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11.
【摘要】 目的 研究髓样细胞 2触发受体(TREM2)是否参与成年小鼠手术诱发的围术期神经认知障碍(PND)。方法 将20只雄性野生型C57BL/6小鼠随机分为对照组和手术组各10只,在手术前24小时对小鼠进行恐惧条件训练,恐惧条件测试(FCT)分别在术后1、3和7天进行,并采用旷场实验评估小鼠的运动能力。在最后一次行为评估后,将动物处死进行Western blot检测TREM2的表达。将40只小鼠随机分为对照组、手术组、Hsp60+手术组和TREM2 siRNA+HSP60+手术组,每组各10只。手术前30分钟将TREM2 siRNA立体定向注射入侧脑室。选择性TREM2受体激动剂HSP60,在麻醉苏醒后立即腹腔注射5μg/小鼠,按前述方法每24小时注射一次,连续7天,在手术前24小时对小鼠进行恐惧条件训练,FCT分别分别在术后1、3和7天进行,并采用旷场实验评估小鼠的运动能力。在最后一次行为评估后,一半小鼠(n=5)用于Western blot和ELISA分析,另一半(n=5)用于免疫荧光检测。结果 在异氟烷麻醉下对成年C57BL/6小鼠行胫骨骨折髓内固定术,发现该手术不会损害小鼠的运动能力,但会恶化学习和记忆功能,并降低TREM2表达。通过使用选择性TREM2激动剂HSP60,发现TREM2在小鼠脑海马组织中的表达明显增加,从而改善了学习和记忆,并减轻了小鼠的神经炎症反应。TREM2 siRNA消除了HSP60诱导的TREM2表达的增加,并逆转了HSP60诱导的小鼠学习和记忆功能以及小鼠脑神经炎症水平的改善。结论 TREM2的上调可能与减轻神经炎症和改善学习记忆功能有关,并减少PND的发生。 相似文献
12.
目的获取白纹伊蚊β-肌动蛋白基因序列并探讨其作为基因表达内参照的作用。方法根据昆虫β-肌动蛋白核苷酸序列的高度保守区设计引物,通过PCR的方法从白纹伊蚊C6/36细胞中扩增获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,进一步通过RT—PCR的方法验证其在稳定转染空载体和40S核糖体蛋白S4(RPS4)基因的白纹伊蚊C6/36细胞中的表达。结果获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,长911bp,与其他几种蚊β-肌动蛋白基因对应序列的相似性在89%以上。在稳定转染空载体和RPS4基因的C6/36细胞中,均可稳定地扩增出目的基因。结论成功获得了白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,并且该片段完全可以用作基因表达差异分析时的内参照基因。 相似文献
13.
目的 建立抗药性相关糜蛋白酶基因稳定转染细胞系。方法 采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系CD-NA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的糜蛋白酶基因编码区;经T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到真核表达载体piEl-3,构建重组昆虫细胞表达载体piEl-3/chy,经酶切和PCR鉴定后,与带有筛选标记的piEl-neo质粒共转染蚊细胞C6/36,通过G418选择培养,建立转染细胞系;用RT-PCR、Westernblotting鉴定糜蛋白酶基因的转录表达。结果 成功构建了真核表达载体piE1-3/chy,证明糜蛋白酶基因已转入C6/36细胞,建立了稳定转染细胞系,表达产物分子质量单位约30ku,与理论值相符。结论 稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究糜蛋白酶基因与抗药性的关系奠定了基础。 相似文献
14.
15.
目的寻找与肿瘤相关的基因诊疗中差异表达基因提取的方法。方法将基因表达谱数据进行预处理,采用相对风险方法筛选出差异表达基因特征子集,计算其样本间距离,然后对特征基因加权排序和过滤冗余基因,最后应用分类器对卵巢癌基因数据集进行分析,测试该方法的有效性。结果选取20维特征基因,进行分类测试,当特征基因为3~5、7和12~20维时,分类准确率可以达到100%,假阳性率可以达到0,表现出较好的可靠性,能够有效地将2个样本类型分开。结论经分类器测试证明,分类精度高,效果优于使用传统的基因差异表达分析方法。 相似文献
16.
研究小酸浆Physalis minima L.的活性成分。小酸浆的地上部分经乙醇提取,氯仿萃取,D-101大孔树脂柱色谱粗分,Sephadex LH-20、MCI gel CHP 20P、RP-18等色谱柱分离,并通过理化常数和波谱学方法鉴定化合物结构。从小酸浆中分离鉴定了5个化合物,分别为Withaphysalin P(Ⅰ)、14,18-di-O-acetylwithaphysalin C(Ⅱ)、Withaphysalin Q(Ⅲ)、Withaphysalin型化合物1(Ⅳ)、Withaphysalin型化合物2(Ⅴ)。化合物Ⅳ、Ⅴ为新化合物,分别命名为Withaphysalin T、Withaphysalin U。 相似文献
18.
19.
【摘要】目的 构建心肌缺血再灌注(MIRI)损伤动物模型,观察鹰嘴豆芽素A预防给药对心肌炎性因子调节酶过氧化物酶体增殖物激活受体ɑ(PPARɑ)、细胞色素P4501A1(Cyp4501A1)、磷脂酰肌醇 3激酶(PI3K)和丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)蛋白及mRNA表达的影响。方法 60只SD大鼠适应性喂养2周后按照随机数字法分为假手术组、模型组、雷米普利干预组、鹰嘴豆芽素A低、中和高剂量组,每组10只。灌胃给药2周后,所有大鼠均采用可逆左冠状动脉前降支结扎法构建MIRI模型,假手术组只穿线不结扎,手术后立即收集血液检测心肌酶谱和血清炎性因子含量,收集心脏检测心肌病理学、心肌炎性指标、心肌炎性因子调节酶PPARɑ、Cyp4501A1、PI3K和AKT蛋白及mRNA的表达。结果 心肌组织病理学可见,假手术组心肌纤维排列整齐,模型组有纤维断裂和组织坏死,与模型组相比,各治疗组均明显好转;与假手术组相比,模型组心肌酶CK MB和LDH、心肌和血清炎性因子Hs CRP、IL 1α、IL 6、IL 8和TNF α均明显升高(P<0.05),各治疗组相较于模型组明显降低(P<0.05);与假手术组相比,模型组心肌PPARɑ、Cyp4501A1、PI3K和AKT蛋白及mRNA表达水平均明显降低(P<0.05),而各治疗组相较于与模型组则明显升高(P<005)。结论 鹰嘴豆芽素A预防给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎症因子具有明显抑制作用,其作用机理可能与鹰嘴豆芽素A可调节PPARɑ、Cyp4501A1、PI3K和AKT蛋白及mRNA表达有关。 相似文献
20.