灯盏细辛注射液对急性脑梗死患者血清粘附分子sICAM-1和CD11b/CD18的影响

目的 观察灯盏细辛注射液对急性脑梗死(acute cerebral infaction,ACI)患者的临床疗效及对血清粘附分子sICAM-1和CD11b/CD18表达的对影响.方法 69例ACI患者随机分为灯盏细辛治疗组(36例)和常规治疗组(33例),采用双抗体夹心ELISA法、流式细胞仪(FCM)检测两组ACI患者治疗前后血清粘附分子sICAM-1和CD11b/CD18表达的水平.结果 ACI患者治疗前血清粘附分子sICAM-1和CD11b/CD18的表达水平显著高于健康人组(p＜0.05),灯盏细辛治疗组临床有效率明显高于常规治疗组(P＜0.05),两组治疗后血清粘附分子sICAM-1和CD11b/CD18的表达均明显下降,灯盏细辛治疗组降低较常规治疗组更明显(p＜0.05).结论 灯盏细辛注射液治疗ACI可能与其下调血清粘附分子sICAM-1和CD11b/CD18的表达,减轻中枢神经系统的炎性损伤密切相关.     

Cripto-1基因沉默对人肝癌MHCC-97H细胞侵袭、迁移能力的影响

 目的: 探讨Cripto-1蛋白在人肝癌组织和肝癌细胞系中的表达,研究沉默Cripto-1基因后对肝癌细胞MHCC-97H侵袭和迁移能力的影响及可能的机制。方法: 采用Western blot检测11对肝癌组织及相应的癌旁组织和不同肝癌细胞株中Cripto-1蛋白的表达;收集80例肝癌石蜡标本,免疫组织化学方法检测Cripto-1蛋白的表达情况;Cripto-1 siRNA转染肝癌细胞MHCC-97H细胞后,real-time PCR和Western blot分别检测转染效率;Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot分别检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白的表达。结果: Western blot检测结果显示肝癌组织中Cripto-1蛋白的表达明显高于对应的癌旁组织,Cripto-1蛋白在各肝癌细胞系中均有表达,且表达量高于对照细胞,其中高侵袭性肝癌细胞MHCC-97H表达量最高;免疫组织化学结果显示Cripto-1蛋白在88.7%的肝癌组织中表达;Cripto-1 siRNA转染MHCC-97H细胞后能显著降低Cripto-1 mRNA和蛋白的表达水平,并且能降低其侵袭和迁移能力;Western blot结果表明,Cripto-1基因沉默后能抑制MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结论: Cripto-1在肝细胞癌中的高表达可能与肝癌的发生发展密切相关,下调Cripto-1的表达可以抑制肝癌细胞侵袭和迁移能力,其机制可能与下调MMP-2、MMP-9的表达有关。     

Survivin反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞凋亡的诱导效应

目的：利用骨肉瘤OS-732细胞，探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对survivin基因表达的影响及其诱导肿瘤细胞凋亡的效应。 方法: 设计合成特异性靶向survivin的ASODN，以不同浓度和时间对OS-732细胞进行转染，并设空白、正义（SODN）对照组进行比较。采用RT-PCR、Western blotting、免疫细胞化学技术检测各组OS-732细胞中survivin mRNA、蛋白表达状态，吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡水平和形态变化，MTT法检测细胞生长抑制情况，激酶活性测定法检测细胞中caspase-3活性程度。 结果: 转染ASODN各组OS-732细胞survivin mRNA和蛋白表达均明显弱于空白对照组、SODN组；细胞凋亡率（AI）显著增加，细胞生长相应受抑，caspase-3活性显著提高；上述效应在ASODN各组存在一定的时间浓度依赖性；而SODN各组与空白对照组间各项指标均无明显差异。 结论: ASODN能够特异性下调OS-732细胞中survivin基因表达，激活凋亡效应蛋白酶caspase-3，在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖中发挥重要作用。     

凹槽交锁髓内钉治疗开放性胫骨骨折

目的评价凹槽交锁髓内钉治疗开放性胫骨骨折的疗效.方法应用德国aap公司Birigid非扩髓凹槽交锁髓内钉治疗57例开放性胫骨骨折.髓内钉直径平均7.8mm.结果所有患者得到4～22个月随访.骨折平均愈合时间28周.1例Ⅲa型伤口感染,2例Ⅲ型骨折延迟愈合,经改动力化后获得骨性愈合,无断钉发生,无骨不连.结论Biorigid凹槽交锁髓内钉治疗胫骨开放性骨折,只要严格掌握手术时机,彻底清创,具有操作简单,创伤小,适应症范围广,术后早期活动,骨折愈合率高,感染率低以及不扩髓等优点.     

