全人源肝癌噬菌体单链抗体的筛选及特异性鉴定

目的对全人源肝癌噬菌体单链抗体库进行鉴定,筛选肝癌抗体,同时对抗体的活性及特异性进行鉴定。方法PCR鉴定阳性重组菌TG1中人肝癌ScFv的插入率。先以人成纤维细胞吸附后再以体外培养的肝癌细胞SMMC7721为抗原对所建抗体库进行3轮“吸附洗脱扩增”的亲和筛选。将筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定;通过ELISA法及FCM鉴定其与人肝癌细胞及正常细胞的结合活性。结果ScFv基因插入率为70%。在亲和筛选过程中,肝癌噬菌体单链抗体得到富集,收获率逐轮得到提高,第3轮为第1轮的214倍。筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定,均可检测到目的基因。ELISA分析结果显示18个克隆与SMMC7721呈阳性反应,阳性率为90%,15个克隆与成纤维细胞有交叉反应。得到3株肝癌单链抗体。ScFv的FCM鉴定表明,以正常胎肝细胞L02为对照,ScFv与肝癌结合比率为41.3%。特异性鉴定表明,其与肝癌细胞结合活性明显高于正常细胞。结论利用噬菌体抗体库技术结合减数筛选得到了肝癌噬菌体单链抗体及其基因,且筛选后的抗体片段与人肝癌细胞有特异性的结合活性。     

寡糖对免疫系统作用的研究进展

介绍了寡糖对非特异性免疫系统中巨噬细胞自然杀伤细胞以及补体的激活作用;寡糖对特异性免疫系统中B细胞和T细胞的调节作用;以及寡糖在抗肿瘤、作为人类免疫缺陷病毒(HIV-1)疫苗方面的应用。     

可乐定置换物对正常大鼠离体胰岛功能的影响

目的 探讨可乐定置换物(CDS)对离体正常大鼠胰岛功能的影响。方法 胶原酶和DNA酶联合消化法分离SD大鼠胰岛，RPMI1640组织培养液过夜培养，采用Millipore Multisereen系统观察CDS对胰岛功能的影响。放免法测定孵育液中胰岛素及胰高糖素的浓度。结果 离体胰岛胰高糖素的分泌明显受葡萄糖浓度的抑制，CDS显著抑制胰高糖素的分泌，且抑制强度明显依赖于CDS的浓度。离体胰岛胰岛素的分泌依赖于孵育液中的葡萄糖浓度，CDS明显刺激胰岛素的释放。Ca^2 通道阻滞剂硝苯吡啶(25μmol／L)及K^ 通道开放剂二氮嗪(100μmol／L)可显著抑制胰岛素释放，但其作用可被CDS消除。结论 作为咪唑啉受体的内源性配体，CDS可刺激离体胰岛胰岛素的释放，抑制胰高糖素的分泌。     

活体肝移植治疗肝豆状核变性5例

目的 探讨活体肝移植治疗小儿肝豆状核变性的临床疗效。方法 采用亲体部分肝移植术及术后监测临床生命体征、血生化指标,抗感染、免疫抑制、营养支持等综合方法,治疗肝豆状核变性5例。结果 供体术后顺利康复;患儿术后健康存活,至今分别为3(3例)、2、1年。肝脏功能、血铜蓝蛋白已恢复正常,正常饮食,均无复发。结论 活体肝移植可纠正小儿肝豆状核变性的肝脏病变及原有的代谢缺陷,提高患儿生活质量,挽救其生命,是治疗小儿肝豆状核变性终末期肝病的一种有效方法。     

杀飞克对印鼠客蚤毒杀效果研究

目的　观察杀飞克对印鼠客蚤的实验室毒效和现场灭效。方法　实验室用瓶膜法 ,现场用滞留喷洒法。结果　 (1)当药物浓度为 6.2 5mg/L时 ,KT50 为 5 .75min ;当药物浓度为 12 .5、2 5、5 0、10 0mg/L时 ,KT50 分别为 3 .5 2、6.0 7、3 .13和 3 .0 5min ;(2 )当药物浓度在 12 .5mg/L以上时 ,2 4h死亡率均为 10 0 % ;(3 )药膜在室温和普通湿度下存放1年后 ,当药物浓度在 5 0mg/L以上时 ,2 4h死亡率均为 10 0 % ;(4 )现场灭效 :药物浓度 3 0 0mg/L对地面游离印鼠客蚤的 2d校正灭蚤率为 10 0 % ,15d校正灭蚤率为 82 .72 % ,3 0d校正灭蚤率为 91.2 4%。结论　杀飞克 10 %可湿性粉剂毒力强 ,现场灭效好 ,气味小 ,对人畜安全 ,可在控制家鼠鼠疫灭蚤中使用。     

