3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的建立、优化及分子指标鉴定

目的探讨3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)模型建立的条件、优化及分子指标鉴定。方法采用3-异丁基-1-黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,IBMX)、地塞米松(Dexamethason,DEX)和胰岛素联合诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,跟踪观察其诱导分化过程中的形态变化,并采用油红O染色鉴定。采用DEX(1μmol·L~(-1))单独诱导及DEX(1μmol·L~(-1))+罗格列酮(Rosiglitazone,ROS,10μmol·L~(-1))联合诱导建立IR-3T3-L1脂肪细胞。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(Glucose oxidase-peroxidase,GOD-POD)检测不同时间点细胞培养液中葡萄糖含量,确定IR-3T3-L1脂肪细胞模型的最佳诱导时间,考察3T3-L1脂肪细胞模型IR状态的稳定性;采用CCK-8法测定IR-3T3-L1脂肪细胞活性;采用甘油磷酸氧化酶法(glycerol phosphate oxidase,GPO-POD)测定IR-3T3-L1细胞甘油三酯(Triglyceride,TG)含量;采用实时荧光定量PCR(q PCR)和Western Blot法分别检测IR-3T3-L1脂肪细胞的脂联素(Adiponectin,ADPN)及葡萄糖转运蛋白4(Glucose transporter 4,GLUT4)的mRNA、蛋白质表达水平。结果 DEX诱导3T3-L1脂肪细胞96 h,葡萄糖消耗差值比例达最大为46.84%;DEX+ROS诱导72 h,葡萄糖消耗差值比例达最大为22.77%,可作为2种IR模型建立的最佳时间点。与正常组比较,DEX及DEX+ROS诱导建立的2种IR模型葡萄糖消耗量均显著降低(P0.05,P0.01),2种方法建立的IR-3T3-L1细胞模型60 h内均保持稳定;IR模型组细胞活性均无明显变化(P0.05),2种诱导试剂对IR脂肪细胞活性均无明显影响;IR模型组TG含量均显著升高(P0.01),DEX+ROS组TG含量明显高于DEX组;IR模型组ADPN、GLUT4 mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P0.01),且DEX组下调幅度较DEX+ROS组更加明显。结论 DEX单独诱导及DEX+ROS联合诱导2种方法均可建立稳定的IR-3T3-L1细胞模型,DEX诱导IR-3T3-L1细胞模型优于DEX+ROS,其机制可能与GLUT4及ADPN表达显著降低有关。     

检验科在执行ISO15189中的体会

为了标准化、规范化医学实验室的建设,提高检验结果的质量,科室全面执行《医学实验室质量和能力认可准则(ISO15189)》(以下简称《认可》)为依据的《医学实验室认可准则》[1]。本文总结了本院检验科在执行《认可》中对于质量体系的建立,组织实施、内部审核等方面的经验与体会,报道如下。1质量体系的建立1.1学习培训全员培训是其中重要的环节,目的是让全科员工统一思想,认识到《认可》是每个员工都需要参与执行的,     

柯达CR950软件损坏的修复

本文介绍了柯达CR950因软件损坏而造成无法登陆扫描的故障分析及处理过程.     

外固定支架治疗开放性距下关节脱位的临床疗效观察

目的:观察外固定支架治疗开放性距下关节脱位的临床疗效。方法:分析使用外固定支架治疗的8例开放性距下关节脱位患者的临床疗效。结果:8例患者伤口均甲级愈合,未发生皮肤坏死及伤口感染,随访13～63个月,优3例,良3例,可1例,差1例,优良率为75%。结论:外固定支架治疗开放性距下关节脱位是一种固定可靠、疗效确切的方法。     

60例ABO血型正反定型不符的原因分析

目的:探讨ABO血型正反定型不符的原因。方法:对60例ABO正反定型不符的标本分别选用吸收放散试验、直接、间接抗人球蛋白试验以及检测血型物质的试验方法。结果:16例为红细胞抗原减弱,22例抗体减弱,3例骨髓移植,19例冷凝集。结论:ABO正反定型不符时,应根据表现型的具体情况和患者的临床资料设计血清学试验,正确鉴定ABO血型。     

脂血对果糖胺浓度测定的影响

目的:探讨单纯脂血标本对果糖胺测定结果的影响。方法:分别抽取体检者血清发生不同程度脂血的血液标本,测定血清果糖胺的含量,高速离心分离出血脂层后再测定一次,比较差异。结果:轻度溶血组和中度溶血组与正常对照组果糖胺含量相比,差异无统计学意义(P>0.05);严重溶血标本的果糖胺含量明显高于未溶血前,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:严重脂血可对果糖胺的测定结果产生显著性的影响。     

全血标本放置时间对血氨检测的影响

目的:应用干化学法探讨及分析全血标本放置时间对血氨测定的影响程度。方法:留取临床血氨标本46份,在室温下将该样本放置一定时间,使用干化学法测定不同时间段内血液中氨的含量,把各时间测定所得的数值与即时测定值比较。结果:全血标本采集后放置时间超过半小时以上,测定出的数据有所偏高,有统计学意义(P<0.01)。结论:标本放置时间对血氨检测分析有影响,尤其放置时间在30分钟以上,测定结果增高,在一定时间内,时间越长,数值越大。     

溶血对果糖胺测定的影响分析

目的:探讨不同程度溶血标本对果糖胺含量测定的影响。方法:选择216例体检正常人血标本,采用罗氏全自动生化分析仪测定溶血前和不同程度溶血后的血清果糖胺含量。结果:轻度溶血组和中度溶血组与正常对照组果糖胺含量相比,差异无统计学意义(P>0.05);严重溶血标本的果糖胺含量明显高于未溶血前,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:严重溶血标本对果糖胺的检测有影响。     

Elekta Precise医用电子直线加速器维修四例

本文介绍Elekta Precise医用电子直线加速器四例故障分析及处理过程,供临床工程师参考。     

探讨溶血对血清胰岛素水平检测的影响

目的:探讨不同程度溶血对血清胰岛素水平检测的影响。方法:选取体检健康成年人血标本30例,测定其溶血前后血清胰岛素水平,并进行对比分析。结果:各组未溶血前检测结果与溶血后的轻、中、重度溶血组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:溶血对血清胰岛素水平检测有显著的影响,应尽量避免溶血标本的送检。