普氏立克次体120kDa表面抗原N段基因的克隆与表达

目的　克隆和表达普氏立克次体 (Rickettsiaprowazekii) 12 0kDa外膜蛋白N段基因。 方法　采用PCR方法 ,从普氏立克次体基因组中扩增其 12 0kDa表面抗原N段基因片段 ,将其与原核表达载体 pQE30连接 ,构建重组质粒 pQE30 /2 6kDa,将重组质粒转入大肠杆菌 ,用IPTG诱导大肠杆菌内的目的基因表达。结果　获得长为 717bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知普氏立克次体 12 0kDa表面抗原基因一致 ;SDS -PAGE检测表达产物 ,在相对分子量 2 6 .3kDa处有一表达带 ;免疫印迹分析证明它能与普氏立克次体免疫兔血清反应 ;经双波长薄层扫描分析 ,目的蛋白占全菌体蛋白的 2 0 % ;提取表达菌体包涵体检查 ,证明目的蛋白主要存在于包涵体中。结论　普氏立克次体 12 0kDa表面抗原N段基因在大肠杆菌中获得了高效表达 ,该重组蛋白具有良好的免疫反应性。     

吗替麦考酚酯对重症急性胰腺炎血清细胞因子的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β和可溶性细胞间黏附分子（sICAM-1）-1 在重症急性胰腺炎（SAP）早期的动态变化及意义,并观察吗替麦考酚酯（MMF）的干预性作用.方法 将104 只雄性Wistar 大鼠随机分成4 组：正常组（（n=8,仅开腹后即缝合）,假手术组（n=32,开腹后仅翻动胰腺并以钝器轻划胰腺组织5 次）,SAP 组（（n=32,逆行胰胆管注射牛黄胆酸钠以建立SAP 模型）,和MMF 组（（n=32,建立SAP 模型后1h 经尾静脉注射MMF 250 mg/kg）.术后3 h、6 h、12 h、24 h 各组分批处死大鼠,采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶（AMS）、血清C 反应蛋白（CRP）;常规HE 染色进行胰腺组织病理学评分;ELISA 法检测血清TNF-α、IL-1β和sICAM-1 的含量.结果 在各时间点,SAP 组的胰腺组织病理评分,血清AMS、CRP,以及TNF-α、IL-1β和sICAM-1 的含量均显著高于正常组、假手术组（均P＜0.05）;而MMF 组的上述数值均显著低于SAP 组（均P＜0.05）.结论 SAP 早期阶段细胞因子的变化与病情进展密切相关,MMF 可通过抑制细胞免疫及炎性细胞因子的产生,减轻炎症损伤反应.     

上海市区6~24月婴幼儿贫血发生的长期纵向观察及相关分析

【目的】 了解上海市区婴幼儿贫血发生及相关因素。 【方法】 入选上海市区健康足月单胎6月龄婴儿,分别于6、12、24月龄进行血常规检测,体格生长指标测量,并收集喂养信息。 【结果】 共入选189名6月龄婴儿,149名完成12月龄随访,101名完成24月龄随访;6、12、24月龄贫血发生率分别为18.0%、15.4%、10.9%;73.5%的12月龄和45.5%的24月龄婴幼儿贫血为新发病例;婴幼儿贫血以小细胞低色素性贫血为主;6月龄贫血与非贫血婴儿相比,4月龄前添加辅食以及6月龄时未添加肉类的差异有统计学意义(P<0.01)。 【结论】 上海市区婴幼儿贫血仍有一定的发生率,有必要定期筛查血常规;辅食添加过早和肉类辅食添加过晚所导致的铁缺乏是造成婴儿贫血的重要原因。     

肿瘤-睾丸抗原CT45-5的表达纯化及多克隆抗体的制备

目的：原核表达、纯化肿瘤-睾丸抗原CT45-5基因,并制备多克隆抗体,以研究其在Fhit特异的信号通路中的作用。方法：设计出特异针对CT45-5的引物,通过RT-PCR扩增出CT45-5的编码基因,测序正确后插入到含GST基因的原核表达载体pGEX-KG中,以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;用纯化的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA测定抗体的效价,Western印迹鉴定抗体的特异性。结果：原核表达和纯化了CT45-5,并获得了其多克隆抗体,抗体效价达到1∶12800,Western印迹结果显示,该抗血清能够特异识别原核及真核细胞表达的CT45-5蛋白。结论：肿瘤-睾丸抗原CT45-5能够诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究CT45-5的功能奠定了基础。     

口腔鳞状细胞癌近红外拉曼光谱特征及其诊断价值研究

目的探索近红外拉曼光谱技术及化学计量法在口腔鳞状细胞癌诊断中的应用价值。方法收集正常口腔黏膜组织10例、鳞状细胞癌组织20例、白斑30例进行近红外拉曼光谱扫描,分析不同病变类型的特征性光谱,通过化学计量法进行分析建模,并评价其分类诊断效力。结果相对于正常组织,鳞状细胞癌及白斑中DNA、蛋白及脂类合成增强,表现出较明显的增殖活性。在对鳞状细胞癌和正常组织的建模比较中,诊断准确度98.81％;在鳞状细胞癌与白斑建模诊断中,诊断准确度96.30％。结论近红外拉曼光谱检测结合支持向量机分类建模技术,可以检测到口腔正常黏膜、白斑及鳞状细胞癌样本中的生化物质变化,并进行准确分类建模诊断。     

