亲子鉴定中二联体鉴定结果判定标准的探讨

目的探讨二联体亲子鉴定判定标准及结论描述并报道假定父亲与真实生物学父亲为同胞兄弟亲子鉴定1例。方法检测15个短串联重复序列基因座,包括13个CODIS基因座以及PentaE、PentaD。统计经三联体认定的二联体组合310例,分别采用上海司法部法庭司法科学技术研究所推荐的基因座频率、北京汉族基因频率和本实验室基因频率计算认定二联体的联合父权指数;统计69例排除案例的二联体组合不符合的基因座个数。结果 310例认定的二联体组合采用不同的基因座频率计算具有不同的联合父权指数,310例认定的二联体父权指数变化范围在101~1011之间,69例排除二联体组合不符合基因座的个数在2~13个之间。结论应用15个基因座进行亲子鉴定时,建议将二联体亲子鉴定结论的描述统一规范为排除或不排除,即检测发现三个或三个以上不符合基因座时,可以排除亲子关系;当15个短串联重复序列基因座都符合,且父权指数大于4000,不可以排除亲子关系;似然比小于4000时,建议补充另一方的样本或增加检测的基因座的个数。     

2010~2014年浙江省肿瘤登记地区女性乳腺癌发病与死亡分析

摘 要：［目的］ 分析浙江省肿瘤登记地区2010~2014年女性乳腺癌的发病和死亡情况,为开展乳腺癌的预防控制工作提供科学依据。［方法］ 根据浙江省14个肿瘤登记处上报的数据,计算并分析女性乳腺癌的发病率、死亡率及标化率等指标。［结果］ 2010~2014年浙江省肿瘤登记地区女性乳腺癌发病率为48.55/10万,城市地区（51.81/10 万）高于农村地区（40.37/10 万）。女性乳腺癌年龄别发病率随着年龄增长而增加,50～岁组达到峰顶（97.51/10万）。2010~2014 年,城乡女性乳腺癌发病率均呈上升趋势,农村涨幅高于城市。肿瘤登记地区女性乳腺癌死亡率为7.56/10万,城乡间死亡率相同均为7.56/10 万。女性乳腺癌年龄别死亡率在40岁之前处于较低水平,随后逐渐增加,在85+岁组达到顶峰（31.83/10万）。2010~2014 年,城乡女性乳腺癌死亡率呈小幅上升趋势,而农村相比城市更稳定。［结论］ 2010~2014年浙江省肿瘤登记地区女性乳腺癌发病率和死亡率呈小幅上升趋势,但乳腺癌仍是浙江省女性人群主要恶性肿瘤,应该进一步加强乳腺癌的防治。     

丙烯酰胺对斑马鱼胚胎发育过程中microRNA表达的影响

目的研究丙烯酰胺(ACR)对斑马鱼胚胎发育过程中小分子RNA(miRNA microRNA)表达的影响,探讨丙烯酰胺发育毒性机制。方法将斑马鱼胚胎分为10mmol/LACR染毒组,二甲亚砜(DMSO)组和空白对照组,分别处理受精后6 h的斑马鱼胚胎(6 hpf hours past fertilization);采用核苷酸锁定(LNA locked nucleic acid)修饰的microRNA探针进行胚胎整体原位杂交。结果10 mmol/L ACR可导致斑马鱼胚胎表现出多系统的畸形,胚胎表现出心率减慢,心包水肿,体轴缩短;胚胎整体原位杂交显示ACR诱导miRNA表达增加。结论ACR对斑马鱼胚胎发育过程中microRNA的表达有影响。     

康莱特联合顺铂诱导骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的:研究康莱特对骨肉瘤细胞的诱导凋亡作用及其相关机制,探寻骨肉瘤的中西医结合化疗方案。方法:免疫组化及RT-PCR方法检测不同浓度康莱特作用下骨肉瘤细胞的Fas表达,并将康莱特与顺铂单独及联合应用于骨肉瘤细胞,采用MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例,倒置相差显微镜、荧光显微镜及电镜下观察凋亡细胞超微结构改变。结果:康莱特可上调骨肉瘤细胞的Fas表达并诱导凋亡,康莱特浓度达到10μL/mL时,细胞抑制率不再明显改变,但与1μg/mL顺铂合用将使细胞抑制率进一步提升,P=0·000。细胞超微结构观察及凋亡率测定也显示,康莱特与顺铂联用可诱导更多骨肉瘤细胞凋亡。结论:康莱特可通过上调Fas表达诱导骨肉瘤细胞凋亡,康莱特与亚毒性剂量顺铂合用可高效杀伤骨肉瘤细胞。     

孕早期母血胎盘滋养层细胞的检测

为从孕妇血中检测和分离胎盘滋养层细胞，对５５例孕８～１４周母血中细胞滋养层Ｈ３１５和合体滋养层ＦＴ１－４１．１抗原阳性细胞分别进行了免疫细胞化学检测、流式细胞分析、荧光激活细胞分离（ＦＡＣＳ）及荧光原位杂交分析（ＦＩＳＨ）。结果在２８例和１４例孕妇外周血中分别检出了Ｈ３１５和ＦＴ１－４１．１抗原阳性细胞；而１３名怀男胎孕妇外周血Ｈ３１５阳性细胞经ＦＡＣＳ分选及Ｙ染色体探针的ＦＩＳＨ分析，其中杂交阳性细胞含量平均为１１．４±４．３％。认为：孕８～１４周母血循环中存在细胞滋养层和合体滋养层细胞，有可能利用这些细胞在孕早期对胎儿染色体非整倍性异常进行产前分子细胞遗传学诊断。     

