龟板有效成分抗紫外线损伤所致的胎鼠表皮干细胞的凋亡

目的确定紫外线损伤所致的胎鼠表皮干细胞凋亡模型,筛选抗凋亡的龟板有效成分,为进一步应用开发打下基础。方法分离培养胎鼠表皮干细胞,用流式细胞仪检测CK19和Integrin β1双标阳性细胞鉴定纯度。用紫外线直接照射细胞造成损伤模型,用龟板各成分对照培养,用流式细胞仪检测FITC-Annexin V和碘化丙锭(PI)双标,根据细胞凋亡率确定紫外线损伤模型和筛选具有抗凋亡作用的龟板有效成分。结果①第3代胎鼠表皮干细胞已达到96.57%以上纯度;②紫外线照射量为100mJ/cm2损伤15min再培养20h可获得稳定的损伤模型,总凋亡率为41.06%;③龟板有效成分2B、S6、S8、S9均有抗凋亡作用。结论龟板有效成分S8具有较好的抗紫外线损伤所致的胎鼠表皮干细胞凋亡作用,应进一步探讨其机制。     

柴胡疏肝散的历史沿革与现代药理作用

柴胡疏肝散是理气剂的代表方,临床运用广泛,疗效显著,具有疏肝理气,活血止痛之效。然而,柴胡疏肝散的出处尚存疑义,有学者认为该方是出自明代御医叶文龄的《医学统旨》,也有学者认为是出自明代医家张介宾的《景岳全书》。文章依据史料并结合历史背景,明晰柴胡疏肝散的出处;介绍柴胡疏肝散同名异方的概况与组方特点;探讨柴胡疏肝散中选用青皮与陈皮的差异;分析柴胡疏肝散的主治病症;进一步梳理柴胡疏肝散的现代药理作用。文章指出,古往今来肝郁是影响疾病发生与发展的重要病机之一,柴胡疏肝散是治疗众多身心疾病重要方剂,基于中医整体观念,运用现代科学技术手段,多途径、多层面地解析柴胡疏肝散等经典方药,是实现中医药现代的重要途径之一。     

小鼠高迁移率族蛋白B1启动子的构建与转录活性检测

【目的】构建小鼠高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1 protein,HMGB1)启动子全长序列的荧光素酶报告基因用于药物筛选。【方法】采用PCR技术扩增小鼠HMGB1基因启动子全长序列,用GV238载体构建报告质粒GV238-HMGB1-P-Luc,以pGL3-basic作为阴性对照质粒,与内参质粒pRL共转染Hela细胞,以内毒素(LPS,0.2μg/mL)作为激活剂,以正丁酸钠(SB,10 mmol/L)作为抑制剂,分组处理24 h后检测荧光素酶活性。【结果】经酶切、PCR及测序鉴定证实克隆的HMGB1基因启动子全长2 140 bp,DNA序列正确无突变。与pGL3-basic组比较,GV238-HMGB1-P-Luc组荧光素酶活性显著增强(P0.05);与GV238-HMGB1-P-Luc组比较,LPS组荧光素酶活性显著增强(P0.01);与LPS组比较,SB组荧光素酶活性显著降低(P0.01)。【结论】HMGB1基因启动子报告基因构建成功,LPS可以增强其表达,SB则可以抑制LPS刺激下的HMGB1启动子表达增强,可为下一步筛选具有调控HMGB1启动子活性的药物奠定基础。     

1例拇指多指畸形报告

<正> 女尸,约35岁.右手拇指畸形,远节呈双拇指状,均有指甲,粗细大致相等,近节正常.右拇指的指间关节较健侧膨大.解剖中发现,末节指骨从指骨颈处起分开,形成大致相等的两干.在畸形拇指的背侧,拇长伸肌健在近节指骨头处终于指背腱膜,再由后者分成两股分别终止于末节指骨.在腹侧,拇长屈肌腱亦在近节指骨头处分成两股附着于末节指骨底的掌面;末节指骨底两侧均有膨大骨突.正中神经分支沿拇指两侧上行至末节指端及其相对缘,并有指掌侧固有动脉分支伴行.在臂中部,发现正中神经除由臂丛内、外侧束的外侧头和内侧头组成外,尚有部分肌皮神经纤维穿喙肱肌后发支加入,至臂下部时,纤维就难以分开.剖开腹部,发现内脏亦有肠管的变异(图1).回肠分两管,一管进入盲肠,另一管进人乙状结肠,而盲肠亦分两管,一管进入升结肠,另一管进入乙状结肠,阑尾缺如,升结肠、横结肠、降结肠相对较小但盲肠却很大,有许多粪便.胆囊异常变     

龟板对大鼠局灶性脑缺血模型3种NOS亚型的作用

目的探讨补肾中药龟板对局灶性脑缺血后脑组织3种NOS亚型的作用.方法采用大脑中动脉线栓法造成大鼠局灶性脑缺血模型,应用免疫组织化学技术检测脑组织3种亚型NOS(nNOS、iNOS、eNOS)的表达,观察龟板对脑缺血后3种亚型NOS的作用.结果龟板组缺血侧皮层和尾壳核nNOS、iNOS表达显著低于模型对照组(P<0.01),而eNOS表达显著高于模型对照组(P<0.01).结论中药龟板能部分下调脑缺血所致nNOS、iNOS的异常表达,上调eNOS表达,这可能是其治疗缺血性脑血管疾病的机理之一.     

