重组人骨形态发生蛋白-2诱导脂肪成体干细胞成异位软骨的研究

目的探索重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）诱导脂肪成体干细胞异位软骨的生成能力。方法将获取的兔脂肪组织机械分割，通过Ⅰ型胶原酶消化后得到脂肪成体干细胞。经rhBMP-2诱导培养14d的脂肪成体干细胞微球种植在BALB／C裸鼠肌袋内。术后4、8周各处死2只动物，取材固定、脱钙、包埋后切片染色。镜下观察。结果经过rhBMP-2连续诱导培养14d的脂肪成体干细胞已具有软骨细胞的表型（细胞基质中富含蛋白多糖和Ⅱ型胶原），并不向成骨方向分化（Von kossa染色阴性）。术后4、8周有软骨细胞形成。结论rhBMP-2具有诱导脂肪成体干细胞向软骨细胞分化的潜能。     

股骨干骨折合并同侧股骨颈骨折的临床分析

股骨干骨折合并同侧股骨颈骨折（ipsilateral femoral neck and shaft fractures，IFNSF）于1953年由Dalaney和Street首次报告以来，文献报道逐渐增多，由于其处理的复杂性及挑战性，日益受到骨科医生的关注。我们总结自2000年1月～2005年8月收治的20例IFNSF患者，分析如下。     

血清浓度对脂肪成体干细胞向软骨细胞分化的影响

[目的]比较不同浓度的血清,在转化生长因子-β1(TGF-β1)存在的条件下,对脂肪成体干细胞(ad-ipose-derived adult stem cells,ADASCs)向软骨细胞分化的影响,探讨较为合适的血清浓度。[方法]取成年新西兰兔颈部脂肪组织,剪碎后通过Ⅰ型胶原酶消化,得到脂肪成体干细胞;稳定传代后,分别用含1?S和10?S的软骨诱导液干预ADASCs 2周,采用MTT检测方法对细胞增殖活性进行比较,应用甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色进行软骨细胞鉴定,利用Leica病理图像软件分析两组间Ⅱ型胶原免疫组化染色后的灰度,比较两组细胞分化的效果。[结果]MTT检测显示10?S组细胞增殖活性高于1?S组(P<0.05),两组细胞的甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色均为阳性,并以10?S组更为显著;灰度分析提示10?S组Ⅱ型胶原表达量高于1?S组(P<0.05)。[结论]体外研究表明,含10?S的软骨诱导液更有利于脂肪成体干细胞向软骨细胞方向增殖和分化,这将为作者采用这种新型的干细胞修复软骨缺损做好前期的准备。     

补肾中药对增龄成骨细胞VDR蛋白表达的影响

目的 观察维生素D受体（VDR）蛋白在增龄大鼠成骨细胞中的表达，研究补肾中药对增龄大鼠成骨细胞VDR蛋白的影响，探讨补肾中药促进骨形成的新机制。方法 来源于不同年龄的大鼠成骨细胞被分离，采用组织块翻转方法培养。通过倒置显微镜观察细胞形态、矿化结节染色对成骨细胞加以鉴定。采用免疫组化和western blot方法检测成骨细胞VDR蛋白表达。结果 免疫组化和western blot结果表明，在增龄大鼠成骨细胞中，补肾益精方、固本壮骨胶囊、金匮肾气丸可上调VDR蛋白表达，但是知柏地黄丸对于VDR蛋白表达的影响却存在着差异。结论 补肾益精方、固本壮骨胶囊、金匮肾气丸上调增龄成骨细胞VDR蛋白的表达，但知柏地黄丸对于VDR蛋白表达的影响却存在着明显的差异。     

mTOR传导通路在骨肉瘤联合化疗中的应用研究

摘要：骨肉瘤是儿童和青少年高发的恶性肿瘤,相比其他肿瘤骨肉瘤具有高侵袭性高转移性。骨肉瘤患者的预后与联合化疗的反应性相关,但是骨肉瘤对现有的化疗药物有较高的耐药性,并且缺乏效果明确的联合化疗方案。最近的研究证实哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路在部分肿瘤起到了控制细胞生长、细胞增殖、细胞迁移、细胞存活、蛋白合成和转运的功能。近十年来学者一直在研究哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路治疗肿瘤的分子机制,这篇综述回顾了哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路应用于骨肉瘤治疗和联合化疗的研究。     

