住院新生儿鼻腔和体表定植金黄色葡萄球菌的分子特征及耐药性

背景：金黄色葡萄球菌（SA）在鼻腔和体表的定植可增加新生儿SA感染的风险,了解住院新生儿的SA定植状况、菌株分子型及耐药性有助于制定合理的治疗方案。 目的：探讨NICU患儿入院时体表的SA定植、菌株分子特征及耐药性。 设计：横断面研究。 方法：纳入2020年8月1日至2021年1月31日入住首都医科大学附属北京儿童医院NICU时入院日龄≤28 d且胎龄≥28周的新生儿,收集临床信息。并对入院后12 h 内体表部位采集的拭子进行细菌培养和菌落计数,采用Staphytect Plus试剂盒及PCR扩增nuc基因进行SA菌株鉴定,并分别进行抗生素耐药性检测。 主要结局指标：NICU住院新生儿体表定植的SA分子特征及耐药性。 结果：共纳入766例NICU住院新生儿,其中257例（33.6%）存在≥1个部位的SA定植,单部位、2个部位、≥3个部位SA定植组分别为135例（52.5%）、65例（25.2%）和57例（22.3%）,各组间的临床特征（男婴、入院日龄、剖宫产、入院前纯母乳喂养、入院前应用抗生素、入院时气管插管常频机械通气、住院天数）、菌株分型（MRSA、MSSA）、sarA基因状态差异均无统计学意义,PVL 阳性差异有统计学意义。≥2个部位定植组与1个部位定植组比较,PVL阳性 ［39（32.0%）vs 23(17.0%) ,P=0.005］和sarA 阳性［83（68.0%） vs 56 (41.5%),P<0.01］差异有统计学意义。鼻前庭、脐根部、腋下和腹股沟分别培养出176株、124株、72株和76株,MSSA占比分别为82.4%、77.4%、80.6%和80.3%,各部位SA菌株的MRSA和MSSA占比差异均无统计学意义。MSSA菌株最常见的克隆型为ST398- t309型,MRSA菌株最常见的克隆型为ST59-SCCmecIV-t437。PVL 、sarA和PVL+sarA基因检测阳性株,MRSA和MSSA阳性率差异均无统计学意义。所有的288株SA均对莫匹罗星、利奈唑胺及万古霉素敏感;15株美罗培南不敏感株,其中MRSA 14株（1株耐药,13株中介）,MSSA 1株（中介）;耐药率从高到低依次为青霉素、红霉素、头孢曲松和苯唑西林。 结论：NICU相对病情稳定的新生儿鼻腔和体表皮肤SA定植率为33.6%。≥2个部位定植与1个部位定植相比,PVL和sarA阳性更高。MSSA菌株最常见的克隆型为ST398-t309,MRSA菌株最常见的克隆型为ST59-SCCmecIV-t437。本次研究中所有定植的SA菌株均对莫匹罗星、利奈唑胺及万古霉素敏感,有对美罗培南耐药MRSA分子型菌株检出。     

膀胱浆细胞样变异型尿路上皮癌临床病理观察和不同分子质量角蛋白的表达

目的 探讨膀胱浆细胞样变异型尿路上皮癌的临床病理特征、诊断及不同分子质量细胞角蛋白的表达模式.方法 运用光镜、特殊染色及免疫组化染色对1例罕见的浆细胞样变异型尿路上皮癌进行观察并复习文献.结果 瘤细胞弥漫分布呈浆细胞样特征,细胞胞质透亮或嗜酸性,核增大、偏位、深染.瘤细胞弥漫浸润黏膜固有层及浅肌层,可见伴随的低级别非浸润性尿路上皮癌成分.特殊染色:瘤细胞AB/PAS(+).免疫组化:CK20和CK7(++),CK5/6(-/+),CK8/18、CK18、CEA、CD138、EMA和AE1/AE3(+),E-cadherin、p63、CD38、ICA和vimentin(-).结论 浆细胞样变异型尿路上皮癌罕见,其不同分子质量角蛋白的表达存在差异,因其具有浆细胞样特征需与其他肿瘤相鉴别.     

