靶向sKDR对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察靶向可溶性血管内皮生长因子受体（sKDR）对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨KDR基因作为膀胱癌基因治疗靶点的可行性和有效性。方法：将人膀胱癌细胞T24分为sKDR转染组、未转染组和对照组,构建靶向sKDR真核分泌型表达质粒PCI-KDR,经Lipofctamine^TM2000转染T24细胞,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测能否与VEGF结合,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测稳定表达sKDR的T24细胞KDR基因表达水平,噻唑蓝比色法（MTT）检测sKDR对T24细胞增殖的作用,转移酶末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡率,裸鼠皮下移植稳定表达sKDR的T24细胞,观察其成瘤性的改变。结果：与未转染组比较,转染组稳定表达sKDR的T24细胞其KDR mRNA表达水平升高了4.16倍,细胞增殖抑制率增加了55.1%（P<0.01）,细胞增殖速度明显缓慢并出现显著的凋亡峰。在裸鼠体内转染组与未转染组上述各项指标比较差异有显著性（P<0.01）,转染组肿瘤生长明显缓慢,成瘤能力受抑。结论：靶向sKDR能够在很大程度上抑制膀胱癌T24细胞增殖并促进其凋亡。     

前列腺分泌蛋白94基因的克隆及序列测定

目的:作为构建前列腺分泌蛋白94(PSP94)分泌型表达质粒的基础。方法:从正常前列腺组织中钓取PSP94 cDNA,构建重组质粒pUC19－PSP94,转化后提取目的基因并进行测序。结果:(1)构建了pUC19－PSP94的重组克隆质粒;(2)PCR扩增获得了280bp的PSP94成熟蛋白基因;(3)测定了PSP94的基因序列。结论:所构建的pUC19－PSP94重组质粒可成功地克隆PSP94蛋白基因。     

小针刀治疗颈肩腰腿痛102例病人围术期病例分析

目的：对小针刀治疗颈肩腰腿痛患者围术期的治疗方法进行适当的研究.方法：在治疗的过程中,主要采取的治疗方法是西中医相结合方法,在手术之前进行适当的情志护理;在手术中要求患者积极配合医护人员的治疗,并且对患者的病情进行细致的观察;在手术之后,为了保证手术的治疗效果,帮助患者早日恢复健康,为患者提供科学合理的康复指导.结果：在102例患者当中,有93例患者病情痊愈,7例患者的病情得到了好转,只有2例患者的治疗没有起效,所以102例患者的总体治疗有效率为91.2%,并且治愈患者没有并发症产生.结论：通过对小针刀治疗颈肩腰腿痛患者围术期的病例进行研究,认识到将中西医疗法作为治疗的主要方法不但能够达到提高患者治疗有效率的目的,而且还能有效地防止并发症的产生.     

大黄素阻断SMAD2/3信号通路抑制人肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移

目的 探讨大黄素对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖、迁移的影响。方法 体外培养HPASMC,取对数生长期的细胞,分为对照组、TGF-β1处理组、TGF-β1联合大黄素处理组。采用CCK-8法检测HPASMC活性,Transwell^TM小室实验和划痕实验检测HPASMC迁移能力;免疫荧光实验检测骨桥蛋白(OPN)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,Western blot法检测HPASMC的OPN、PCNA的蛋白水平及SMAD家族成员2(SMAD2)和SMAD3的磷酸化水平。结果 与对照组相比,TGF-β1处理组的OPN、PCNA蛋白表达增加,HPASMC增殖和迁移能力增强,SMAD2、SMAD3的磷酸化增强。与TGF-β1组相比,TGF-β1联合大黄素处理组HPASMC的增殖和迁移能力降低,OPN、PCNA蛋白表达减少,SMAD2、SMAD3蛋白磷酸化明显降低。结论 大黄素可抑制HPASMC中TGF-β1上调OPN、PCNA蛋白的表达,抑制TGF-β1诱导的PASMC增殖和迁移,可能与抑制SMAD2/3信号通路有关。     

老年与非老年高血压病患者的左室肥厚对比

目的　探讨年龄大、病程长的老年高血压病患者左室肥厚是否重于其他人群及其意义。方法　正常血压对照组（正常组）老年高血压病组（老年组）,非老年高血压病组（非老年组）行动态血压监测及超声心动图等检查,计算左室重量指数（ Ｌ Ｖ Ｍ Ｉ）。结果　老年组高血压患病时间超过非老年组的 ３ 倍。老年组平均收缩压（ Ｍ Ｓ Ｂｐ）明显高于非老年组（ Ｐ ＝ ０００５）,但平均舒张压（ Ｍ Ｄ Ｂｐ）低于后者（ Ｐ＜ ００００ ０１）。老年组与非老年组 Ｌ Ｖ Ｍ Ｉ均大于正常组（ Ｐ ＝ ００００ ０７ 和 ００００ ００６）,老年组 Ｌ Ｖ Ｍ Ｉ较非老年组略小,但两组间差异无明显统计学意义。结论　老年高血压病患者并不因其年龄大和病程长而左室肥厚重于非老年患者,提示左室肥厚在老年前期已达高峰。     

