Ca~(2 )/CaM在植物血凝素促淋巴细胞分裂中的分子调节机理——(二)CaM对PHA有丝分裂原活性的影响

应用MTT微量自动定量比色法分析细胞的存活与增殖状况,观察钙调蛋白(CaM)对植物血球凝集素(PHA)促小鼠脾淋巴细胞分裂的影响.结果发现,细胞培养48h后,PHA加CaM的最大刺激组的吸光度(A)值比未加CaM的PHA对照组提高了46.8％(吸光度(A)值分别为0.457和0.311),CaM的最大刺激浓度为30μg/ml.结果提示,CaM参与细胞增殖的调节作用,并能显著提高PHA的促有丝分裂原作用。     

狼毒大戟的化学成分研究(Ⅱ)

狼毒大戟Euphorbia fischeriana Steud．系大戟科植物，近年临床多用于治疗肿瘤、皮肤病和结核病等。作者对狼毒大戟的化学成分进行了系统研究。本研究从狼毒大戟石油醚和乙醚萃取物中分离出3个化合物：3，3′-二乙酰基-4，4′-二甲氧基2，2′，6，6′-四羟基二苯基甲烷(Ⅰ)、富马酸(Ⅱ)和β-     

Ca~(2 )/CaM在植物血凝素促淋巴细胞分裂中的分子调节机理 (一)Ca~(2 )对PHA有丝分裂原活性的影响

实验材料为小鼠脾淋巴细胞,应用MTT微量自动比色法判断细胞分裂状况,观察植物血凝素(PHA)的促脾淋巴细胞分裂活性和Ca~(2 )的影响。结果发现,加Ca~(2 )的最大刺激组的吸光度(A)值比对照组(未加Ca~(2 )的PHA组)提高了35.4％(两组A值分别为0.390和0.288),Ca~(2 )的最大刺激浓度为4％葡萄糖酸钙。结果表明Ca~(2 )参与细胞增殖的调节,并有增强PHA的有丝分裂原活性的作用。     

PHA促淋巴细胞分裂中Ca^2＋／CaM的分子调节机理：（Ⅰ）Ca^2…

本文以小鼠脾淋巴细胞为实验材料，采用ＭＴＴ微量自动比色法判断细胞分裂状况，观察ＰＨＡ的促淋巴细胞分裂作用时Ｃａ＾２＋的影响。结果发现，加Ｃａ＾２＋的最大刺激组的光密度值比对照组提高了３５．４％葡萄Ｃａ＾２＋的最大刺激浓度为４％葡萄糖酸钙，ＥＴＡ拮抗Ｃａ＾２＋对有丝分裂原的激活作用。     

吗啡备用根大鼠脊髓组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定

目的　分离纯化吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液 ,以期获得某些神经营养活性物质。　方法　应用SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析、高效液相色谱 (HPLC)和组织培养等技术分离和检测神经营养活性物质。　结果　备用根大鼠脊髓组织提取液能够促进体外培养的鸡胚背根节 (DRG)神经突起的生长 ;吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液也具有同样的作用 ,但备用根大鼠和吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液在促神经突起生长作用方面并没有明显的差异。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液具有明显的神经营养活性作用。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液的SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析Ⅱ峰洗脱液和Ⅳ峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS PAGE分析 ,Ⅱ峰洗脱液呈现 1条分子量约为 6 5kD的蛋白质主带 ,Ⅳ峰洗脱液的蛋白质成分较为复杂。应用HPLC对凝胶层析Ⅳ峰洗脱液作进一步的分离 ,发现HPLCA峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS PAGE显示 ,A峰洗脱液的两条蛋白质主带分子量分别为 30kD和 18kD。　结论　吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液中具有神经营养活性作用的物质可能是分子量约为 6 5kD、30kD和 18kD蛋白质     