树突细胞联合CIK杀伤肺癌细胞的实验研究

目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与同源性树突细胞(DC)共同培养后增殖活性和细胞表型的变化,以及对SPC-A-1人肺癌细胞的杀伤作用.方法 通过采集健康志愿者外周血分离单个核细胞(PMBC),根据黏附特性的不同将贴壁细胞诱导为成熟的DC,同时将非黏附细胞诱导分化为CIK,在培养第9 d时将DC和CIK细胞按1∶20混合共培养3 d,同时以单纯CIK细胞为对照,运用LDH释放法检测对SPC-A-1的杀伤活性.结果 DC-CIK共培养后的增殖速度快于单纯的CIK细胞,培养12 d时CIK和DC-CIK的CD3+CD8+,CD3+CD56+双阳性率分别为51.2%±6.6%,21.4%±4.2%及70.7%±5.9%,39.6%±4.7%,表达差异有统计学显著性意义(P<0.001).在5∶1～20∶1效靶比范围内,DC-CIK对肺癌细胞的杀伤活性高于CIK(P<0.05),且随效靶比增加,杀伤活性增强.结论 DC-CIK的增殖活性和杀伤活性均高于单纯的CIK细胞.     

人工抗原呈递细胞诱导CML28特异性T淋巴细胞杀伤急性白血病细胞的研究

目的 探讨以人工抗原呈递细胞模拟树突细胞(DC)体外诱导特异性T淋巴细胞活化、增殖,观察特异性T淋巴细胞杀伤白血病细胞的效应.方法 用慢性粒细胞白血病细胞特异性抗原肽(CML28)作为目标肽,并以磁珠同时负载人工合成的HLA-A2-Ig二聚体-抗原肽(CML28)复合物以及B7-1分子,作为诱导T淋巴细胞的活化、增殖的双信号分子,模拟抗原呈递细胞的生物功能,建立一种人工抗原呈递细胞;从HIA-A2健康骨髓捐献者骨髓或外周血中分离出单个核细胞作为效应细胞,并与人工抗原呈递细胞共孵育,以流式细胞术检测特异性T淋巴细胞活化、增殖程度.以初治急性白血病细胞作为靶细胞,将特异性T淋巴细胞与白血病细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1比例共孵育4 h,用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测杀伤急性白血病细胞的效果.结果 以该人工抗原呈递细胞刺激T淋巴细胞后,其CML28特异性T淋巴细胞比例明显增高,实验组中抗原肽ALFCGVACA、FLQGDTSVL、DLMSSTKGL、VLTFALDSV所诱导的特异性T淋巴细胞比例分别为(13.5±1.6)%、(15.2±1.5)%、(14.7±1.8)%、(34.3±3.5)%,与对照组[(2.2±0.4)%]比较,差异均有统计学意义(P<0.01).当效应细胞与靶细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1混合后,随着效应细胞的增加,诱导杀伤急性白血病细胞效率也明显增强,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 以磁珠为平台的人工抗原呈递细胞能有效模拟人抗原呈递细胞,诱导T淋巴细胞特异性杀伤白血病细胞,为白血病的免疫治疗提供了一种新的途径.     