具有高临界相转变温度的热敏性高分子材料

介绍了一类具有高临界相转变温度(UCST)的热敏性高分子材料,并对其相转变机理、热敏性影响因素及表征方法做了讨论。UCST类高分子材料的热敏性受到相对分子质量、疏水基团、溶液中的质子受体/给体、电解质等多种因素的影响。当UCST类高分子材料与具有最低临界相转变温度(LCST)的高分子材料共聚后,可得兼具UCST和LCST特点的新型功能材料,拓展了热敏高分子材料的应用领域。     

人类α-actin 启动子真核表达载体的构建

目的 利用PCR技术克隆了人类α-actin 基因的启动子(约450 bp).方法 将PCR产物连接到pMD-18T载体上,酶切鉴定后测序,并进行软件分析.结果与结论 序列分析表明,扩增片段虽然与GenBank里登陆的序列同源性仅为72%,但包含有完整的启动子元件和转录专一调节因子相应的识别序列.用去掉启动子的pEGFP-N1作为框架结构,尝试构建真核表达载体,并获得了含人类心肌α-actin启动子的真核表达载体pEGFP-N1-α-actin-P.     

关于中医基础理论重点学科建设问题的讨论

基础理论学科的知识创新与重点学科的建设工作密切相关，知识创新的技术平台建设主要依赖于学科发展方向、学术带头人、学科人才梯队和运行管理机制的建设。关注学术发展动态。拟定高起点、高水平的学科发展方向；根据科学发展趋势，选拔开拓进取、勇于创新的学科带头人；瞄准科学前沿，建立多层次、结构优化的学科人才梯队；创新管理模式，实行科学化运行机制和管理体制是保障知识创新的前提和基础。     

血液系统疾病中LRP15基因启动子区甲基化状态的研究

目的:探讨LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化与血液系统疾病的关系和临床意义。方法:采用甲基化特异性PCR方法检测了9例正常人、73例急性白血病患者、8例慢性髓系白血病患者、2例慢性淋巴细胞白血病、12例血液系统良性病患者骨髓LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化状况;硫化修饰结合限制性内切酶分析及硫化测序验证了一例血液系统良性病患者LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化。结果:AL患者LRP15基因甲基化阳性率(71.23%)高于正常供者及慢性白血病(10%),差异有统计学意义(P<0.05)。LRP15基因在非恶性血液病患者中甲基化阳性率(55.56%)高于正常供者,硫化修饰结合限制性内切酶分析及硫化测序进一步证实了上述结论。结论:LRP15基因启动子的甲基化与不成熟的白血病细胞有关,与血液系统良性疾病也有一定关系。     

肠源性内毒素血症对慢性实验性肝损伤的影响及防治对策的研究

目的探讨肠源性内毒素血症对慢性实验性肝损伤的影响及防治对策。方法将Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组、慢性肝损伤组及双利肝治疗组(双利肝组),每组10只。采用CCl4复合因素复制慢性肝损伤模型,4周末处死动物,取血检测血浆内毒素(ET),血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)和白介素-4(IL-4),同时观察肝脏组织学变化。结果①CCl4所致的慢性肝损伤组与正常大鼠组相比,血浆ET、血清ALTI、L-4水平明显增高(P<0.05),血清IL-2、IFN-γ水平明显降低(P<0.05)。②与CCl4所致慢性肝损伤组相比,双利肝组血浆ET、血清ALTI、L-4水平明显下降(P<0.05),血清IL-2、IFN-γ水平明显增高(P<0.05)。③组织学观察:经双利肝治疗后肝脏组织学明显改善。结论CCl4所致慢性肝损伤大鼠存在肠源性内毒素血症,后者可能导致细胞免疫功能紊乱。经双利肝治疗后血浆内毒素水平明显下降,Th1/Th2比例得到调整,肝细胞损伤减轻。