塞来昔布促进T细胞淋巴瘤对化疗药物的敏感性

目的:研究塞来昔布对T细胞淋巴瘤细胞化疗敏感性的影响,并探讨其作用机制.方法:MTF法检测不同浓度塞来昔布分别作用24、48和72 h,对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat和Hut78增殖活性的影响;MTT法检测化疗药物[顺铂(cis-platinum,DDP)、表柔比星(epirubicin,EPI)及长春新碱(vincristine,VCR)]联合塞来昔布对Jurkat和Hut78细胞增殖活性的影响;并计算IC50值;流式细胞术检测塞来昔布联合化疗药对Jurkat和Hut78细胞凋亡水平的影响;Real-time PCR及Westernblotting技术分别从mRNA及蛋白水平检测塞来昔布对Jurkat和Hut78细胞表达MDR1、MRP1、LRP及TopoⅡ的影响.结果:塞来昔布对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat和Hut78增殖活性具有一定抑制作用,且可明显增强化疗药物对Jurkat和Hut78细胞的杀伤作用;在塞来昔布作用下Jurkat和Hut78细胞的凋亡水平明显增加(P＜0.01);与塞来昔布共培养的Jurkat和Hut78细胞,TopoⅡmRNA和蛋白的表达水平均明显增加,而MDR1、MRP1、LRP mRNA及蛋白的表达水平均明显下降(P＜0.05).结论:塞来昔布可通过调控耐药相关基因的表达而增强T淋巴瘤细胞对化疗药物的敏感性,因此在T细胞淋巴瘤的临床治疗中具有良好应用前景.     

沉默FAM83D基因调控上皮-间质转化对食管鳞癌放射敏感性影响

目的 探讨沉默FAM83D对X线照射后食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、存活能力及侵袭、迁移能力的影响及机制。方法 采用免疫组化法检测 69例ESCC患者组织中FAM83D、E-cadherin、vimentin的表达。免疫印迹法检测ECA109、KYSE30细胞FAM83D基因沉默效果。MTS、克隆形成实验和Transwell方法检测ECA109、KYSE30细胞增殖活性、存活能力及侵袭能力。流式细胞术和免疫印迹法检测ECA109、KYSE30细胞凋亡分布、上皮-间质转化(EMT)及凋亡相关蛋白表达。结果 ESCC组织中55%(38/69) FAM83D强表达,36%(25/69) E-cadherin强表达,61%(42/69) vimentin强表达;FAM83D强表达与E-cadherin强表达呈负相关(r=-0.350,P<0.01),与vimentin强表达呈正相关(r=0.470,P<0.01)。ECA109、KYSE30细胞沉默FAM83D后降低了FAM83D蛋白表达(P<0.01)。MTS和克隆形成实验数据显示照射后沉默FAM83D显著抑制了ECA109、KYSE30细胞增殖水平(P<0.05)、增加了放射敏感性(P<0.01)。照射后FAM83D shRNA组ECA109、KYSE30细胞侵袭力降低(P<0.01)、E-cadherin表达增加,而N-cadherin、vimentin、Snail、p-Akt、p-GSK-3β表达降低(P<0.01)。照射后FAM83D shRNA组ECA109、KYSE30细胞凋亡率明显增加(P<0.01),同时Bcl-2、Mcl-1表达下调,Cleaved caspase-3的表达上调(P<0.01)。结论 FAM83D与ESCC的侵袭发展密切相关。沉默ECA109、KYSE30细胞FAM83D表达联合X线照射降低了其增殖、侵袭和存活能力,诱导了细胞凋亡,增加了放射敏感性,该作用可能通过Snail/Akt/GSK-3β信号途径来调控EMT。     

肝穿刺术在婴儿肝炎综合征病因诊断中的价值

目的 探讨肝穿刺术在婴儿肝炎综合征病因诊断中的价值以及婴儿肝穿刺活检术的安全性,为临床应用提供依据.方法 对1996年3月至2006年8月在浙江大学医学院附属儿童医院住院的66例原因不明或治疗效果不佳的婴儿肝炎综合征患儿进行1秒钟肝穿刺活检术,通过肝脏组织学改变的检查,对病因进行综合的诊断和分析.结果 66例患儿肝穿刺活检均获成功,无1例发生并发症,通过肝脏病理学检查共确诊病因53例(占80.3%),最后结合临床病史和实验室检查,确诊57例(占86.4%),并对病原菌的诊断提供帮助.确诊病因中先天性胆道闭锁35例,居首位,占53.0%;其次为代谢性肝病检出10例,占15.2%;次之为胆汁淤积性肝炎,9例,占13.6%.结论 肝穿刺活检对于婴儿肝炎综合征的病因诊断是安全、有效的;对于婴儿期的梗阻性黄疸或治疗效果不佳的巨细胞病毒性肝炎须高度怀疑先天性胆道闭锁,积极行肝穿刺检查;对代谢性肝病应在婴儿期就应引起临床医生的重视.     