MiR-483在人稽留流产胎盘绒毛组织中表达模式

目的研究人不同年龄阶段稽留流产(MA)胎盘绒毛组织中miR-483的表达模式,分析其与稽留流产的关系。方法通过把研究对象按照1∶1匹配的方法,将2013年1月至2014年12月期间在石家庄市第六医院进行治疗的稽留流产患者以及同期正常人工流产孕妇进行分组,即为稽留流产组(80例)和对照组(80例);依据年龄差异,将两个组别进一步分为4个亚组,依次为:年龄≤25岁组、26～30岁组、31～35岁组、≥36岁组,分别利用qRT-PCR方法和原位杂交定量和定性分析miR-483在人稽留流产胎盘绒毛组织中的表达与定位。结果 qRT-PCR检测发现与对照组相比,在≤25岁组和26～30岁组MA患者胎盘绒毛组织中miR-483的表达量均显著下调(P均0.01),在31～35岁组MA患者绒毛组织中miR-483的表达量显著增加(P0.05),在≥36岁组MA患者绒毛组织中没有明显变化。进行个体化分析发现,在≤25岁组中,100%MA患者miR-483表达显著降低(P均0.01);在26～30岁组,80%MA患者miR-483表达显著下调(P均0.05);而在31～35岁组和≥36岁组,miR-483的表达没有明显规律。原位杂交检测显示miR-483表达与胎盘绒毛合体滋养层和间质细胞。结论 miR-483在小于30岁人稽留流产患者胎盘组织中表达下调,提示其可能与稽留流产发生相关。     

P19细胞分化过程中激活型bHLH基因的表达

目的检测P19细胞分化过程中激活型碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）转录调控因子mRNA的表达,探讨其神经分化机制。方法用维甲酸（RA）诱导P19细胞分化,通过反转录聚合酶链反应（RT PCR）检测P19分化前以及分化后2、4?d时果蝇As c的哺乳动物类似物（Mash 1)、果蝇atonal的哺乳动物类似物(Math 1)、Neurological stem cell leukemia 2(Nscl 2) mRNA的表达。采用免疫印迹方法(Western blot)检测Mash 1蛋白的表达。结果Mash 1 mRNA和Nscl 2 mRNA 随分化表达升高,在分化后2?d到达顶峰后下降,Math 1 mRNA在分化后期表达明显。Mash 1蛋白的表达与mRNA的表达一致。结论P19细胞分化过程中bHLH转录因子mRNA的表达具有明显的时相性,为解释神经细胞分化调控机制提供实验基础。     

黄芩汤对LPS诱导的RAW264.7炎症细胞的抗炎作用

目的：以RAW264.7细胞为炎症模型,探究黄芩汤的抗炎作用机制。方法：制备黄芩汤,筛选对RAW264.7细胞的安全剂量;将RAW264.7细胞接种于24孔板中,先后加入黄芩汤和脂多糖（LPS）,分别采用Griess法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定一氧化氮（NO）和白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的含量;将RAW264.7细胞接种于6孔板中,设空白组、LPS组、LPS+黄芩汤组、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)抑制剂（PDTC）组、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）抑制剂（SB203580）组、细胞外信号调节激酶（ERK）抑制剂（PD98059）组、c-Jun氨基末端激酶（JNK）抑制剂（SP600125）组、Janus酪氨酸蛋白激酶（JAK）抑制剂（AG490）组,先后加入相应的抑制剂和黄芩汤,并经LPS刺激后,提取RNA和蛋白,分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测NF-κB p65、p38MAPK、ERK、JNK和JAK m...     

可乐丽菲露AP-X用于乳牙非创伤性修复的临床研究

目的分析评价采用可乐丽菲露AP-X复合树脂填充,行非创伤性修复技术(ART)治疗乳牙龋的临床疗效。方法选取2005年5月至2006年9月来沈阳市儿童医院口腔科就诊的5～8岁乳磨牙有龋齿的儿童196例316个患牙进行修复治疗,随机将患牙分为两组,均用ART清除腐质,治疗组患牙160个,用可乐丽菲露AP-X复合树脂充填;对照组患牙156个,用FX-Ⅱ玻璃离子水门汀充填。观察两组充填物的成功率、继发龋发病率情况及不同类别洞型填充物保留情况。结果随访2年后发现两种充填材料在充填物成功率及继发龋发病率方面均无显著差异(P>0.05),两种材料的Ⅰ类洞充填成功率分别为90.54%和90.28%,明显好于Ⅱ类洞(P<0.01)。结论可乐丽菲露AP-X复合树脂与FX-Ⅱ玻璃离子水门汀一样适合作ART修复龋洞的充填材料。     

Polycomb基因家族在大鼠精子发生过程中的表达

目的 检测大鼠精子发生不同阶段细胞中Polycomb-group(Pc-G)家族在mRNA水平上表达是否有差异.方法 提纯大鼠精子发生过程中的精原细胞、精母细胞、圆形精子细胞以及支持细胞,用荧光定量PCR方法检测Pc-G家族基因mRNA表达量.结果 Pc-G基因家族中Ezh2、Eed、Bmi-1在精子发生中后期高表达;在各生精细胞中,YY1基因表达量低于支持细胞.结论 Pc-G基因家族在精子发生各阶段细胞中特征性表达,与精子发生具有相关性,可能对精子发生分化和维持遗传稳定性都有重要的作用.