不同冷冻载体对小鼠卵巢组织玻璃化冻存的影响

目的研究不同冷冻载体对小鼠卵巢组织玻璃化冻存的影响.方法将9～12周龄小鼠的卵巢组织取出,在冷冻液中平衡后,分别以闭合麦管、开放麦管与冷冻环为冷冻载体快速深低温冻存,解冻后行自体双肾被膜下移植,观察动情周期、移植21 d后取存活移植物固定,观察单位高倍视野下卵泡数、测定小鼠血清雌激素水平,对比冻存效果.结果移植后各组均有移植物存活,移植物内可见各级处于不同发育阶段的卵泡.闭合麦管、开放麦管与冷冻环组的移植物存活率分别为78.5%、78.5%、84.6%;单位高倍镜下的卵泡数分别为4.0±0.8、4.5±0.7、4.6±0.9;小鼠血清雌激素水平分别为（10.4±0.8）pg/mL、（11.0±1.6）pg/mL、（12.5±1.1）pg/mL.其中,冷冻环组在移植物存活率及小鼠血清雌激素水平与闭合麦管组相比存在显著性差异.结论采用冷冻环做载体能明显提高冻融移植后卵巢组织的存活率与雌激素分泌功能,明显提高对小鼠卵巢组织的保存效果.     

荧光原位杂交试剂用于诊断自然流产绒毛染色体异常的价值

目的：探讨早期孕妇中自然流产绒毛组织细胞中染色体异常发生率,建立标准的标本的处理以及FISH（fluorescence insitu hybridization）的操作方法为完善产前诊断与遗传咨询指南提供理论依据.方法：取材100例自然流产绒毛组织利用FISH技术检测13、21、16、22、18、X、Y染色体数目异常,随机选30例结合传统的细胞学检查实验准确性.结果：FISH的阳性结果中30例常染色体异常,其中以三体23例,三倍体6例,16号染色体9例,22号染色体6例,与传统细胞学检测结果一致.结论：染色体荧光原位杂交（FISH）探针具有较高的细胞遗传学的检测效率与核型分析相结合用于染色体数目异常的诊断可靠.     

环孢素A对围着床胚胎的作用及在不明原因反复着床失败中的应用探索

体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)中胚胎可能着床失败,但反复着床失败(recurrent implantation failure,RIF)特别是原因不明会给医生和患者带来极大的困扰.RIF只是一种对治疗经历的描述,作为诊断,目前尚未...     

保存精液标本作为预防辅助生殖技术中亲子血缘纠纷证据的探讨

辅助生殖技术(ART)中亲子血缘纠纷是医患双方极为关注的问题.亲子血缘纠纷可产生于两个环节:治疗程序中精子、卵子和母亲间的错配;患者隐瞒提供非配偶精子.     

培养农村社区全科医生教学方法的探索：以问题为基础的教学法的 …

对比分析了教学基础本文，对经分析了社区医学实验班、传统班和普通班８门基础医学课程的期终理论考试成绩。结果发现，经ＰＢＬ训练的社区医学实验班学生的考试成绩明显高于未经ＰＢＬ训练的其他班学生，大部分课程有显著性差异，ＰＢＬ训练时间越长差异显著性越明显。结果表明，ＰＢＬ训练对强化学生学习基础医学知识以及学过的知识融会贯通、举地反三加深理解均有良好的作用，ＰＢＬ训练可显著学生的考试成绩。     

母乳喂养的新生儿体温分析

本文研究了不同气候条件下母乳喂养新生儿的发热情况，研究组中，夏季（Ａ组）日平均体温为３６．６８±０．２２℃，稍高于各混合喂养对照组（Ｐ〈０．０５）。Ａ、Ｂ（秋季）各且５日内的总发热率分别为３９．６５％、１５％和１０．７％明显高于各自的对照组。其中，Ａ组发热率明显高于Ｂ和Ｃ组（Ｐ〈０．０１）。新生儿发热多于出生２４ｈ后出现，出生后３天达最高峰，５天降至较低水平。新生儿出生体重越重热率越高。体重≥３５     