膀胱癌的综合治疗

膀胱癌是泌尿生殖系统中最常见的恶性肿瘤,其发病率居男性肿瘤的第4位,女性肿瘤的第9位。非肌层浸润型膀胱癌约占75％-85％,预后较好,但仍有70％的复发率,且1％-45％可在数年内进展为肌浸润型的膀胱癌,严重威胁着人们的身体健康。许多患者会出现复发或转移,其中以淋巴结、骨、肺、皮肤和肝脏为最常见的转移部位。膀胱癌的治疗方法主要有手术、化疗、腹腔灌注、中医治疗等,对膀胱癌的治疗应该采取系统、个体化的综合治疗。     

大鼠骨髓间充质干细胞对T细胞免疫活性的影响

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stemcells,MSCs)对脾脏T细胞的免疫调节作用。方法:从大鼠骨髓中分离培养间充质干细胞,通过瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,并用流式细胞术(Flowcytometry,FCM)检测其细胞表面特征分子表达情况。MTT法测定经刀豆蛋白A(ConA)刺激后,不同数量MSCs对T细胞增殖能力的影响;ELISA法检测MSCs对T细胞分泌IFN-γ和IL-4水平的影响。FCM检测MSCs对脾脏T细胞凋亡水平的影响。MTT法测定MSCs对细胞毒性T细胞(Cytotoxic Tcells,CTL)杀伤活性的影响。结果:经不同数量MSCs作用后,脾脏T细胞增殖水平明显低于阳性对照组(P<0.01),而且MSCs比例越高,其抑制作用越强(P<0.01)。经MSCs作用后,T细胞分泌IFN-γ的水平明显降低,而分泌IL-4的水平明显升高,且这种作用随MSCs比例的增加而增强(P<0.01)。MSCs能够抑制在体外培养过程中T细胞的自发凋亡。与MSCs共培养后,T细胞对L1210细胞的杀伤活性和单独培养组相比明显下降(P<0.05)。结论:MSCs能够抑制T细胞增殖反应和CTL活性,该作用可能与MSCs改变T细胞分泌细胞因子水平有关,但与诱导T细胞凋亡无关。     

急性脑梗死患者胼胝体形态的MRI研究

目的 探讨一侧颞顶叶急性脑梗死时胼胝体形态可能存在的变化.方法 连续采集发生于一侧颞叶、顶叶或2个部位均有的急性脑梗死患者66例,男38例,女28例,年龄40～85岁.选取同期连续采集获得的与病变组匹配的 66例正常成人作为对照分析组.行磁共振扫描,在MRI T1WI 颅脑正中矢状位上分别测量胼胝体膝部厚度、体部前1/3处厚度、中部厚度、体后1/3处厚度、压部厚度及胼胝体面积,进行统计分析研究.结果 所测量的胼胝体膝部厚度、体部前1/3处厚度、中部厚度、体后1/3处厚度、压部厚度及胼胝体面积值,均为正常组大于病变组,且这些指标在正常组和病变组之间差异均存在统计学意义(P＜0.05).结论 当大脑一侧脑叶发生急性脑梗死时,即可引起胼胝体面积及不同区域大小的减小.     