老龄人群血浆白细胞介素2及其可溶性白细胞介素2受体的研究

目的：探讨老化过程中 Ｔ 淋巴细胞功能的变化规律。方法：以 ６２０ 例不同年龄的在职与离退休男性职工为研究对象，应用生物测定法检测了外周血 Ｔ 淋巴细胞丝裂原反应性、血浆 Ｉ Ｌ ２ 活性和 ｓ Ｉ Ｌ ２ Ｒ 的表达。结果：①外周血 Ｔ 淋巴细胞丝裂原反应性随增龄而下降，与年龄呈明显负相关关系（ｒ＝ － ０５９５ ４， Ｐ＜ ００００ １）；②血浆 Ｉ Ｌ ２ 活性也随增龄而下降，与年龄也呈明显的负相关关系（ｒ＝ － ０３５２ ２， Ｐ＜ ００００ １）；③５０ 岁以上年龄组 ｓ Ｉ Ｌ ２ Ｒ 表达水平随增龄有增高趋势，５０～５９岁组ｓ Ｉ Ｌ ２ Ｒ 表达水平增高最明显。④相关检验表明，外周血 Ｔ 淋巴细胞丝裂原反应性与血浆 Ｉ Ｌ ２活性呈明显的正相关关系。结论：老龄人群 Ｔ 淋巴细胞转化和分泌功能均明显下降。     

重组人PSP94质粒的快速筛选

目的 :建立一种快速筛选阳性重组质粒的方法。方法 :直接以菌液为模板 ,采用两条特异性引物 ,利用 PCR筛选人前列腺分泌蛋白 94 (PSP94 )的阳性重组质粒。结果 :利用 PCR法成功筛选出了阳性重组质粒。结论 :PCR法省时、省力 ,尤其适用于重组质粒的筛选和鉴定     

原发性肝癌自发破裂28例临床诊治分析

目的:探讨原发性肝癌自发破裂出血的诊断与治疗。方法:回顾分析我院2007年-2010年收治28例原发性肝癌自发破裂出血诊治临床资料。结果:症状应结合B超及腹腔穿刺术综合判断,手术治疗生存期为6~28个月,TAE治疗生存期为5~16个月。保守治疗生存期为0~18个月。结论:积极手术和TAE治疗可延长患者生存期,是有效的治疗措施。     

EGFR单链抗体-力达霉素融合蛋白抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖与侵袭的研究

目的 研究EGFR单链抗体-力达霉素融合蛋白ER（Fv-LDP-AE）对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭的抑制作用,探讨其作用机制.方法 采用噻唑蓝（MTT）法测定ER（Fv-LDP-AE）对MCF-7细胞增殖的影响.流式细胞术、Hoechst 染色和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞周期的变化以及细胞凋亡.Transwell实验测定ER（Fv-LDP-AE）对MCF-7细胞迁移和侵袭的影响.采用RT-PCR检测细胞EGFR mRNA的表达水平,Western blot分析ER（Fv-LDP-AE）对EGFR细胞信号通路的影响.明胶酶谱实验测定细胞基质金属蛋白酶（MMPs）的活性.结果 ER（Fv-LDP-AE）能显著抑制MCF-7细胞的体外增殖,其半数抑制浓度（IC50）为1.5 x10-12 mol/L.ER（Fv-LDP-AE）可引起细胞周期G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭,阻碍EGFR的表达,干扰EGFR细胞信号通路,降低MMPs的活性.结论 ER（Fv-LDP-AE）通过抑制EGFR及其细胞信号通路、干扰细胞周期循环和诱导细胞凋亡,抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外增殖,通过降低迁移能力和调节MMPs活性,阻碍肿瘤细胞的侵袭转移.     

RNA干扰沉默血管内皮生长因子对人膀胱癌细胞株T24增殖和凋亡的影响

目的 观察RNA干扰沉默血管内皮生长因子(VEGF)对膀胱癌细胞株T24增殖和凋亡的影响.方法 构建了4个针对VEGF的小干扰RNA(siRNA)表达质粒pGC-siVEGF1-4,脂质体法稳定转染T24细胞.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(EUSA)检测转染细胞VEGF mRNA和蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡情况.结果 4个VEGF siRNA表达质粒均能明显抑制转染细胞的VEGF mRNA和蛋白表达,使细胞增殖减慢,其中以pGC-siVEGF3最为明显,细胞增殖受抑达38.9%(t=18.49,P《0.01).且该组出现了最大程度G0/G1细胞阻滞(59.8±1.4),明显大于空质粒组(48.5 ±1.5),差异有统计学意义(P《0.01),该组的细胞凋亡率也最高(17.4%).结论 VEGF siRNA表达质粒可下调T24细胞VEGF表达,抑制膀胱癌细胞生长并促进其凋亡.