口腔癌术后放疗患者口腔菌群的变化

目的　了解口腔鳞癌术后放疗对患者口腔菌群的影响,为临床防治继发感染提供实验依据。方法　32例 口腔鳞癌术后患者,于放疗前后分别在照射野的中心区域与对侧黏膜采集唾液标本,进行细菌的分离培养鉴定,测 量可培养细菌的检出率、检出量和构成比。结果　与放疗前相比,放疗后照射侧和非照射侧的链球菌属、白色念珠 菌和绿脓杆菌检出增加;而照射侧的放线菌属和奈瑟菌属检出减少(P<0·05)。结论　口腔癌术后放疗可影响口 腔的微生态平衡,是导致口腔癌术后放疗患者发生感染的重要原因之一。     

柴胡皂甙-d对DEN致大鼠实验性肝癌形成的影响

目的:研究柴胡皂甙d(saikosaponin-d,SSd)对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)致大鼠实验性肝癌形成的影响.方法:清洁级雄性SD大鼠90只,随机分为5组:模型组(n=20),对照组(n=10)与SSd大、中、小剂量治疗组(各组n=20).对照组给予等量生理盐水灌胃,其余各组大鼠均给予2g/L二乙基亚硝胺(DEN,10 mg/kg)灌胃,每周5次,同时各治疗组每天腹腔注射不同浓度SSd(2.0,1.5,1.0 mg/kg),至16 周停药.分别于第6、12、16周处死大鼠,自动生化分析仪测定血清总胆红素(total bilirubin,TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate amino transferase,AST)和白蛋白(albumin,ALB)含量的变化,HE染色观察实验大鼠各期肝组织病理学结构的改变.结果:SSd各治疗组与模型组相比,SSd能够改善大鼠血清各项肝功指标,增加体重,明显减轻大鼠肝细胞的变性坏死,降低死亡率,并且有统计学差异(P＜0.05).病理学检查发现SSd各治疗组大鼠癌结节数及灶的大小均小于模型组,镜下单纯造模组癌细胞呈多形性,异形性明显;相反,SSd各干预组癌细胞分化程度高,异形性较低.结论:SSd对实验性大鼠肝癌的形成有一定的抑制作用.     

高血压丘脑出血破入脑室89例患者临床救治分析

目的 探讨微创手术辅以尿激酶溶解引流治疗高血压丘脑出血破入脑室的疗效.方法 采用小骨窗开颅联合脑室穿刺外引流、微创丘脑血肿穿刺联合脑室穿刺外引流、单纯脑室穿刺外引流,以及术后辅以尿激酶溶解治疗89例丘脑出血破入脑室患者.结果 小骨窗开颅联合脑室穿刺外引流患者40例,出现术后并发症28例,死亡5例;微创血肿穿刺抽吸联合脑室穿刺外引流患者20例,出现术后并发症11例,死亡2例;单纯双侧脑室穿刺外引流29例,出现术后并发症16例,死亡3例.术后日常生活能力(ADL)分级:Ⅰ级14例;Ⅱ级27例;Ⅲ级25例;Ⅳ级8例;Ⅴ级5例;Ⅵ级10例.结论 采用微创手术辅以尿激酶溶解引流治疗高血压丘脑出血破入脑室的患者,具有创伤小,操作简便,手术时间短,术中出血少,安全有效的特点.可以降低病死率和病残率,提高患者的生存质量.     

肺切除术后早期低氧血症的多因素分析及护理

术后早期低氧血症在临床中较为常见,尤其在胸部手术后更易出现 [1],术后早期低氧血症常与多种因素有关,如年龄、手术方式、麻醉时间等.有报道 [2,3]30%～50%患者常于术后6～72 h出现,本文报道肺切除术后早期低氧血症的发生率为42.7%,与文献报道 [2]相似.     

磷酸肌酸治疗充血性心力衰竭的临床观察

目的：观察磷酸肌酸辅助常规抗心衰药物治疗充血性心力衰竭（ＣＨＦ）的疗效。方法：随机对照比较４０例充血性心力衰竭（ＣＨＦ）患（治疗组、对照组各２０例）,在常规治疗基础上加用磷酸肌酸（ＣＰ）的疗效。结果：ＣＰ组治疗后心功能分级改善总有效率为９５％,ＬＶＥＦ明显增加,ＬＶＥＳＤ、ＬＶＥＤＤ减小,与对照组比较有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。结论：ＣＨＦ患在常规抗心衰药物治疗的同时静脉加用ＣＰ具有显改善