甘草酸对人肺癌细胞增殖和侵袭抑制作用的机制探讨

目的　探讨甘草酸对高转移人肺癌细胞 (PGCL3)增殖抑制、抗侵袭和诱导凋亡的作用 ,并探讨其抗增殖和侵袭作用的机制 .方法　用 0 .5mmol/L和 1.0mmol/L甘草酸处理PGCL3细胞 96h ,进行细胞增殖抑制试验、软琼脂集落形成试验、侵袭、粘附和运动试验 ,以及组织蛋白酶B活性的测定 ,观察药物对PGCL3细胞增殖和侵袭能力的影响 .上述两浓度处理细胞 4 8h ,用吖啶橙 -溴化乙锭荧光双染法和末端脱氧核苷酸转移酶标记法 (TUNEL法 )检测细胞凋亡 .结果　甘草酸使PGCL3细胞增殖抑制率升高 (p <0 .0 5和p <0 .0 1)和软琼脂集落形成率显著下降(p <0 .0 1) ,呈剂量依赖性 ,半增殖抑制浓度 (IC50 )为 1.8mmol/L ;甘草酸明显减弱细胞侵袭能力 (p <0 .0 1) ,涉及侵袭关键环节的细胞粘附、运动和组织蛋白酶B分泌均受明显抑制 (p <0 .0 5和p <0 .0 1) ;甘草酸还使细胞凋亡率显著升高 (p<0 .0 1) .结论　甘草酸具有抑制PGCL3人肺癌细胞增殖和侵袭作用 .其抑制增殖的机制是通过对细胞分化和凋亡的诱导作用 ;其抗侵袭机制是对侵袭的多个基本环节起抑制作用 .     

灵敏快速检测甲胎蛋白的新方法——酶标醋纤膜对流参比电泳测定法

本文报导我们创立的血清AFP测定法。这种新方法主要操作步骤如下:待测血清、标准AFP和过氧化物酶标记的抗AFP抗体加至醋纤膜上;经对流电泳迅速形成沉淀线,经浸洗后,用酶促反应显示沉淀线。沉淀线的特点与AFP含量有一定关系,可据此判断AFP含量。本法灵敏、特异、简便、快速,具有一般设备的实验室均可进行此项测定。本法检出水平达30～50ng/ml,灵敏度大大超过常规琼脂对流电泳法,与放射火箭电泳法的灵敏度相近。本法与放射免疫测定法和放射火箭电泳法测定结果基本一致。类风湿因子不干扰本测定,特异性优于EL1SA法。     

灵敏准确的甲胎蛋白定量新方法—酶联火箭电泳测定法

本研究创立一种灵敏、准确的甲胎蛋白定量方法酶联火箭电泳测定法。此法是将辣根过氧化物酶标记的抗甲胎蛋白抗体混合于琼脂糖凝胶中进行火箭电泳,免疫沉淀线具有酶活性,经与 H_2O_2和3-氨基-9-乙基卡巴唑保温,借酶促反应使沉淀线出现强烈的有色沉淀而被清楚显示出来。这种新方法可对甲胎蛋白作出灵敏、快速而精确的定量。本法甲胎蛋白定量的下限为5～10ng/ml,灵敏度比火箭电泳法高100倍,比放射火箭电泳法高2～5倍。其甲胎蛋白测定范围为10～3000ng/ml,宽于放射火箭电泳法(25～800ng/ml)和放射免疫测定法(RIA)(0～400ng/ml)。本法准确度与RIA 一致。组内变异系数为2.4%,组间变异系数为3.1%,而 RIA 法为17.4%。     

硒、维生素A和视黄酸抗苯并(α)芘诱发BALB/3T3细胞DNA非程序合成的研究

本研究以3H－TdR掺入14C－TdR预标记的经同步化培养的BALB／3T3细胞，测定DNA非程序合成（UDS）的变化。结果发现一定浓度的硒、维生素A和视黄酸都对1μg／ml苯并（α）芘（BαP）诱发的UDS有显著的抑制作用（P<0．05－0．001）。这揭示它们均能阻止化学致癌物BαP对DNA的攻击，并存在剂量一效应关系。加致癌物前24小时加入硒、维生素A或视黄酸，则抑制作用更强（P<0．01－0．001）。当硒、维生素A和视黄酸两两联合作用时，抑制效果均比单独使用时明显增强（P<0．05－0．001），表明它们两两之间有协同保护DNA的作用。     