AMH在PCOS患者中评估卵巢储备及诊断价值

近年研究发现血清抗苗勒管激素(AMH)水平作为评估卵巢储备能力及辅助生殖技术(ART结局的指标已显示出其优越性,且AMH与多囊卵巢综合征(PCOS)的关系引起了学者们的关注。PCOS患者的卵巢储备异于同年龄非PCOS者,其实际年龄不等同于卵巢生育年龄,存在生育年龄后移情况,且在卵巢储备方面优于同年龄非PCOS者。AMH在PCOS患者的表达及变化有其特殊性,其在PCOS患者中异常升高,且随着年龄的下降速率较同年龄妇女更快。AMH水平与PCOS患者的基础窦卵泡数(AFC)及控制性超促排卵(COS)过程中的获卵数呈正相关,但与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的相关性存在争议。AMH对PCOS的诊断效能良好,但因AMH的升高与PCOS患者的具体表型及种族差异有关,故其截断值波动范围较大,目前尚无统一定论。     

三种不同饲养层上人胚胎干细胞生长状态的比较

背景:人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性.以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞作为饲养层尽管能够维持胚胎干细胞的未分化状态,但存在细胞克隆不饱满、平铺情况明显等问题.目的:制备小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合饲养层,观察人胚胎干细胞在其上面的生长状态.设计:多样本观察比较.单位:海南医学院附属医院生殖医学中心.材料:实验于2006-04/2007-07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成.包皮来自于行包皮环切的儿童,由海南医学院附属医院泌尿外科提供,儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书,实验经医院医学伦理委员会批准.人胚胎干细胞系HN-1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定.清洁级孕12.5～14.5 d的胎鼠11只,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.方法:胎鼠麻醉后去除头、四肢和内脏,按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养,待生长汇合后冻存部分原代细胞,用丝裂霉素C处理2.0～3.0 h后,按1×108 L-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即小鼠胚胎成纤维细胞饲养层.人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上.上述两种成纤维细胞分别计数后,按1∶0,3∶1,1∶1,1∶3,0∶1比例混合,然后以1×108 L-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即混合饲养层.观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态,并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测.撤除饲养层,观察人胚胎干细胞体外分化情况.主要观察指标:①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较.②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较.③混合饲养层上人胚胎干细胞未分化状态的检测.④体外分化实验.结果:①:生长在小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞上的人胚胎干细胞克隆扁平、不饱满,而生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞克隆饱满、厚实,其克隆形态显著好于其他两种饲养层.②:小鼠胚胎成纤维细胞:人包皮成纤维细胞按1∶1混合时,人胚胎干细胞显著堆积生长,克隆边缘清晰、隆起明显且饱满,按1:3混合时无明显变化,优于其余3种混合比例.③:碱性磷酸酶染色及OCT-4抗原表达均呈强阳性,分别在200～300 bp和300～400 bp处可见OCT-4和端粒酶mRNA表达的特异性条带.④:能形成拟胚体,贴壁后人胚胎干细胞可分化为多种形态的细胞.?＃ 结论:①与小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞常规饲养层相比,两者混合饲养层能够更好的支持人胚胎干细胞的体外传代培养,获得更佳的克隆形态.②小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合比例为1∶1时效果较好.     

屈曲旋后外翻位石膏固定治疗伸直型肱骨髁上骨折56例

自1997年以来，笔者运用闭合整复，屈曲旋后外翻位石膏固定治疗伸直型肱骨髁上骨折56例，效果良好，现总结如下。     

人多能干细胞的冷冻与保存

背景：人多能干细胞的出现与发展是近年来生物医学研究领域的重大突破。但其在基础，临床研究中的广泛应用还有诸多限制，建立安全有效标准化的冷冻保存方案是人多能干细胞广泛应用面临的重大挑战。目的：回顾人多能干细胞冷冻领域的研究进展，探索造成冷冻损伤的原因和机制及改进方式，致力于促进新的更有效的冷冻方案形成。方法：以“人多能干细胞、人胚胎干细胞、人诱导多能干细胞、玻璃化、程序化冷冻、慢冻法、冷冻保存”为中文检索词，以“humanpluripotentstemcells，humanembryonicstemcell，humanintroducedpluripotentstemcell，vitrification，programmedcryopreservation，slow-freezing，cryopreservation”为英文检索词，应用计算机检索中国知网全文数据库、万方全文数据库、维普（viP）期刊全文数据库、PubMed数据库有关人多能干细胞冷冻保存技术的文献，排除与研究目的无关及重复文献，保留58篇文献进一步总结分析。结果与结论：了解人多能干细胞冷冻过程中造成冷冻损伤的原因和机制，是寻找高效的冻存方案的关键。需要更清晰的了解冷冻过程中损伤的原理，改进和创新低温生物技术来避免各种冷冻损伤的发生并致力于探讨可重复的，高效的，符合GMP要求的，能大规模冻人多能干细胞的方案。