龟板对脊髓损伤大鼠神经干细胞的作用

为了观察龟板对大鼠脊髓损伤后 nestin表达和后肢功能恢复的影响 ,本实验于手术后 1d、7d、14 d、2 1d、2 8d分别对大鼠进行 Tarlov评分和斜板试验检查后肢功能 ,处死动物后应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞蛋白的表达 ,用图像分析仪进行定量分析 ,观察了龟板对脊髓损伤后神经上皮干细胞蛋白的影响。结果表明 ,脊髓损伤后第 1d,在两组受损伤脊髓灰质中都可见到 nestin的表达 ;第 14 d时达到高峰 ,龟板组为 3 8.2 4± 6.83 ,损伤组为 2 2 .48± 7.83 (P<0 .0 5 )。龟板组可使损伤的脊髓中 nestin持续高表达至术后第 2 8d,而损伤组仅持续高表达至术后 2 1d。增加的 nestin阳性细胞数量与神经功能的改善平行。本研究结果提示 :龟板可减轻神经损伤症状和促进脊髓损伤后神经干细胞的增殖     

壳聚糖-明胶-碱性成纤维细胞生长因子三维大孔支架对骨髓间充质干细胞增殖的影响

背景:干细胞的分化潜能与培养条件有密切关系,改变支架材料的表面特性,三维结构,增加生长因子均可实现对干细胞增殖分化的控制.目的:制备适合骨髓间充质干细胞附着生长的、具有最佳孔隙率和孔隙结构的药物缓释组织工程支架--三维大孔支架,提供能促进多能干细胞生长的微环境.设计:重复测量设计.单位:广州中医药大学基础医学院解剖教研室.材料:实验所用健康成年 SD 大鼠由广州中医药大学实验动物中心提供.壳聚糖、碱性成纤维细胞生长因子购自Sigma公司.方法:实验于2003-03/2006-12主要在广州中医药大学基础医学院解剖教研室完成.采用冷冻干燥的方法,用不同比例的壳聚糖.碱性成纤维细胞生长因子-明胶依次混匀,通过控制冷冻、复温和干燥时间处理使其具有最佳孔隙率和孔结构,制备具缓释碱性成纤维细胞生长因子功能的三维大孔支架.取SD大鼠股骨和胫骨骨髓,分离、培养骨髓间充质干细胞并移植于缓释碱性成纤维细胞生长因子的三维大孔支架上进行三维培养,与无碱性成纤维细胞生长因子的支架对照.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.主要观察指标:用ELISA和扫描电镜观察支架的三维结构和缓释性能,用苏木精-伊红染色、MTT、细胞计数及扫描电镜方法观察缓释碱性成纤维细胞生长因子的三维大孔支架对骨髓间充质干细胞生长状态和细胞活力的影响.结果:含有碱性成纤维细胞生长因子的三维大孔支架有碱性成纤维细胞生长因子缓释性能,孔隙尺寸与不含碱性成纤维细胞生长因子的支架三维结构相比,差异无显著性意义(P＞0.05).含有碱性成纤维细胞生长因子的三维大孔支架能提高在支架上立体培养的骨髓间充质干细胞存活率,促进骨髓间充质干细胞黏附、增殖和活力,与不含碱性成纤维细胞生长因子的支架相比,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:含有碱性成纤维细胞生长因子的三维大孔支架能缓释碱性成纤维细胞生长因子,有利于在支架上立体培养的骨髓间充质干细胞存活,为其在组织工程中的应用打下基础.     

龟板抗Parkinson病大鼠多巴胺能神经元凋亡的作用

为探讨补肾中药龟板抗Parkinson病大鼠模型黑质神经元凋亡的作用,本研究用6-羟基多巴胺(6-OHDA,0.2%)于大鼠左侧黑质致密带注射2μl造成Parkinson病(PD)模型,同时设立龟板组(灌胃补肾中药龟板2g/次,2次/d,连续12周)、模型组和正常对照组,观察其行为改变,再用HE、TH染色或DIG-dUTP染色观察黑质神经元的变化,免疫组化染色检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果显示:龟板组PD大鼠的旋转行为改善明显,黑质致密部的TH染色阳性神经元增多,DIG-dUTP染色阳性率降低,Bcl-2蛋白表达增加和Bax蛋白表达减少。本文结果提示,长期龟板治疗对PD模型大鼠多巴胺能神经元凋亡具有明显的保护作用,且该作用可能与龟板升高Bcl-2和降低Bax的表达有关。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克肾组织诱生型一氧化氮合酶表达的影响

目的　探讨牛珀至宝微丸对内毒素休克肾组织iNOS表达的作用。方法　静脉注射内毒素 (LPS) 1 5mg/kg、腹腔注射D 氨基半乳糖糖 (D Ga1N) 10 0mg/kg造成内毒素休克模型 ,用牛珀至宝微丸干预处理 ,免疫组化方法检测诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)在肾组织内的表达。结果　牛珀至宝微丸可以使肾内iNOS表达减弱 ,肾损伤减轻。结论　牛珀至宝微丸可以减轻内毒素休克造成的肾损伤 ,这种保护作用可能是通过调节肾组织NOS表达而产生的