RNAi沉默人端粒酶逆转录酶对HeLa细胞生长及药物敏感性影响的研究

目的:探讨利用短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)的表达后对人宫颈癌HeLa细胞生长及药物敏感性的影响.方法:将构建的hTERT-shRNA真核表达载体用脂质体转染入HeLa细胞中,经G418筛选得到稳定转染的细胞株,并绘制细胞生长曲线.RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测hTERT、c-myc mRNA和蛋白表达.镜下观察干扰组细胞与对照组细胞对化疗药物的反应,并在紫杉醇给药后采用流式细胞术和细胞免疫化学的方法分别检测两组细胞的死亡率和细胞内微管组织状态.结果:干扰组细胞在6代以后hTERT的mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照组,P<0.05,n=3,而c-myc的表达以及细胞的生长速度与对照组差异无统计学意义,P>0.05, n=3.干扰组细胞对化疗药物紫杉醇的反应明显不同于对照组,紫杉醇给药后干扰组细胞的死亡率(9.7%)高于对照组细胞(6.4%),但给药前后两组细胞内微管的分布差异无统计学意义,P>0.05, n=3.结论:单独下调HeLa细胞中hTERT的表达不能降低肿瘤细胞的生长速度,也不能显著改变c-myc的表达,却可以增加细胞对紫杉醇的敏感性,而hTERT是否参与微管的调节有待进一步探讨.     

临床免疫学和免疫检验实验教学资源网站的建设与应用

临床免疫学和免疫检验是重要的医学检验基础课程，建设临床免疫学和免疫检验教学资源网站，对提高检验医学教学的质量、提高学生学习的兴趣将有重要的作用。通过网络和多媒体的特性使实验教学更灵活、主动，从而提高实验教学的效率和质量。本文介绍临床免疫学和免疫检验教学资源网站的建设过程中的主要内容及其在实验教学中的应用。     

微波消融联合麦默通微创旋切术对乳腺良性肿瘤患者的临床疗效

目的 观察微波消融术和麦默通微创旋切术对乳腺肿瘤患者的临床疗效。方法 收纳2018年3月～2021年3月于本院治疗的76例乳腺良性肿瘤患者资料,根据治疗方案将患者分为对照组和观察组。对照组(39例)给予麦默通微创旋切治疗手术,观察组(37例)给予微波消融治疗手术。对比两组治疗效果。结果 对照组手术时间显著高于观察组,术中出血量多于观察组(P<0.05);术后3个月,观察组肿物残留率明显低于对照组(P<0.05);对照组和观察组的乳房美观优良率分别为79.49%、94.60%,两组差异(P<0.05);对照组不良反应发生率28.20%,观察组5.40%(P<0.05)。结论 微波消融术治疗乳腺良性肿瘤术后肿瘤残留率较少,能缩短手术所需时间、减少术中出血量和不良反应,可保持良好的乳房美观度。     

内镜下高频电摘治疗32例结直肠大息肉分析

目的：探讨内镜下高频电治疗结直肠大息肉（直径≥2cm)的疗效及安全性。方法：术前一天常规服用电解质溶液清洁肠道，手术采用结肠镜下直接分块套切除（有蒂息肉）或先用内镜注射针在息肉基底部粘膜下注射肾上腺素溶液（1：10000），使局部粘膜肿胀，降起后，再将息肉分块切除（无蒂息肉）。结果：共治疗息肉32例，息肉直径2.0-4.5cm，17例有蒂息肉，5例亚蒂息肉及6例无蒂息肉除手术均一次性分数切除。另有4例无蒂息肉除手术分二次完成，前后间隔二周。所有患均无出血及穿孔等并发症发生。术后病理示管状腺瘤13例，绒毛状腺瘤11例，绒毛管状腺瘤5例，管状腺瘤合并早癌2例，绒毛管状腺瘤合并早癌1例。3例合并早癌的息肉基底部均未发现癌细胞，故未侵犯粘膜下，得到根治。结论：内镜下高频电治疗结直肠大息肉简便，安全，有效。     