腰椎管狭窄症中脊髓降钙素基因相关肽的表达

背景:降钙素基因相关肽是神经元细胞合成并分泌的感觉神经递质,由轴浆转运或血液到达靶器官,通过影响靶器官的功能以发挥激素样作用。其表达变化与腰腿痛密切相关。目的:观察腰椎管狭窄时脊髓内降钙素基因相关肽的变化。设计:随机对照动物实验。单位:中国医科大学附属第一医院骨科。材料:实验于2003-01/2004-12在中国医科大学完成。选择成年雄性SD大鼠30只,按照取材时间(2,4,8,12周)的不同分为4组,另有1组对照组。每组6只。方法:制备腰椎管狭窄模型,并采用免疫组化方法检测不同时间压迫(2,4,8,12周)后,脊髓后角降钙素基因相关肽的表达。光镜下以神经元细胞核蓝色着色,细胞浆出现棕褐色颗粒定为免疫组化染色阳性。每例切片在脊髓横断面随机选取5个高倍视野,计数阳性细胞数,主要观察指标:脊髓后角中降钙素基因相关肽的表达。结果:30只动物实验过程中无死亡,全部进入结果分析。随着马尾神经受压时间的延长,脊髓后角降钙素基因相关肽的含量有不同程度的增加,手术后2,4,8,12周后脊髓后角降钙素基因相关肽阳性细胞数目依次为(1.02±0.15),(4.28±0.22),(2.11±0.21),(3.03±0.25),均显著高于对照组(0.66±0.12),差异有显著性(t=2.01-5.56,P<0.05)。结论:腰椎管狭窄症中马尾神经受压后,脊髓降钙素基因相关肽的表达增高。     

人工骨填充椎体成形术结合椎弓根螺钉内固定治疗胸腰椎压缩性骨折

椎弓根螺钉内固定是治疗胸腰椎骨折的常用手术方式,但存在一定的内固定失败率。自2003年以来,我们采用椎弓根螺钉内固定系统结合人工骨椎体成形术治疗胸腰椎压缩性骨折45例,取得了良好效果,现总结报告如下。     

联合应用rhBMP-2与bFGF对兔骨髓基质细胞表达VEGF及其成骨潜能的影响

目的：观察兔骨髓基质细胞经rhBMP-2与bFGF刺激后,其VEGF因子表达及成骨潜能的变化。方法：取兔双侧股骨骨髓基质细胞,采用骨髓基质细胞体外培养技术,单独或联合以rhBMP-2、bFGF刺激细胞。细胞培养5d后,进行细胞形态（HE染色）、增殖情况（细胞记数法与MTT法）、碱性磷酸酶（改良钙钴法染色）、成骨结节（图像分析）、VEGF阳性细胞率（免疫组化染色）等项目的检测。结果：①联合应用rhBMP-2、bFGF在细胞记数、ALP活性、矿化面积百分率、VEGF阳性细胞率4个检测项目上优于单独应用rhBMP-2或bFGF,差别有统计学意义。②分开联合应用rhBMP-2、bFGF优于同时应用rhBMP-2或bFGF。结论：合理的联合使用rhBMP-2和bFGE,不仅可促进骨髓基质细胞的快速增殖及向成骨细胞转化,还可促进促血管内皮细胞增生的重要介质VEGF的表达。此项技术可应用于骨组织工程,促进工程化骨在体内的存活。     