凝血酶底物发色肽的化学合成

本文报道了凝血酶废物发色肽苯甲酰苯丙氨酰缬氨酰精氨酰对硝基苯胺（Bz－Phe－Val－Ars－PNA）的人工合成．本法是根据液相合成法的原理和操作，用碳二亚胺作为肽键合成的激活剂，由作者设计其合成的技术线路和总流程。合成产品经红外光谱、紫外光谱鉴定，与标准品具有同样特征的吸收光谱，并从酶促水解反应，410nm波长处吸光度的增加，证明该产品与标准品一样，其精氨酸羧基的肽键被凝血酶水解释出黄色产物。     

生物化学实验课改革探讨

生物化学是高等医李院校重要的医学基础课。实验课占总教学时数的1／3。我们根据多年的教学实践经验,对生物化学实验课进行改革尝试,取得预期效果,为机能学科实验教学改革积累了宝贵的经验。     

血清唾液酸检测对癌症诊断的临床价值

作者测定了５７７例正常人和２４１例恶性肿瘤患者血清总唾液酸（ＴＳＡ）和血清脂质结合唾液酸（ＬＳＡ）的含量。结果表明：ＴＳＡ和ＬＳＡ的含量变化与疗效一致，治疗有效者ＴＳＡ和ＬＳＡ与正常人相比，均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；治疗无效（包括未经治疗）者与正常人相比除原发性肝癌、乳腺癌外均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。血清ＴＳＡ和ＬＳＡ测定对肺癌、胃癌、大肠癌等有临床诊断价值（Ｐ＜０．０１），对鼻咽癌诊断效果更好（Ｐ＜０．００１）。对肝癌、乳腺癌的诊断价值有限（Ｐ＞０．０５）。恶性肿瘤患者ＴＳＡ与ＬＳＡ含量间无相关关系（ｒ＝０．０９；Ｐ＞０．０５；ｎ＝１１７）。ＬＳＡ检测不能代替ＴＳＡ检测，两者应该联合检测以提高其阳性率。     

丁酸钠诱导高转移人肺癌细胞恶性表型逆转和抑制侵袭作用的研究

 本文作者选用丁酸钠处理克隆化高转移人肺巨细胞癌（PGCL3）细胞，发现肿瘤细胞在形态、增殖速度、分裂指数、软琼脂集落形成能力和凝集反应等方面均出现向正常细胞表型逆转，证明丁酸钠具有抑制PGCL3细胞增殖及诱导分化的作用。我们还进行了反映肿瘤细胞浸润和转移能力的粘附、运动和降解侵袭实验，结果显示丁酸钠对PGCL3细胞的上述三种能力都有明显的抑制作用，表明丁酸钠在诱导PGCL3细胞向成熟方向分化的同时，还使PGCL3细胞的侵袭能力减弱。     

异常凝血酶原新测定法及其与AFP联检在原发性肝癌诊断中的意义

用新建立的血清直接测定法测定８０例正常人，７８例原发性肝癌病人，８４例肝炎、肝硬化病人以及２２例转移性肝癌病人血清的异常凝血酶原含量，取其正常参考值高限为９．４０ＩＵ／ｍｌ，原发性肝癌的阳性率为６１．５４％，肝炎、肝硬化的阳性率为２３．８１％，转移性肝癌的阳性率为１３．６４％，原发性肝癌的阳性率显著高于其他两组（Ｐ＜０．００１），证明血清异常凝血酶原含量可作为原发性肝癌诊断的一项指标。将异常凝血酶原与ＡＦＰ两项指标平行联合检测，使原发性肝癌的阳性率由单项检测的６１．５４％和６７．９５％提高到８４．６２％，两项指标串联联合测定，则对原发性肝癌诊断的特异性，由单项检测的７６．１９％和８４．５２％提高至９７．６２％。     

不饱和脂酸及其硒化物对BEL-7402人肝癌细胞的杀伤作用及DNA合成的影响

研究了亚麻酸、亚油酸、油酸及其硒化物对人肝癌细胞杀伤作用及对ＤＮＡ合成的影响。结果表明，三种脂酸及其硒化物对ＢＥＬ－７４０２人肝癌细胞均有杀伤作用，其中以硒化亚麻酸杀伤作用最强，５００μｇ／ｍｌ即可杀灭全部肝癌细胞，且具剂量效应关系。其次是亚麻酸、亚油酸和硒化亚油酸。油酸和硒化油酸杀伤作用较弱。１５０μｇ／ｍｌ的亚麻酸、亚油酸及其硒化物和硒化油酸对肝癌细胞的ＤＮＡ合成均有明显抑制作用（Ｐ＜０．０１），其中以硒化亚麻酸抑制作用最强（Ｐ＜０．０５～０．０１），且具有剂量效应关系。亚麻酸、亚油酸对ＤＮＡ合成的抑制作用与相应的硒化物之间无明显差异（Ｐ＞０．０５），而只含一个双键的油酸对ＤＮＡ合成无明显抑制作用，其硒化物则有显著抑制作用，两者的差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。