脂肪组织AR1 mRNA表达和PDK1蛋白活性在PCOS胰岛素抵抗中的作用

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)脂肪组织脂联素受体AdipoR1(AR1) mRNA表达和3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK1/PDPK1)的蛋白活性在PCOS发病中的作用.方法 PCOS患者和对照者根据体质量指数(BMI)分为PCOS肥胖组、PCOS非肥胖组、肥胖对照组和非肥胖对照组,每组12例,采用RT-PCR技术结合内对照,半定量检测PCOS及其对照组脂肪组织AR1 mRNA的表达,采用脂肪组织蛋白质的提取、SDS-Page、Western blot和增强化学发光蛋白免疫印迹法及图像分析半定量检测脂肪组织PDK1活性.结果 脂肪组织中AR1 mRNA的表达量在PCOS肥胖组(0.49±0.13)和PCOS非肥胖组(0.74±0.14)均显著低于非肥胖对照组(0.88±0.15),且以PCOS肥胖组降低更为明显(P＜0.001),PCOS肥胖组与肥胖对照组(0.60±0.17)相比差异未见统计学意义(P＞0.05).PDK1蛋白活性在PCOS肥胖组为(55.16±24.37)％,较非肥胖对照组的(84.33±15.54)％明显降低(P＜0.001);肥胖对照组为(45.95±22.18)％,PCOS非肥胖组为(71.27±26.42)％,均较非肥胖对照组明显降低(P＜0.001和P＜0.05),PCOS肥胖组和肥胖对照组之间以及PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组之间比较差异均未见统计学意义(P＞0.05).结论 PCOS两组脂肪组织AR1mRNA的表达均较非肥胖对照组降低,且以PCOS肥胖组降低更为明显,PCOS肥胖组和PCOS非肥胖组脂肪组织PDK1活性均较非肥胖对照组明显减弱,低水平的AR1可能通过下调PDK1抑制胰岛素受体后的信号传导,并与PCOS胰岛素抵抗的发生有关.     

备用根大鼠脊髓后角组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定

<正> 我室新近的研究发现,部分去传入纤维支配的脊髓后角组织提取液含有神经营养活性组份,其分子量约在40KD～78KD之间,但不清楚是那种分子量的蛋白质具有神经营养活性作用.为了寻找这种物质,本研究应用Superdex G-75prep grad凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)层析和细胞培养等技术和方法,进一步分离纯化备用根大鼠部分去传入纤维支配(手术侧)的脊髓后角组织提取液,以期获得某种神经营养活性物质.用SD雄性大鼠100只,切除其一侧L_1-L_3、L_5和L_6背根,仅保留L_4背根(此动物为备用根模型大鼠),术后5天处死动物.分别切取L1_～L_6节段的手术侧和非手术侧脊髓后角组织,制备成提取液、凝胶层析洗脱液和PHLC层拆洗脱液.结果发现,手术侧脊髓后角组织提取液具有神经营养活性作用,将该提取液经Superdex G-75prep grade凝胶层析和PHLC层析后,得到的A峰洗脱液具有促进体外培养鸡胚背根节(DRG)分离神经元存活及其神经突起生长的神经营养活性作用.经SDS-聚丙烯酸胺凝胶电泳(PAGE)显示,A峰洗脱液呈现一条分子量约为60kD的蛋白质主带.结合生物活性检测结果,我们推测分子     

备用根大鼠脊髓后角组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定

我室新近的研究发现 ,部分去传入纤维支配的脊髓后角组织提取液含有神经营养活性组份 ,其分子量约在 40 k D～78k D之间 ,但尚不清楚是哪种分子量的蛋白质具有神经营养活性作用。为了寻找这种物质 ,本研究用 Superdex G- 75prep grade凝胶层析、高效液相色谱 (HPL C)层析和细胞培养等技术和方法 ,进一步分离纯化备用根大鼠部分去传入纤维支配 (手术侧 )的脊髓后角组织提取液 ,以期获得某种神经营养活性物质。用 SD雄性大鼠 10 0只 ,切除其一侧 L 1～ L 3、L 5和 L 6背根 ,仅保留 L 4背根 (此动物为备用根模型大鼠 ) ,术后 5 d处死动物…     

小鼠H-2抗原的提取与纯化

为建立一种简易获取较大量纯化小鼠组织相容性抗原（Ｈ－２抗原）的方法，采用去污剂溶解小鼠脾细胞膜，单克隆抗体亲和层析法纯化获取小鼠Ｈ－２抗原。结果：电泳显示纯化物为４５ｋｄ（重链）和１２ｋｄ（轻链）两条带，且该纯化物具有明显的免疫学及生物学活性（效价１６４０）。结论：这种亲和层析法纯化的组织相容性抗原，可用于器官移植研究及组织相容性抗原的免疫功能研究。     

备用根大鼠脊髓后角组织神经营养活性物质的分离纯化和生 …

目的 进一步分离纯化备用根大鼠部分去传入纤维支配（手术侧）的脊髓后角组织提取液，以获得某种营养活性物质。方法 用Ｓｕｐｅｒｄｅｘ Ｇ－７５ ｐｒｅｐ ｇｒａｄｅ凝胶层析、高效液相色谱（ＨＰＬＣ）层析和细胞培养等技术分离和检测神经营养活性物质。结果 手术侧脊髓后角组织提取液经Ｓｕｐｅｒｄｅｘ Ｇ－７５ ｐｒｅｐ ｇｒａｄｅ凝胶层析和ＨＰＬＣ层析后，得到的Ａ峰洗脱液具有促进体外培养鸡胚背根节（ＤＲＧ