INF-γ基因转染肺泡巨噬细胞抗肿瘤活性的研究

背景与目的活化的肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)具有抗肿瘤功能,γ干扰素(interferon-γ,INF-γ)是巨噬细胞的活化因子之一,其与巨噬细胞体外共同培养可增强巨噬细胞的免疫功能。本研究旨在了解人INF-γ基因体外转染肺癌患者的AM后对其抗肿瘤功能的影响。方法经肺泡灌洗获AM,分离纯化,以INF-γ基因转染AM,以RT-PCR方法和ELISA方法检测人INF-γ基因的成功转染;分别检测AM产生TNF-α、NO、IL-1的水平及AM杀伤L1210细胞的活性。结果 RT-PCR方法和ELISA方法均显示人INF-γ基因已成功转染AM;经人INF-γ基因转染后,肺癌患者AM产生TNF-α、NO、IL-1的水平较对照组明显升高(P<0.05);AM杀伤L1210细胞的活性较对照组明显增强(P<0.05)。结论 INF-γ基因体外转染肺癌患者的AM,能使AM的抗肿瘤活性明显增强。     

bcl-2反义寡核苷酸对小细胞肺癌NCI—H69细胞凋亡的影响

目的探讨bcl-2反义寡核苷酸能否增加小细胞肺癌细胞NCI—H69的凋亡。方法将NCI—H69细胞培养传代,细胞共分4组,反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组和空白对照组,通过脂质体将不同浓度的寡核苷酸导人细胞中,WesternBlot法检测bcl-2蛋白的表达,流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果与空白对照组比较,反义寡核苷酸组的bcl-2蛋白表达明显受到抑制,而正义寡核苷酸组和无义寡核苷酸组细胞的bcl-2蛋白表达则与空白对照组差异不明显。反义寡核苷酸组细胞在10、20、40umol／L 3个不同浓度时的凋亡率分别是（9．97±1．54）％、（15．28±1．73）％、（21．41±1．85）％,明显高于空白组和正义链、无义链组阴性对照组,且差异有统计学意义（F=7．19～15．48,q=5．21—7．98,P〈0．01）,而转染正义链和无义链组与空白组比较则差异无统计学意义。结论bcl-2反义寡核苷酸能有效封闭bcl-2基因的表达,增加小细胞肺癌细胞的凋亡。     

抗癌活性肽对人胃癌BGC-823细胞周期的调控

目的:探讨抗癌活性肽(anti-cancer bioactive peptide,ACBP)对人胃癌细胞BGC-823细胞周期的影响及其作用机制。方法:体外培养BGC-823细胞,将不同浓度的ACBP作用于细胞,MTT法测定不同浓度的ACBP对BGC-823细胞的生长抑制率;HE染色观察形态学变化;半定量RT-PCR检测细胞周期负性调控分子p27基因mRNA表达的变化。结果:不同浓度(10.0～25.0mg/L)ACBP均能抑制BGC-823细胞的生长,细胞出现明显的凋亡特征性改变,且具有浓度和时间依赖性,25.0mg/LACBP作用72h抑制率为(84.4±2)%,中效浓度(IC50)为7.86mg/L。RT-PCR发现经ACBP处理后,BGC-823细胞的p27mRNA表达明显增加。结论:ACBP对BGC-823细胞的生长有明显的抑制作用,并可诱导细胞凋亡,其抑癌机制可能与其调控细胞周期有关,使p27mRNA重获表达,从而发挥抗BGC-823细胞增殖的作用。     

平调饮抗肿瘤作用的实验研究

背景与目的:建立H22肝癌腹水瘤荷瘤小鼠模型,通过给予模型鼠平调饮灌胃评价其抗肿瘤作用.材料与方法:用H22腹水肝癌株种植于小鼠右腋皮下,致移植性肿瘤,建立H22肝癌腹水瘤荷瘤小鼠模型.将模型鼠分成阴性对照组,平调饮组,平调饮+5-Fu组和5-Fu组,共4组,各组模型鼠分别灌胃生理盐水、平调饮、平调饮+5-Fu和5-Fu,连续灌胃10 d后,观察瘤体大小、胸腺指数、脾脏指数、抑瘤率、生命延长率和VEGF在肿瘤及肿瘤周围组织中的表达.结果:平调饮组肿瘤平均瘤体、VEGF值减小,胸腺指数、脾脏指数、抑瘤率(48.6%)及生命延长率(168.3%)增高.结论:平调饮可提高胸腺指数,降低5-Fu对免疫功能的毒性作用,显著延长荷瘤小鼠的生存期.平调饮可能通过促进肿瘤细胞分化成熟,抑制肿瘤细胞增殖,降低肿瘤组织和肿瘤周围组织中VEGF表达,而对H22腹水型小鼠肿瘤的发展起抑制作用.     