老年局部晚期食管癌同步放化疗与单纯放疗的疗效比较

目的：比较老年局部晚期食管癌患者采用同步放化疗（CRT）和单纯放疗（RT）的疗效和急性不良反应。方法：回顾性分析2010年1月—2016年1月于河北医科大学第四医院就诊,年龄>70岁的82例老年局部晚期食管癌患者。比较CRT和RT两个治疗组间的完全缓解率（CRR）、部分缓解率（PRR）、疾病缓解率（DCR）、无进展生存期（PFS）、总生存期（OS）和急性不良反应,并分析食管癌预后的影响因素。结果：CRT组患者的CRR （33.3%）明显高于RT组（14.5%,P=0.049）,两组之间PRR和DCR的差异无统计学意义（P=0.058,0.064）。CRT组患者的中位PFS及PFS≥1、2、3年的患者比例均显著高于RT组（P=0.007）。CRT组患者的中位OS及OS≥1、2、3年的患者比例亦显著高于RT组（P=0.012）。单因素分析显示不同治疗方案、CRR是PFS和OS的影响因素。多因素分析显示CRR为PFS的独立预后影响因素,不同治疗方案、CRR是OS的独立预后影响因素（均为P <0.05）。CRT组患者的部分急性不良反应有恶心、呕吐、白细胞减少症、血小板减少症,发生率均高于RT组（均为P <0.05）。结论：同步放化疗可作为老年局部晚期食管鳞癌患者的治疗方案,且疗效优于单纯放疗,但仍需密切关注患者的不良反应。     

乌梅汤治疗寒热错杂型溃疡性结肠炎35例

目的观察乌梅汤治疗寒热错杂型溃疡性结肠炎的临床效果。方法将70例溃疡性结肠炎患者随机分为对照组与治疗组,每组各35例,对照组采用西药柳氮磺毗啶进行治疗,治疗组用中药乌梅汤加减,两组治疗周期均为半年,治疗结束后评定疗效。结果治疗结束后,治疗组临床总有效率为88．57％,完全缓解20例,对照组临床总有效率为74．29％,完全缓解11例,两组完全缓解人数差异有统计学意义（P〈0.05）。结论乌梅汤治疗寒热错杂型溃疡性结肠炎的临床疗效显著,尤其对于病程较长的患者完全治愈率高,值得在临床推广应用。     

DNA测序研究维生素D受体基因多态性与儿童克罗恩病相关性

目的：初步探讨维生素D受体基因多态性TaqI、BsmI、ApaI位点在儿童克罗恩病（CD）发病中的作用。方法：选取19例CD患儿为病例组,122例正常健康体检儿童为对照组。ELISA方法检测血清25羟维生素D3 [25(OH)D3]水平;基因测序方法检测两组维生素D受体基因多态性TaqI、BsmI、ApaI位点,比较两组之间基因型和等位基因分布频率。结果：病例组血清25(OH)D3水平（17.3±2.4 ng/mL）较对照组（26.9±2.1 ng/mL）明显降低,差异有统计学意义（P0.05）。结论：CD患儿存在低25(OH)D3水平;维生素D受体基因多态性TaqI、BsmI、ApaI位点与CD的发生无关。     

肾及膀胱肿瘤组织中MAGE基因及其产物的表达

目的:观察肿瘤特异性抗原MAGE-1、MAGE-3基因及MAGE-3抗原在肾及膀胱肿瘤组织中的表达状况,以评价这些基因或基因产物作为肾及膀胱肿瘤组织中的免疫学检测和免疫治疗、基因治疗分子标志物的可行性.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别测定39例肾及膀胱肿瘤患者癌组织与10例相应的癌旁组织MAGE-1、MAGE-3基因.应用免疫组织化学方法测定121例肾及膀胱肿瘤患者癌组织与10例相应的癌旁组织MAGE-3抗原表达.结果:39例肾及膀胱肿瘤中有23例MAGE-1 mRNA呈阳性表达(59.0%),有22例MAGE-3mRNA呈阳性表达(56.4%),其中肾细胞癌14例中MAGE-1 mRNA及MAGE-3 mRNA阳性表达均为8例.肾盂与膀胱移行细胞癌25例中MAGE-1 mRNA及MAGE-3 mRNA阳性表达分别为15例及14例.同时表达MAGE-1及MAGE-3的肾及膀胱肿瘤为18例(46.2%),所有10例癌旁组织均不表达MAGE-1及MAGE-3.免疫组织化学检测121例肾及膀胱肿瘤中56例MAGE-3抗原表达阳性(46.3%),包括肾细胞癌13例,MAGE-3抗原表达率为30.8%;肾盂与膀胱移行细胞癌108例,MAGE-3抗原表达率为48.1%.10例相应的癌旁组织MAGE-3抗原均不表达.根据Logistic回归检验分析MAGE-3抗原的表达与患者的临床分期及病理分级无明显关系.结论:MAGE基因有可能作为肾及膀胱恶性肿瘤组织免疫学检测的分子标志物,并且具有作为免疫治疗、基因治疗特异性靶位的潜在价值.