多药耐药基因转染脐血单个核细胞及其表达与功能的体外研究

目的：为克服白血病化疗中的骨髓抑制，采用含人多药耐药（MDR1）基因全长cDNA逆转录病毒载体转染入脐血单个核细胞，探索一种MDR1基因导入脐血造血细胞稳定、有效的方法，评价MDR1基因转染脐血细胞及其功能的表达，为体内转染MDR1基因保护骨髓免受大剂量化疗药物损伤提供条件。方法：采用含有MDR1基因表达质粒pHaMDR1/A的包装细胞PA317传代培养产病毒法，通过浓缩病毒上清液将MDR1基因导入人脐血单个核细胞，应用聚合酶链反应（PCR）方法、免疫组化法、流式细胞学等方法从基因、蛋白质、功能及细胞生物学特性等不同水平检测MDR1基因在脐血单个核细胞的表达、转染率及其与转染时间的关系和功能的表达；转染行为是否影响脐血细胞生物学特性。结果：（1）建立了一种安全可行、稳定高效的MDR1基因体外转染脐血造血细胞的体系和方法；（2）PCR方法证实外源性MDR1基因可有效性地体外整合到脐血单个核细胞中；（3）免疫组化法测得2日、4日、6日转染率分别为18.0%、29.8％、34.7%;(4)柔红霉素排出试验证实导入的MDR1基因表达产物P-gp有正常的生物学功能；（5）转染后的脐血细胞周期生物学特异性无异常。结论：MDR1基因体外转染脐血造血细胞是安全可行的，且在体外有稳定、有效的表达。这一方法为进一步在化疗骨髓保护的体内实验提供了有利的依据。     

中药对粘附分子表达调节的研究

目的 :探讨中药调节粘附分子表达的机理。方法 :通过文献报道的实验和临床研究 ,其中以活血化瘀药和清热解毒药最为显著 ,阐述了中药对粘附分子的作用及影响。结果 :大量研究表明 ,中药在调节LFA - 1细胞 (D1 1 a/CD1 8)、I(AIU -ICD54)、CD1 8/CD1 1 b、VCAM - 1等具有重要作用 ,这将中药的药理作用提高到了基因调控水平。结论 :今后从分子免疫学的深度 ,应用药物基因组学作用于中西医结合防治领域。     

突发性耳聋的疗效探索

目的 探索突发性耳聋的有效治疗方案。方法 将我科近年来收治的394例突聋患者分为5组。第一组中西医结合治疗40例。在此基础上，第二组加体外反搏治疗44例，第三组加高压氧舱治疗46例，第四组加光量子血液疗法46例；第五组加声信息治疗52例。与之比较相应各组的中西医结合组分别为42例、44例、40例和40例。结果 第一组有效率70．0％，第二组有效率86．4％，第三组有效率89．1％，第四组有效率93．5％，第五组有效率88．5％。第一组与其余4组的疗效差异有显著性意义（P＜0．05）。结论 药物治疗的同时加用各种特殊治疗，均将取得更好的疗效。     

cyclinD1与非小细胞肺癌患者预后的关系

目的　探讨非小细胞肺癌 (Non smallcelllungcancer ,NSCLC)组织中细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达及其与预后的关系。方法　对 73例原发性NSCLC组织和 2 0例良性肺部疾病组织进行免疫组织化学染色检测其cyclinD1,并结合临床资料进行分析。结果　良性肺部疾病组织 2 0例中cyclinD1的阳性率为 15 %。 73例NSCLC组织中cyclinD1阳性表达率为 64 4% ,且在肺鳞癌、腺癌组织中表达的差异无显著性。有淋巴结转移组其CyclinD1阳性率明显高于无淋巴结转移组 ,P <0 0 5 ,Ⅰ～Ⅱ期cyclinD1表达的阳性率高于Ⅲ～Ⅳ期 ,P <0 0 5。结论　CyclinD1的过表达与NSCLC的发生、发展有密切相关 ,检测cyclinD1可以协助NSCLC的诊断和预后判断     

直肠癌切除吻合术后局部复发因素与再手术的探讨

直肠癌切除吻合因不改道，保留肛门括约肌节制功能，病人乐意接受，近期效果尚好。1979-1995年报道230例直肠癌切除吻合术后有38例局部复发，复发率为16．5%。38例行再手术42次，改为Miles手术17例，横结肠或乙状结肠造口术9例，吻合口复发灶局部切除9例，肝叶切除4例，卵巢切除5例，肺叶切除3例，腹盆腔会阴放疗8例。存活5、4、3、2、1年者分别为11、7、5、5、5例。局部复发与直肠癌生物特性、临床病理分期、癌肿部位有关。吻合口局部复发可用电切或激光切除，但肠壁病灶大和肠外有转移者应行Miles手术，术后辅以化疗、放疗、栓塞等措施。     