BMP-2联合温热化疗对SW480中GDF15和TFF3表达的影响

目的：探讨骨形态发生蛋白-2（Bone morphogenetic protein-2,BMP-2）联合温热化疗对SW480中GDF15和TFF3表达的影响。方法：BMP-2作用于大肠癌SW480细胞系,置于43 ℃温热化疗30 min,培养6 h。（1）流式细胞法检测SW480细胞的凋亡;（2）Western blot法检测GDF15和TFF3蛋白表达情况;（3）RT-PCR半定量检测GDF15和TFF3 的mRNA表达。结果：BMP-2联合43 ℃温热化疗后SW480细胞凋亡增加,GDF15和TFF3蛋白表达水平下降,GDF15和TFF3 的mRNA表达亦下调。结论：BMP-2联合温热化疗通过抑制大肠癌SW480的GDF15和TFF3蛋白及其相关基因表达,增强抑制SW480的增殖及转移复发的作用;温热疗法联合化疗对GDF15和TFF3表达抑制有协同作用。     

Slc4a11基因缺失在CHED发病中的作用

目的　探讨Slc4a11缺失在先天性遗传性角膜内皮营养不良（congenital hereditary endothelial dystrophy, CHED）发病中的作用及其与自噬信号通路的潜在调控关系。方法　利用CRISPR/Cas9技术构建Slc4a11基因敲除小鼠模型。以野生型小鼠（wild type, WT）和Slc4a11基因敲除小鼠（knockout, KO）为实验对象,通过Western印迹法、RT-qPCR、茜素红染色、H-E染色、透射电镜评估KO小鼠角膜表型特征的变化。通过Western印迹法和RT-qPCR检测自噬标志物LC3、beclin1、p62在角膜内皮的表达量。透射电镜观察两组小鼠角膜内皮细胞自噬情况。结果　Slc4a11基因敲除小鼠角膜显示与CHED相似的表型特征,包括角膜厚度增加;角膜内皮细胞体积增大,密度减小;后弹力层增厚;角膜内皮空泡形成。KO小鼠与WT小鼠相比,LC3、beclin1的mRNA和蛋白的相对表达量上升,差异有统计学意义（P<005）,而p62的mRNA和蛋白的相对表达量下降,差异有统计学意义（P<005）。KO小鼠角膜内皮细胞内自噬体明显多于WT小鼠。结论　利用CRISPR/Cas9技术构建的Slc4a11基因敲除小鼠角膜显示CHED特征的表型。同时Slc4a11缺失通过增强自噬信号通路参与CHED的发病机制。     

青年乳腺癌28例临床病理分析

目的 探讨35 岁以下青年乳腺癌患者的临床病理特点及其与预后的关系.方法 回顾性分析辽宁省人民医院1998年1月至2002年12月收治的28 例青年乳腺癌患者的临床病理资料,并与同期中老年乳腺癌病例作对照分析.结果 青年乳腺癌患者治疗后5 年生存率为39.0%;中老年乳腺癌患者治疗后5 年生存率为73.0%,2 组在肿瘤直径、肿瘤分期、组织学分型、腋淋巴结转移数及5 年生存率均有显著性差异(P< 0.05).结论 本组青年乳腺癌患者与中老年乳腺癌患者比较,预后较差.     

2008-2019年南宁市手足口病暴发疫情流行特征分析

目的 了解南宁市手足口病暴发疫情的流行病学特征,为手足口病暴发疫情防控工作提供科学依据.方法 收集整理2008-2019年间南宁市报告的手足口病暴发疫情处置资料进行分析.结果 2008-2019年南宁市累计报告手足口病暴发疫情104起,每年3-6月和9-10月是疫情高发期,城区报告疫情起数较多,占61.54％,但县区罹...     

加味黄芪桂枝五物汤对2型糖尿病气阴两虚兼血瘀证患者下肢血管病变的影响

目的:探讨加味黄芪桂枝五物汤治疗2型糖尿病(T2DM)下肢血管病变(气阴两虚兼血瘀证)的临床效果.方法:选取96例气阴两虚兼血瘀型T2DM下肢血管病变患者,按照简单随机数字表法分成观察组与对照组各48例.两组均给予相同的常规西药治疗,观察组在此基础上联合加味黄芪桂枝五物汤内服治疗,连续治疗8周后对两组疗效进行评估.治疗...     

病证结合模式下腹泻型肠易激综合征实验动物模型的研究进展

从病证结合角度对功能性肠病进行诊治,体现了中医学辨证论治的特色.中医临床与基础实验的连接需要病证相结合的动物模型.因此,构建符合临床特征的病证结合模式下腹泻型肠易激综合征(IBS-D)动物模型,有利于人们进一步认识本病的病因及发病机制,从而发挥中医对本病的辨证优势.目前多数学者常应用多因素复合法制备腹泻型肠易激综合征动...