血清和支气管肺泡灌洗液胃泌素前体释放肽片断31-98水平与小细胞肺癌不同病理分期的关系及其临床意义

目的 探讨血清和支气管肺泡灌洗液胃泌素前体释放肽片断31-98(ProGRP)水平与小细胞肺癌(SCLC)不同TNM分期的关系及其临床意义.方法 将明确痛理组织学分型的96例SCLC患者分为3组:Ⅰ～Ⅱ期SCLC(Ⅰ～Ⅱ期)组30例,Ⅲ期SCLC(Ⅲ期)组31例,Ⅳ期SCLC(Ⅳ期)组35例,并以90例确诊的肺部良性病变患者做为对照组.采用酶联免疫吸附实验对所有患者进行血清和支气管肺泡灌洗液ProGRP检测,同时以神经元特异性烯醇化酶(NSE)做对比研究,比较血清和支气管肺泡灌洗液ProGRP水平与SCLC不同TNM分期的关系.结果 Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期组和对照组血清、支气管肺泡灌洗液ProGRP水平分别为(295.33±118.56)μs/mol与(516.67±208.45)μg/mol、(421.13±196.66)μg/mol与(1170.55±414.65)μg/mol、(758.76±326.19)μg/mol与(1739.12±696.08)μg/mol和(29.68±16.32)μg/mol与(49.23±22.50)μg/mol(P均＜0.01);各组血清、支气管肺泡灌洗液NSE水平分别为(10.36±6.76)mg/mol与(16.66±11.62)mg/mol、(24.19±10.88)mg/mol与(45.47±20.74)mg/mol、(35.76±17.30)mg/mol与(65.18±29.87)mg/mol和(9.70±5.28)mg/mol与(9.70±5.28)mg/mol(P均＜0.01).血清和支气管肺泡灌洗液ProGRP和NSE水平,Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期组明显高于对照组(P均＜0.01).各组血清ProGRP检测阳性率分别为60.00%、70.97%、82.86%、6.67%(P均＜0.01),支气管肺泡灌洗液ProGRP检测阳性率分别为63.33%、74.19%、85.71%、4.44%(P均＜0.01);血清NSE检测阳性率分别为23.33%、67.74%、80.00%、22.22%(P均＜0.01),支气管肺泡灌洗液NSE检测阳性率分别为26.67%、70.97%、82.86%、26.67%(P均＜0.01);Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期组支气管肺泡灌洗液ProGRP和NSE检测阳性率均高于血清检测,且均随其分期级别提升而增高;但Ⅲ期组和Ⅳ期组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 血清和支气管肺泡灌洗液ProGRP及NSE检测对SCLC的诊断与TNM分期均有较大的临床价值;对不同TNM分期SCLC的诊断,支气管肺泡灌洗液ProGRP和NSE检测优于血清检测;对SCLC的早期诊断血清和支气管肺泡灌洗液ProGRP检测优于NSE.     

专用肠内营养制剂对急性坏死性胰腺炎大鼠蛋白质代谢的影响

目的 观察专用肠内营养制剂(EN-S)对ANP大鼠蛋白质代谢的调节作用.方法 应用3.8%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制备32只ANP模型大鼠,分为对照组、EN-S 组、EN组和PN 组4组,各8只.营养各组于造模后12 h分别给予EN-S、EN和PN制剂.检测各组制模后12 h、24 h、48 h的血淀粉酶,观察胰腺组织的病理改变,以及第7天大鼠体重、血浆氨基酸谱和血清白蛋白含量.结果 制模后第7天,EN-S组大鼠体重、血清白蛋白、血浆天门冬氨酸(Asp)、蛋氨酸(Met)和赖氨酸(Lys)显著高于普通EN组(P＜0.05).EN-S组与PN组的体重、血清白蛋白、氨基酸谱整体构成无显著性差异.结论 EN-S制剂能够改善ANP大鼠的蛋白质代谢,有助于整体情况的改善.     

手术室护士心理健康及社会支持关系的研究

目的了解手术室护士的心理健康状况,探讨手术室护士心理健康及社会支持关系。方法采用随机抽样方法对3所三甲医院的120名手术室护士进行症状自评量表（SCL-90）、社会支持评定量表的问卷调查。结果手术室护士社会支持总分（29．46±5．51）,客观支持（6．53±1．34）分,主观支持（16．07±4．15）分;社会支持对心理健康有显著影响,主观支持,客观支持和支持利用三个维度与SCL-90症状均呈负相关（P〈0．01）;文化程度与支持利用呈正相关（P〈0．01）。结论护士社会支持和心理健康水平存在一定的相关性,提示社会支持有助于提高手术室护士的心理健康。     

