997 4；磷酸川芎嗪在10.1～50.7 μg·mL 1范围内线性关系良好，相关系数r＝0.992 2。结论：该法具有快速，精确，简便，不引入杂质的优点。     

应用GFP质粒构建及转染技术探讨Syk（L）核移位机制

【目的】通过研究Syk（L）在乳腺癌细胞亚细胞器中的分布和移位机制，探讨Syk（L）抑制乳腺癌的可能性机制。【方法】采用细胞胞核、胞浆分离技术和Western blot的方法，检测乳腺癌细胞系BT474中两种Syk蛋白异构体在细胞内的分布。构建绿色荧光蛋白（GFP）和Syk（L）核移位相关功能域融合蛋白质粒，转染入Cos7细胞内，荧光显微镜下观察融合蛋白在细胞内的分布。【结果】BT474细胞的细胞浆中可检测到Syk（S）和Svk（L）的表达，细胞核中只检测到Syk（L）的表达。在Cos7细胞中，GFP与Syk（L）的缺失域（deletion domain，DEL域）融合蛋白均匀分布于细胞内，GFP与Syk（L）的IDB域融合蛋白聚集于细胞核中；将DEL域上的294K、300K、及305K突变域非碱性氨基酸后构建成GFP—IDB（L）-M，突变的融合蛋白则失去核聚集现象。【结论】在乳腺癌细胞中。Syk（L）可从细胞胞浆移位到细胞核内。Syk（L）的IDB域具有完整的核移位功能，能将融合的胞浆蛋白GFP转移到细胞核内；DEL域的碱性氨基酸具有核定位信号功能。Syk（L）在乳腺癌细胞中的抑癌功能与其核移位有关。     

pcDNA3．1（＋）／NspA真核表达载体的构建及鉴定

目的构建pcDNA3.1( )淋病奈瑟菌外膜蛋白—奈瑟菌表面蛋白A(Neisseria surface Protein A,NspA)基因真核表达载体,为研制淋病奈瑟菌核酸疫苗奠定基础。方法根据淋病奈瑟菌NspA基因序列,设计合成一对引物,用PCR方法从淋病奈瑟菌基因组DNA中扩增出NspA基因片段,将扩增的产物连接于测序载体pUCm-T上,并构建重组体pcDNA3.1( )/NspA,进行酶切、PCR及测序鉴定。结果NspA基因体外扩增产物大小约为525 bp。所构建的pcDNA3.1( )/NspA重组体经双酶切及PCR鉴定,与预期片断的大小相符;测序结果与GenBank中收录的NspA全长序列一致,表明pcDNA3.1( )/NspA真核表达载体构建正确。结论成功地构建了淋病奈瑟菌真核重组表达载体pcD-NA3.1( )/NspA,为NspA蛋白的功能研究和淋病奈瑟菌核酸疫苗的研制提供了物质基础。