类鼻疽伯克霍尔德菌感染的临床特点与耐药性分析

目的了解我院类鼻疽病的临床特征,探讨早期诊断治疗及该菌的耐药性分析;统计近6年类鼻疽病病死率,并且了解实验室对该菌的细菌学鉴定和药敏试验方法。方法采用回顾性2003年4月~2010年4月期间收治的43例类鼻疽病感染者的临床症状以及治疗、愈后及半年后进行电话随访统计;结果患者起病时多以带有基础疾病时起病或是农作时外伤引起,临床症状多以畏寒、高热、肺部感染、败血症以及脏器损害和细菌毒素引起的全身反应为主要表现,病情较为严重,药敏结果类鼻疽伯霍尔德杆菌对亚胺培南敏感率达100%,对美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦敏感率达80%以上,对头孢他啶敏感率为66.7%,而对广谱青霉素类、氨基糖苷类耐药,对头孢类有不同程度的耐药。结论该病临床特征多样,首诊困难,误诊率高,广谱抗生素治疗无效,易延误病情,住院时间长,治疗成本高,应提高临床医生对此病的认识和警惕以尽快确诊。目前认为碳青霉烯类为首选抗生素,临床用药应为以碳青霉烯类为主的两种抗生素以上联合用药效果好。     

荧光定量PCR仪检测乙型肝炎病毒核酸的性能验证及评价

目的荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪检测乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的性能验证及评价。方法参考ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则(2012年)》,以及美国临床和实验室标准化协会(CLSL)EP系列文件的相关要求对实验室HBV DNA荧光定量PCR检测系统的精密度、正确度、可报告范围、抗干扰能力进行验证及评价。结果精密度:HBV DNA定量检测高浓度(106 IU/mL)和低浓度(103 IU/mL)标本的对数值批内变异系数分别为0.67%和3.65%,批间变异系数分别为1.72%和4.52%;正确度:标准物质标本检测结果的对数值与厂商给定靶值浓度的对数值差值在±0.4个Log值内;可报告范围:试验试剂在(2.22×10)～(2.22×108)IU/mL范围内具有良好的线性,线性回归方程为Y=1.027 X-0.408,R2=0.995,≥0.95;抗干扰能力:说明书浓度的干扰物质(血红蛋白、三酰甘油、胆红素)标本结果与不含干扰物质标本比较,其浓度的对数值偏倚CV7.5%,对数值差值在±0.4个Log值内。结论荧光定量PCR仪检测HBV DNA试剂的各项性能特征与厂家声明相符,满足预期用途,适用于临床常规检测。     

Effect of electro-acupuncture combined with early rehabilitation on motor function and expressions of CD11b/CD18 and tumor necrosis factor-α in patients with acute cerebral infarction

Objective To observe the effect of electro-acupuncture combined with early rehabilitation on the motor function and expressions of the adhesion molecules CD11b and CD18 in the polymorphonuclear leucocytes (PMN) and monocytes and serum tumor necrosis factor-α (TNF-α) levels in patients with acute cerebral infarction (ACI). Methods A total of 165 ACI patients were randomly divided into control group (group A, n=50), conventional rehabilitation group (group B, n=50) and comprehensive rehabilitation group (group C, n=65). The expressions of CD11b and CD18 in the PMN and monocytes and serum TNF-α levels were determined before and at 1, 2, and 4 weeks after the treatment. Thirty-two healthy subjects were also recruited as the normal control group (group N). The neurological function of the subjects was evaluated by modified Edinburgh-Scandinavia stroke scale (MESSS) and Fugi-Meyer Assessment (FMA), and their activity of daily living (ADL) was assessed using Barthel index (BI). Results The CD11b/CD18 expression in the PMN and MN and serum TNF-α level in groups A, B and C were significantly higher than those in group N before and 1 week after the treatment (P<0.05). CD11b/CD18 expression and serum TNF-α level were significantly lower in groups B and C than in the group A at 1 week after the treatment, and significantly lower in group C than in group B (P<0.05). At 2 weeks of treatment, CD11b/CD18 and TNF-α were significantly lower in groups B and C than in the group A, being the lowest in group C (P<0.05). The scores of mESSS in both groups B and C were lower than that in group A, and the scores were lower in group C than in group B. Group C showed higher FMA scores than group B, both having higher scores than group A. At 4 weeks of treatment, the mESSS scores were significantly lower, hut the FMA and ADL score significantly higher in groups B and C than in the control group (P<0.05), and the differences were more obvious in group C. Groups B and C had greater effective rate than group A (P<0.05), and the rate was the highest in group C (P<0.05). Conclusion Electro-acupuncture combined with early rehabilitation promotes the recovery of motor function in ACI patients probably by regulating the expressions of the adhesion molecules CD11b and CD18 on the PMN and monocytes and the serum levels of TNF-α.