弓形虫致密颗粒蛋白GRA2真核表达质粒的构建与体外表达

目的构建弓形虫致密颗粒蛋白GRA2的真核表达重组质粒。方法设计合成GRA2引物，运用PCR方法扩增其基因片段，经克隆至pMDl8-T载体后，亚克隆至真核表达质粒pcDNA3．1（-）而构建重组表达质粒pcDNA3．1-GRA2。脂质体法将构建的重组质粒转染HFF细胞，RT—PCR法检测转染细胞中GRA2的表达情况。结果PCR扩增GRA2基因序列正确，构建的重组表达质粒pcDNA3．1-GRA2经PCR、EcoRⅠ／HindⅢ双酶切和测序鉴定正确；转染GRA2基因的细胞，RT—PCR可见目的条带。结论成功获得真核表达重组质粒pcDNA3．1-GRA2，为进一步研究弓形虫疫苗的免疫保护性奠定基础。     

急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入术后无复流现象的危险因素及预后

目的分析经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后冠状动脉无复流现象发生的危险因素和预后。方法回顾性分析因急性冠状动脉综合征入我院行PCI治疗的患者524例中有较完整随访资料的427例,PCI支架置入即刻在无影响血流的血栓、栓塞、夹层、痉挛情况下,冠状动脉造影前向血流TIMI≤2级为无复流,TIMI 3级为正常血流。利用Excel随机函数表,从393例急诊PCI冠状动脉前向血流恢复正常的患者中随机抽取70例,为对照组。结果冠状动脉无复流患者34例,无复流组心肌梗死和糖尿病比例明显高于对照组,且胰岛素水平、白细胞总数和中性粒细胞总数也明显高于对照组。院内和院外不良事件发生率无复流组明显高于对照组,左心室射血分数较前明显减低,而左心室舒张末内径较前明显增大。结论无复流受既往糖尿病、胰岛素及白细胞水平的影响,可使住院期间和院外不良事件明显增加,是心肌继续缺血、心室重构和心功能恢复障碍的预测因子,也是心肌和微血管损伤的标志。     

血管内介入治疗椎动脉夹层动脉瘤的回顾性研究

目的：目前,椎动脉夹层动脉瘤的治疗手段仍有争议。本研究通过对椎动脉夹层动脉瘤患者的临床和影像学特点的分析,评估血管内治疗技术的安全性和有效性。方法：回顾性分析哈尔滨医科大学神经外科2007年1月～2014年7月行血管内介入治疗的椎动脉夹层动脉瘤患者的临床资料,对患者动脉瘤位置,临床表现,治疗方法及预后进行统计学分析,P＜0．05有意义。结果：将过去7年内,在本中心治疗的48例夹层动脉瘤纳入研究对象,其中17人有蛛网膜下腔出血表现。48例患者中12例采用血管孤立术,25例采用支架辅助弹簧圈技术,4例单纯采用支架技术,7例患者进行假腔栓塞。结果：夹层动脉瘤发生在右椎28例,左椎20例。串珠征是椎动脉夹层动脉瘤最常见的表现,见于23例患者。部分患者出现了围手术期并发症,其中3例患者栓塞后再次出血。未破裂动脉瘤患者的预后良好率（100％）好于破裂组（85．7％）。结论：血管内介入治疗技术应根据患者的临床表现、影像学特点、后循环情况以及术者的经验进行选择。各项技术目前仍存有不足之处,需要今后的技术发展及材料的升级来进一步改善。     

TGFβR2作为非小细胞肺癌伴随诊断分子的探讨

目的 定量分析转化生长因子受体2(Transforming growth factor receptor 2, TGFβR2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)及其癌旁组织中的表达,探讨TGFβR2的表达在NSCLC伴随诊断(companion diagnostic,CD)中的意义。方法 取患者手术中立即取材置于液氮中的新鲜组织标本(90例NSCLC组织,40例癌旁肺组织),抽提RNA,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测标本。TGFβR2基因表达量通过2-ΔΔCT方法计算。TGFβR2的表达用(x±s)呈现。独立样本t检验比较两组差异,应用Kaplan-Meier生存分析来评估总生存期(Overall survival, OS)和无进展生存期(Progression-free survival, PFS)。结果 实验结果表明NSCLC组织中TGFβR2的表达(3.19±4.28)显著高于癌旁肺组织(1.01±0.41),二者差异具有统计学意义。生存分析显示TGFβR2高表达的NSCLC患者预后不良,总生存期和无进展生存期明显降低。结论 TGFβR2可以作为NSCLC潜在的伴随诊断分子标志物。     

阿尔茨海默病患者睡眠障碍的临床特点及相关因素

目的分析阿尔茨海默病(AD)患者睡眠障碍的临床特点,探讨其与认知、精神行为、生活能力及护理负担的关系。方法收集山东省立医院神经内科就诊的阿尔茨海默病33例患者病历资料,采用简易精神状态评价量表(MMSE)等评估认知功能、精神症状和生活能力,采用匹斯堡睡眠质量指数(PSQI)和艾泼沃兹嗜睡量表(ESS)进行评估,将各量表得分进行相关分析。根据PSQI得分将患者分组,比较有无睡眠障碍的两组患者各量表得分情况。结果 PSQI量表中各类型的睡眠障碍在AD患者中均有发生,发生率最高的依次为睡眠干扰(57.6%)、睡眠效率减低(54.5%)、日间功能障碍(51.5%)。PSQI得分与MMSE得分呈负相关,与CDR得分呈正相关。AD患者睡眠质量、入睡困难、睡眠时间、睡眠效率得分与MMSE得分呈负相关。定向力、即刻记忆、绘图等与PSQI得分呈负相关。AD患者中有睡眠障碍的较无睡眠障碍的CDR得分高,MMSE得分低。精神症状中,妄想、情感淡漠、食欲/进食障碍与睡眠障碍有相关性。有睡眠障碍的日常生活能力量表、护理负担量表得分高于无睡眠障碍患者。结论 AD患者普遍出现各种类型的睡眠障碍,此类患者的睡眠障碍与其痴呆程度、认知功能、日常生活能力、精神症状等密切相关,相对应的护理负担加重。     