低强度脉冲超声波在运动创伤中作用研究进展

低强度脉冲超声波（LIPUS）是一种经皮传递的非侵入性的机械能,在生物器官内产生高频声压波。近年来其在运动创伤方面的应用引起关注。本文总结归纳了LIPUS在运动创伤领域的研究与应用工作,并对其作用机制做了综述。     

补肾中药对成骨细胞维生素D受体与核心结合因子α1蛋白表达的影响

为探讨补肾中药影响骨形成的机制,将SD大鼠随机分为正常组、生理盐水组、单味补阳组（固本壮骨胶囊）、复方补阳组（金匮肾气丸）、复方平补组（补肾益精方）、复方补阴组（知柏地黄丸）和西药对照组（萌格旺）7组,各组的含药血清分别干预16月龄大鼠成骨细胞,采用免疫组织化学方法检测药物干预后大鼠成骨细胞维生素D受体（vitamin Dreceptor,VDR）、核心结合因子仅α1（core binding factor α1,Cbfα1）蛋白的表达。结果：在大鼠成骨细胞中,单味补肾阳组、复方补肾阳组、复方平补组、西药对照组明显上调VDR、Cbfα1蛋白表达,复方补肾阴组明显下调VDR、Cbfα1蛋白表达。结论：补肾中药中,补阳中药和平补中药可能是通过上调成骨细胞VDR、Cbfα1蛋白表达,促进骨形成。     

胶原杂化去抗原松质骨载体复合自体间充质干细胞修复骨软骨缺损

目的制备胶原杂化去抗原松质骨载体并复合自体间充质干细胞修复关节骨软骨缺损。方法脱脂、脱蛋白和脱钙的方法来制备去抗原松质骨载体，酸解-酶解法制备胶原进而杂化松质骨载体。扩增间充质干细胞，接种到胶原杂化松质骨载体，植入左膝关节（实验侧），右膝关节植入没有复合细胞的胶原杂化去抗原松质骨载体（对照侧），在第6、12、24、48周时结合Pineda评分观察实验侧和对照侧的骨软骨缺损的组织修复情况。结果实验侧自12周时出现初步的软骨表型，24周时最为明显，48周有部分退变；软骨下骨部分逐渐恢复。对照侧软骨缺损一直以纤维组织充填，软骨下骨有部分恢复。上述各时间点实验侧和对照侧的Pineda评分为16．600±0．966。17．600±0．699（6周）；6．600±0．843、14．800±0．789（12周）；3．300±0．483、13．600±0．843（24周）；3．500±0．527、14．100±0．876（48周），差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论胶原杂化的去抗原松质骨载体复合自体间充质干细胞能够修复关节的骨软骨缺损。     

维生素D调控成骨细胞的作用机制

维生素D是体内重要调节激素．而1.25(OH)2D3是维生素D最具活性的代谢产物，它可调控骨细胞，尤其是成分细胞的功能。1.25(OH)2D3调控成分细胞是通过基因途径和非基因途径，基因途径由核内维生素D受体介夺，非基因途径与细胞膜活化有关。     

重组人骨形成蛋白2诱导脂肪成体干细胞向软骨分化的形态学研究

目的 探索分离培养兔脂肪成体干细胞，经重组人骨形成蛋白2（recombinant human bone morphogenetic protein2，rhBMP-2）定向诱导后，向软骨细胞分化的可能。方法 将4月龄新西兰兔脂肪组织机械分割，通过Ⅰ型胶原酶消化后得到脂肪成体干细胞（adipose-derived adult stem cells，ADASCs），采用微球方法进行培养，在rhBMP-2诱导组、重组人转化生长因子β1（recombinant human transforming growth factor β1，rhTGF-β1）诱导组和rhBMP-2＋rhTGF-β1（共同诱导组）干预6d后，各组诱导液中分别加入维生素C50μg／ml，再干预8d，应用HE、Alcian blue、Von kossa染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色等组织学方法对诱导后的细胞进行鉴定。结果 连续诱导培养14d后，各诱导组HE染色显示软骨陷窝形成，对照组软骨陷窝形成不明显。Alcian blue染色见细胞基质中富含蛋白多糖，胞外基质分泌较多的Ⅰ型胶原；但Von kossa染色为阴性；对照组均为阴性。结论 在微球方法培养下，通过相关形态学研究表明，rhBMP-2具有诱导脂肪成体干细胞向软骨细胞分化的能力，将为采用ADASCs修复软骨损伤奠定理论基础。