围术期输注改良明胶或输血对氧自由基活性影响的观察

【目的】观察围术期输注改良明胶进行血液稀释对恶性肿瘤患者氧自由基的影响。【方法】选取60例拟行肿瘤切除术的患者,估计出血量500-1000mL,随机分为两组。组A患者围术期输注改良明胶;组B病人输血。分析红细胞中铜锌超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化脂质(LPO)。组C25例为正常成人对照组。【结果】与正常对照组比较,术前阶段两组病人的SOD活性均偏低,而LPO含量均偏高(P<0.01)。组A病人术中、术后的SOD活性与LPO含量均无明显变化(P>0.05)。而组B病人SOD活性于术中显着降低(P<0.05),术后无明显差异;LPO含量于术中和术后均明显高于对照组(P<0.01)。【结论】组A病人术前扩容后血液稀释,降低了血液粘度,保证组织有充分的灌注,改善了氧自由基清除的环境条件。对于估计出血量500～1000mL的肿瘤切除术的患者,进行中等程度的血液稀释是一安全可行的方法,对继发性器官损伤具有一定的预防作用。     

抗乳铁蛋白单链抗体制备及鉴定

目的制备特异性的可溶性抗乳铁蛋白单链抗体。方法铁蛋白的单链抗体克隆,转化至大肠杆菌HB2151中进行可溶性表达。用固相化的乳铁蛋白从天然噬菌体抗体库筛选出抗乳表达产物以镍离子亲和层析法纯化,并进一步鉴定其纯度、活性等。结果成功筛选并表达了抗乳铁蛋白的单链抗体,该抗体能与乳铁蛋白特异性结合,而与转铁蛋白、溶菌酶、小牛血清白蛋白无交叉反应。结论建立了一种抗乳铁蛋白单链抗体的有效制备途径,为其进一步临床应用的研究奠定了基础。     

许旺细胞分泌的蛋白对运动神经元营养作用

目的探讨许旺细胞分泌相对分子质量为67×103蛋白对培养脊髓运动神经元营养作用.方法提纯许旺细胞分泌相对分子质量为67×103蛋白,取SD胎鼠(12～14d)脊髓腹侧运动神经元培养,鉴定,将脊髓运动神经元与不同浓度的相对分子质量为67×103蛋白液联合培养,用MTT法检测该蛋白生物活性.结果许旺细胞源性蛋白(67×103)在不同的浓度下吸光度(A)值不同,显示明显的量效关系,其最佳活性浓度为20ng/ml.结论许旺细胞分泌的相对分子质量为67×103蛋白具有维持运动神经元存活作用.     

大白鼠肝癌组织和脑组织中分枝氨基酸转氨酶同工酶Ⅲ的比较研究

DAD诱发大白鼠肝癌组织和正常脑组织中的分枝氨基酸转氨酶同工酶Ⅲ得以部分纯化。纯化倍数分别为41和49。两种组织中同工酶Ⅲ的Km值,底物特异性,最适pH值,热稳定性,巯基乙醇和谷胱甘肽的激活作用,实验结果无明显差异。肝癌组织中同工酶Ⅲ也许不是新的基因产物,该结果为外遗传理论提供了实验佐证。     