端粒酶锤头状核酶抑制肺癌细胞端粒酶活性及细胞增殖的实验研究

目的:探讨端粒酶特异性核酶对A549肺癌细胞端粒酶活性、增殖和凋亡的影响。方法:构建人端粒酶锤头状核酶真核表达质粒,稳定转染人A549肺癌细胞株。RT-PCR法检测核酶的表达以及hTERT mRNA、hTR的含量,TRAP法测定细胞端粒酶活性,MTT法、流式细胞仪等测定细胞增殖及凋亡。结果:稳定转染核酶重组体的细胞克隆,均可以检测到核酶的表达,端粒酶活性被抑制,clonehTERT1～6和clonehTR(1、3、5)的平均端粒酶活性分别是空白对照组的(27±18)%和(36±13)%,P值分别为0.000和0.013;clonehTERT1～6hTERT mRNA及clonehTR1～6hTR含量下降,分别是空白对照组的(30±19)%和(49±17)%,P值分别为0.000和0.001;clonehTERT1、clonehTR3生长较空白对照组及阴性对照组减缓,凋亡率增加;而clonehTERT1又较clonehTR3生长慢,凋亡率高(凋亡率分别为21.5%和16.1%)。结论:端粒酶特异性核酶能明显抑制端粒酶活性和细胞增殖,促进细胞凋亡;端粒酶hTERT mR-NA可能是比端粒酶RNA更为理想的端粒酶抑制剂的靶点。     

SDF-1/CXCR4对结直肠癌肝转移瘤表达乙酰肝素酶的影响

目的研究基质细胞衍生因子1（stromal cell derived factor-1,SDF-1）对高表达趋化因子受体CXCR4的结直肠癌Lovo细胞表达乙酰肝素酶（heparanase, HPA）的影响,并探讨 SDF-1/CXCR4轴对裸鼠结直肠癌肝转移瘤模型中乙酰肝素酶表达的影响。方法分别用SDF-1和SDF-1/CXCR4的拮抗剂AMD3100处理直肠癌 Lovo细胞,运用RT-PCR和免疫细胞化学技术检测结直肠癌细胞HPA 的表达;建立裸鼠结直肠癌肝转移瘤模型,检测AMD3100干预和非干预组转移瘤细胞中HPA 蛋白的表达。结果（1）结直肠癌Lovo细胞经不同浓度（50 ng/ml、100 ng/ml、200 ng/ml ）SDF-1处理后,HPA mRNA的表达量逐渐增高。用相同浓度SDF-1分别处理直肠癌Lovo细胞12h和24h后,其HPA的表达量随作用时间的延长而增高。在相同作用时间内,其HPA的表达量随SDF-1作用浓度（50 ng/ml、100 ng/ml 、200 ng/ml）的升高而增高。（2）SDF-1处理组HPA 的mRNA和蛋白表达水平均高于SDF-1+AMD3100处理组和对照组。（3）肝脏转移瘤中HPA的表达量随AMD3100治疗剂量的增高而降低。结论（1）SDF-1可刺激结直肠癌Lovo细胞HPA表达增加,并且这一效应与SDF-1的浓度和作用时间有关。（2）AMD3100能有效抑制SDF-1刺激结直肠癌细胞表达HPA,使得肿瘤细胞侵袭能力下降,从而起到抑制肿瘤转移的作用。     

高校实验教学体系之三要素及立体化管理模式探讨

教学实验室、实验技术人员团队,实验教师团队是完成实践型教学的三大基本要素。本研究从分子医学实验平台的综合型网络化管理体系建设;一专多能、点面结合的技术人员团队和实验技术系统建设;因地制宜、灵活多样的组合型教师团队建设,构建一个三者之间既各成体系又有机组合的立体化管理模式,以其形成高质高效运作的实验教学系统,同时为学生探索性实验、学生科研活动以及实验设施的开放使用等提供一个便捷实用、渠道通畅的实验空间,最终目标是使实践学教学的整体水平达到一个新的层次。     

布地奈德与强的松治疗活动性克隆病的疗效对比

作者比较布地奈德 (Ｂｕｄｅｓｏｎｉｄｅ)和强的松(Ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ)治疗病变累及末端回肠和 /或结肠的活动性克隆病的疗效及安全性。病人和方法　患者均为原患克隆病而今又加重者 ,或为新近诊断且疾病活动性持续至少3个月以上者。入选标准为克隆病活动指数(ＣＤＡＩ)在 1 5 0～ 3 5 0之间。病变累及上段小肠或有狭窄症状需行手术以及需胃肠外营养或有肝、肾疾病的患者均除外 ,参加本研究前 3个月停服氨基水杨酸类和甲硝唑免疫抑制剂或类固醇。研究采用随机、双盲、双虚拟方法进行 ,治疗时间 8周。①布地奈德治疗组患者餐前半小时服用…