五种布鲁氏菌核酸检测试剂盒检测性能的评价北大核心CSCD

目的比较5种布鲁氏菌核酸实时荧光PCR检测试剂盒的一致性和检出能力,为临床实验室选择检测方法和布鲁氏菌的诊断提供参考依据。方法选用经病原学检测确定为布鲁氏菌阳性的血液样本38份,健康人的血液样本24份,潘氏变形杆菌、溶藻弧菌、河弧菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌DNA各1份,使用5种试剂盒(编号A-E)分别进行核酸检测,比较5种试剂盒临床样本检测的一致性;选择1份阳性样本核酸用无RNA酶水梯度稀释得到5个浓度(浓度1:4453.13 fg/μL,浓度2:1113.28 fg/μL,浓度3:278.32 fg/μL,浓度4:69.58 fg/μL,浓度5:17.40 fg/μL),每个浓度使用5种试剂盒(编号A-E)分别进行3次检测,比较5种试剂盒的阳性检出率及批内重复性。结果5种试剂盒检测67份DNA样品的符合率稍有不同,试剂盒ABDE的符合率均为100%,试剂盒C的符合率为98.51%。批内重复性显示5种试剂盒在浓度1、浓度2、浓度3水平重复检测DNA的Ct值变异系数均<5%;在浓度1与浓度4梯度区间,试剂盒的阳性检出能力比较显示试剂盒A、B、D较高,为11/12,试剂盒C和E较低,为8/12。结论5种试剂盒的真实性和可靠性较好,灵敏度和符合率稍有差别,特异度均为100%;重复性较好,检测性能良好。部分试剂盒对弱阳性样本的检出能力不强,该类样本可使用多种试剂盒复核,以保障结果的准确性。     

浙江省衢州地区鼠类携带莱姆病螺旋体研究

目的 了解衢州市鼠类携带莱姆病螺旋体状况以及莱姆病螺旋体基因型。方法 采用针对莱姆病螺旋体5S~23S基因间隔区的巢式PCR方法检测鼠脾标本,对阳性样本进行基因测序及分析,构建系统发育树。结果 在378份鼠标本中检出莱姆病螺旋体核酸阳性57份,阳性率15.08%。有Borrelia garinii(B.g)基因型、Borrelia valaisiana(B.v)基因型Borrelia spielmanii(B.sp)基因型。结论 衢州境内鼠类存在至少3个型别莱姆病螺旋体感染,应加强该病原体的检测和莱姆病的防制。     

抗菌药物使用强度影响因子的概念及应用

目的：首次提出了抗菌药物强度影响因子（DIF）的概念,并将其应用于临床抗菌药物使用强度控制管理。方法：通过对临床科室抗菌药物使用频度（DDDs）和同期收治患者人天数（PDi）的数学分析,引入抗菌药物强度影响因子的概念,模拟计算各临床科室对全院抗菌药物使用强度影响因子的大小,并将其作为指标替代原有的药物固定分配方法。结果与结论：抗菌药物强度影响因子代表临床科室对全院抗菌药物使用强度的贡献,数值越高贡献越大。结果还表明,抗菌药物强度影响因子更能够公平地反映各临床科室的抗菌药物使用情况,方便医疗管理人员利用该因子对全院各科室抗菌药物使用情况进行指标管理。     

海军驻京宾馆餐服人员肠道沙门氏菌检测与分析

目的了解海军驻京宾馆餐饮服务人员肠道沙门氏菌的检出情况,通过主动监测及早发现和控制肠道沙门氏菌的带菌者。方法选取8家宾馆共704名餐饮服务人员,采集新鲜大便增值培养6 h后,显色培养基选择性培养24 h,血清凝集试验阳性菌落进行细菌生化及PCR实验,测试结果均阳性者判定为带菌者。结果被检测者中,沙门氏菌阳性1人,检出率为0.142%。结论与我国其他地区相比,海军驻京宾馆餐服人员肠道沙门氏菌检出率不高。     

乙醇联合二甲基甲酰胺致小鼠急性肝损伤的作用研究

目的研究乙醇联合二甲基甲酰胺(N,N-dimethylformamide,DMF)致小鼠急性肝损伤的作用。方法选用C57BL/6小鼠64只,随机分为8组,每组8只。其中3组为DMF模型1、2、3组,3组为乙醇+DMF 1、2、3组,另2组分别为正常对照组和20%乙醇对照组。采用DMF致小鼠急性肝损伤模型,染毒48 h后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力;留取肝脏组织,常规石蜡包埋切片,HE染色,用光学影显微镜观察肝脏组织病理变化;制备肝匀浆,测定肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、丙二醛(MDA)的含量。结果与阴性对照组相比,DMF模型组小鼠血清中ALT、AST和LDH活力随着剂量的增加而不断的升高,肝脏组织出现明显的肝细胞变性坏死;乙醇联合DMF可以明显升高小鼠血清中ALT、AST和LDH的活力,增加肝组织中MDA的含量,降低GSH和GSH/GSSG的比值,肝组织病理损伤明显加重;乙醇对照组上述指标均无明显变化。结论乙醇可加重DMF致小鼠急性肝损伤的作用。