两面针碱对钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用

以钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶（ＣａＭ－ＰＤＥ）为分子模型，应用正文试验证实两面针碱（Ｎｉ－ｔｉｄｉｎｅ，Ｎｉｔ）是一种新的ＣａＭ拮抗剂。实验结果表明：①：Ｎｉｔ抑制ＣａＭ－ＰＤＥ活性ＩＣ５０为８６μｍｏｌ／Ｌ。②７５μｍｏｌ／ＬＮｉｔ对０～８０ｎｇ／ｍｌＣａＭ存在下，ＣａＭ－ＰＤＥＶｍａｘ基本不变，半激活浓度（ＡＣ５０）增大，抑制常数（Ｋｉ）为６６μｍｏｌ／Ｌ。提示Ｎｉｔ以竞争方式拮抗ＣａＭ对其靶酶（ＰＤＥ）的活化。③７５μｍｏｌ／ＬＮｉｔ对ＣａＭ－ＰＤＥ抑制动力学研究：改变底物（ｃＡＭＦ）浓度，ＣａＭ－ＰＤＥ的Ｖｍａｘ减少，米氏常数（Ｋｍ）值增大，Ｋｉ为６４μｍｏｌ／Ｌ，α＞１。提示Ｎｉｔ对ＣａＭ－ＰＤＥ的抑制作用是非竞争一竞争性混合型抑制。由此推测Ｎｉｔ可能通过与ＣａＭ竞争酶分子上的ＣａＭ结合位点从而抑制ＣａＭ－ＰＤＥ的激活活性。     

脂肪组织中IRS-1相关的PI3K活性在多囊巢综合征 胰岛素抵抗中的作用

 【目的】 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)脂肪组织胰岛素受体底物I相关的磷脂酰肌醇3激酶(IRS-1-Associcrted-PI3K)的活性在PCOS发病中的作用?【方法】 PCOS患者和对照者根据体质量指数(BMI)分为PCOS肥胖组?PCOS非肥胖组? 肥胖对照组和非肥胖对照组,各12例,采用免疫沉淀?薄层层析?放射自显影半定量检测脂肪组织IRS-1相关的PI3K活性?【结果】 脂肪组织中IRS-1- Associated PI3K 活性在PCOS肥胖组为55% ± 24%,较非肥胖对照组84% ± 16%明显降低(P < 0.001);肥胖对照组为46% ± 22%,PCOS非肥胖组为71% ± 26%,均较非肥胖对照组明显降低(P < 0.001和P < 0.05), PCOS肥胖组和肥胖对照组之间以及PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组之间的差异均无显著性意义(P > 0.05)?【结论】 PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组脂肪组织IRS-1相关的PI3K活性均较非肥胖对照组明显减弱,可能抑制胰岛素受体后的信号传导,并与PCOS胰岛素抵抗的发生有关?     

体外反搏对犬失血性休克的作用机制

【目的】探讨体外反搏治疗失血性休克的机制。【方法】动物随机分为3组假手术对照组、失血休克组及失血休克加体外反搏组。采用一侧颈总动脉插管放血制造重症失血性休克模型。实验结束时取心肌及主动脉组织测一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、腺苷三磷酸（ATP）、糖原及乳酸等指标。【结果】①反搏组反搏后平均血压显著高于反搏前,且实验结束时反搏组的血压也显著高于失血组。②假手术对照组及反搏组心肌组织NOS活性均显著高于失血休克组。③假手术对照组及反搏组心肌组织MDA含量均显著低于失血组,且SOD活性均显著高于失血组。④假手术对照组及反搏组心肌组织ATP水平也显著高于失血组。【结论】体外反搏可以增强心肌NOS活性,从而改善心肌供血,并能提高心肌对自由基的清除能力,减轻自由基损伤,同时改善心肌的能量供应。     

建立SP-A检测法测定体外循环前后猪SP-A含量变化

目的　建立肺表面活性蛋白A(SP -A)的整套检测方法 ,并以之测定体外循环前后幼猪的支气管肺泡灌洗液 (BALF)中SP -A含量。方法　灌洗新鲜猪肺取得BALF ,经过抽提、透析、离心、亲和柱层析 ,获得SP -A。以之免疫大白兔 ,得到兔抗猪SP -A抗体。使用该抗体 ,以蛋白免疫印迹反应法检测 9头幼猪在体外循环 (CPB)前、CPB 1 2 0min、CPB后 1 80min采集的BALF中SP -A含量。结果　制备出猪SP -A和兔抗猪SP -A抗体。成功测定幼猪体外循环前后BALF中SP -A含量。结论　蛋白免疫印迹反应法测定SP -A方法的建立 ,为进一步研究体外循环对表面活性蛋白乃至表面活性物质的影响打下良好基础