MRSA在ICU分布情况调查与随机扩增多态性DNA同源性分析

目的:监测ICU医护人员、住院患者,及环境中MRSA的携带及分布情况,以提出针对性预防与控制措施。方法:对本院ICU的20位医护人员、8例住院患者的手、咽和鼻前庭等部位,及ICU环境中的物体表面和空气同时进行采样,采用免疫富集-显色培养基分离MRSA,应用VITEK 32全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏试验;对MRSA进行随机引物扩增多态DNA检测并进行同源性分析;比较MRSA的耐药谱分型和随机扩增多态性DNA基因分型之间的差异,判断医护人员、住院患者及环境中分离的MRSA的相关性。结果:共检出31株MRSA,20位医护人员11位检出15株MRSA,8位患者5位检出9株MRSA,分离于同一个体不同部位的重复分离株经随机扩增多态性DNA同源性分析均为同一克隆菌株。52份环境物体表面检出7株MRSA。根据随机扩增多态DNA聚类分析可以将检出的MRSA分为3个类型。结论:医护人员MRSA带菌率较高,部分医务人员、住院患者和环境中分离的MRSA有较高的同源性,ICU存在人与人和人与环境之间的MRSA传播。     

凋亡抑制基因aven在急性髓系白血病的表达及其临床意义

本研究旨在探讨AML患者凋亡抑制基因avertmRNA的表达情况,分析其临床意义,为预后评估提供实验依据。应用实时荧光定量PCR方法检测69例初诊AML患者外周血白细胞avenmRNA的表达水平,分析avenmRNA的表达水平与患者的年龄、性别、白细胞数,血小板计数、血红蛋白和LDH水平、外周血和骨髓的原始细胞比例、FAB分型、患者的疗效和复发的关系,21名正常人的外周血作为对照。结果表明：69例初诊AML患者avenmRNA表达水平的中位值为37．2（11．72—178．93）％,正常人外周血白细胞aven mRNA表达水平中位值为28．81（10．81-50．98）％,AML患者avenmRNA表达水平明显高于正常人（p=0．006）。avenmRNA的表达水平与患者的年龄具有明显的相关性（r=0．25,P=0．039）,以AML患者中位年龄（44岁）为界分为2组,年龄大于／等于44岁组aven mRNA表达水平[中位值50．08％,（18．88—152．02）％]明显高于年龄小于44岁组[中位值32．41％,（11．72—178．93）％],（P=0．018）。aven mRNA的表达水平与患者Hb水平和FAB分型具有明显的相关性（r=0．29,P=0．019;r=0．253,P=0．036）。2个化疗疗程后avenmRNA表达水平低于中位值组的完全缓解率（25／30,83．33％）高于avenmRNA表达水平高于中位值组（21／30,70％）,但差别无统计学意义（P=0．22）。复发患者avenmRNA的表达水平与无复发者相比无明显升高（P=0．076）。结论：初诊AML患者凋亡抑制基因avenmRNA的表达水平明显升高,可能与AML的发病有关,但尚未发现基因avcilmRNA的表达情况与疾病的疗效和复发之间的关系。     

不同溯源的两台血凝仪测定纤维蛋白原方法学比较

目的比较SYSMEX CA6000与STA Compact 2台血凝仪测定纤维蛋白原的结果,了解其偏倚的可接受性。方法根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件,用2台血凝仪同时测定40例患者的纤维蛋白原,检查离群点并进行直线相关分析,计算医学决定水平处的预期偏倚。结果2台仪器测定结果均无离群点。直线回归方程为YΛ=0.851 6X-0.048 7,r=0.992。3个医学决定水平处预期偏倚分别为0.093、0.197、0.791 g/L。结论纤维蛋白原的3个医学决定水平处预期偏倚95%置信区间下限均低于允许偏倚,SYSMEX CA6000测定结果与STA Compact测定结果相当,偏倚可接受。