失血性休克对内毒素诱导肿瘤坏死因子α产生的影响

观察了大观察失血性休克（ＨＳ）条件下小剂量内毒素（ＬＰＳ，１μｇ／ｋｇ）对肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）的诱生作用及其细胞来源。结果显示，静脉注射ＬＰＳ后９０ｍｉｎ，ＨＳ＋ＬＰＳ组血浆ＴＮＦα水平分别较ＨＳ组高２０倍（Ｐ〈０．０１），较ＬＰＳ组高２．７倍（Ｐ〈０．０５）。体外研究结果显示，复苏后即刻，外周血白细胞（ＰＷＢＣ）体外产生ＴＮＦα的能力明显受抑，分别较休克前和假手术组低５５．８％和３６．５％     

大鼠脑损伤后脑组织递质性氨基酸的变化及意义

目的：了解脑损伤后脑组织递质性氨基酸的变化规律，及其对颅脑损伤的影响。方法：采用氨基酸微量检测技术测定了大鼠颅脑损伤后脑组织匀浆中兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）－谷氨酸（Ｇｌｕ），门冬氨酸（Ａｓｐ），抑制性氨基酸－γ氨基丁酸（ＧＡＢＡ），甘氨酸（Ｇｌｙ），牛黄酸（Ｔａｕ）的含量变化。结果：伤后１０分钟时Ｇｌｕ，Ａｓｐ即明显下降，１～４小时略回升，８小时又进一步下降，２４小时Ｇｌｕ基本恢复至对照水平，Ａｓｐ则无明显恢复。ＧＡＢＡ，Ｇｌｙ伤后１０分钟明显升高。ＧＡＢＡ伤后１～２小时基本恢复至对照水平，８小时又进一步增高，２４小时低于对照组；Ｇｌｙ在１～２４小时均高于对照组，８小时达峰值。Ｔａｕ无明显变化，除Ｔａｕ外，上述各氨基酸含量变化与伤情有关。结论：递质性氨基酸在脑损伤后的继发性损伤中起重要作用。     

LPS、TNF-α、IL-1β对大鼠多核白细胞环氧合酶2表达的影响

为探讨LPS、TNF-α、IL-1β对多核白细胞（PMN）环氧合酶2（COX-2）表达及前列腺素（PGs）的影响,以LPS、TNF-α、IL-1β刺激大鼠PMN24h后,采用RT-PCR检测PMN COX-2mRNA表达情况并观察PGs的变化。结果发现,静息状态下PMN仅表达极少量的COX-2mRNA;受炎性刺激后,PMN大量表达COX-2mRNA,同时伴有PGs的升高。说明炎性刺激可诱发PMN的COX-2高表达和PGs升高,提示COX-2在PMN参与的炎症反应中可能起重要作用。     

“病人选医生”贵在坚持和完善

从指导病人选择满意的医生;让年轻医生在“病人选医生”的改革中锻炼成长;防止医务人员之间的不良竞争;深化医院人事及分配制度改革,科学考核,完善激励机制等方面介绍了重庆市外科医院的经验及成效。指出:“病人选医生”贵在坚持和完善;“病人选医生”与传统的三级医生负责制相辅相成,是其完善和补充。     

HPLC法测定血清中司帕沙星的浓度

采用HPLC法测定血清中司帕沙星的浓度。血清标本经甲醇沉淀蛋白,高速离心后取上清液直接进样。色谱条件以PE-pack C_(18)柱(5μm,4.6mm×150mm)为色谱柱,甲醇-0.2mol·L~(-1)乙酸铵溶液(pH2.7)(30:70)为流动相,检测波长为298nm血清中药物的最低检测浓度为0.04μg·ml~(-1)。在0.05～2μg·ml~(-1)血药浓度范围内峰高与药物浓度线性关系良好,Y=5.835 1X-0.030 6,r=0.999 3。相对回收率为91.9％～103.4％,绝对回收率为91.5％～93.6％。日内RSD为1.5％～1.9％,日间RSD为1.9％～4.5％。方法简单、快速、准确,可用于司帕沙星的临床药动学研究。