神经生长液合剂促进神经损伤修复实验观察

在确定含有促神经生长有效成份的单味草药的基础上,按照中医药理论组合成一种新型方剂─“神经生长液”口服液合剂。经损伤坐骨神经的ＳＤ大鼠服用后的实验结果表明,“神经生长液”口服液合剂,具有促进损伤神经恢复功能的作用。     

大鼠周围神经43kDa蛋白的生化初步分析

目的：提取大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的43kDa蛋白(PNP-43)，并对PNP-43进行生化初步分析。方法：纯化抗PNP-43单克隆抗体，将纯化的抗PNP-43单克隆抗体与CNBr-activated Sepharose 4B交联，用亲和层析的方法，提取PNP-43，并将提取的PNP-43进行十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PACE)和等电聚焦凝胶电泳(IEF)分析，考马斯亮蓝染色，取SDS-PAGE后染色的43kDa蛋白区带胶条，进行基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱检测(MALDI-TOF-MS)，测定肽质量指纹图谱，在相应的蛋白质谱数据库(MS-Fit)中检索。结果：(1)、经层析系统紫外检测，亲和层析后洗脱，在280nm波长处显示一个的紫外吸收峰。(2)、亲和层析获得的蛋白，经SDS-PAGE分析，在43．0kDa标准蛋白位置出现单一蛋白条带。(3)、经IEF。分析，PNP-43的等电点(pI)为5．8。(4)、经MALDI-TOF-MS检测，测定肽质量指纹图谱，通过MS-Fit检索未发现有与该蛋白完全相同的质谱数据。结论：用亲和层析的方法，获得了大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的PNP-43，通过质谱分析和MS-Fit检索提示未发现有与该蛋白完全相同的质谱数据。为进一步深入研究PNP-43的结构与功能提供了科学依据。     

组织工程神经修复周围神经缺损研究及其展望

长段周围神经缺损的修复和功能重建仍然是手外科、显微外科临床的难题之一,目前常采用的自体神经移植属于拆东墙补西墙式的修复方法,存在供体神经支配区永久性失神经功能障碍及供移植神经来源局限等缺点.因此,临床期盼一种能替代自体神经移植的有效治疗方法,而组织工程技术的发展促进了构建神经移植替代物修复周围神经缺损的研究与应用[1].     

体外培养的施万细胞在平面和聚乙醇酸纤维网架上的迁移

目的 观察培养的施万细胞（ＳＣｓ）在平面马聚乙醇酸（ＰＧＡ）纤维的立体网架上迁移特性。方法 用光、电镜技术观察在不同培养环境和培养时间中,ＳＣｓ在平面或立体网架上的形态变化。结果 平面上ＳＣｓ一般为长梭形,同群细胞间以突起相连接,同群细胞迁移有方向和速率一致的特征。立体网架上细胞有球形和长做形两种。细胞间也互相接触;细胞迁移速度快于平面,纤维上的长做槛形细胞块于球形细胞,长做榄形细胞长轴往往与纤维     

生后不同时期大鼠坐骨神经NGF基因的表达

采用 RT-PCR方法半定量分析生后 1、15、3 0、60、12 0和 3 60 d大鼠坐骨神经中 NGF m RNA表达的变化。结果表明 ,大鼠生后 1d坐骨神经中即有 NGF m RNA的表达 ;随着生后发育过程 ,NGF m RNA的表达量逐步增加 ,并呈严格单调上升的趋势。开始时增加速度较慢 ,但随鼠龄的增加而逐渐加快 ,至 49d时达到最快 ,然后逐渐减慢 ,到 12 0 d时已接近生后稳定表达水平。     

神经生长液治疗老年帕金森病的初步临床应用研究

目的:围绕"研发多重靶标治疗神经退行性疾病的多功能药物"的设想探讨中药神经生长液治疗老年帕金森病的初步临床应用。方法:选择典型的老年帕金森病例3例(年龄75～90岁,病程4～10年,长期服用多巴丝肼维持,YAHR分级4～5级);服用神经生长液治疗(1贴/日,30天为一疗程,间隔2～4周后进行第二疗程。重复上述2～5个疗程);观察患者的临床症状改善和多巴丝肼的减量情况。结果:3例患者在服用神经生长液2～5个疗程后,临床症状均获得不同程度的改善,多巴丝肼减量达20%～50%,YAHR分级达2～4级。结论:中药提取的神经生长液治疗老年帕金森病取得预想中的初步临床疗效,提示该中药的有效成分对人体可能有多靶点的调节和修复作用,有望成为中西医结合治疗老年帕金森病的新方法。     

β-1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ在钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化

为了观察β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ）在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化,本研究采用RT—PCR方法,从小鼠坐骨神经中特异性地扩增β-1,4-GalT-ⅠcDNA片段并将其克隆到pGEM-T载体。采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-ⅠRNA探针。通过原位杂交和图像分析的方法,观察β-1,4-GalT-ⅠmRNA在正常和夹伤大鼠坐骨神经中的表达及其变化。结果表明：β-1,4-GalT-Ⅰ mRNA在大鼠坐骨神经的髓鞘中表达,在夹伤坐骨神经后1-2d,β-1,4-GalTⅠmRNA在坐骨神经的表达最高,于夹伤后1周开始下降,在夹伤后1个月恢复至正常水平。上述结果提示坐骨神经夹伤后β-1,4-GalTⅠmRNA的表达发生变化,并且主要表达在坐骨神经的Schwann细胞。本研究结果为进一步分析β-1,4-GalT-Ⅰ在周围神经再生中的调控机制奠定了基础。     

Galβ-1,4-GlcNAc在钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化

目的:分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化.方法:采用免疫荧光和凝集素组织化学的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达定位.然后用图像分析的方法分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达变化.结果:运用免疫荧光、凝集素组织化学方法和图像分析的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在夹伤后的坐骨神经中的表达定位及变化,发现其表达在外周神经中的雪旺细胞中并于夹伤后的一周达到高峰,于夹伤后两周恢复至正常水平.结论:提示Galβ-1,4-GlcNAc在坐骨神经夹伤后发生表达变化,并且主要表达在坐骨神经的雪旺细胞中,说明Galβ-1,4-GlcNAc在周围神经再生的早期发挥着重要的作用.     

β-1,4半乳糖基转移酶-I在钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化

为了观察β-1,4-半乳糖基转移酶-I(β-1,4-galactosyltransferase-I,β-1,4-GalT-I)在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中表达的变化,本研究采用RT-PCR方法,从小鼠坐骨神经中特异性地扩增β-1,4-GalT-I cDNA片段并将其克隆到pGEM-T载体。采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA探针。通过原位杂交和图像分析的方法,观察β-1,4-GalT-I mRNA在正常和夹伤大鼠坐骨神经中的表达及其变化。结果表明:β-1,4-GalT-I mRNA在大鼠坐骨神经的髓鞘中表达,在夹伤坐骨神经后1~2d,β-1,4-GalT-I mRNA在坐骨神经的表达最高,于夹伤后1周开始下降,在夹伤后1个月恢复至正常水平。上述结果提示坐骨神经夹伤后β-1,4-GalT-I mRNA的表达发生变化,并且主要表达在坐骨神经的Schwann细胞。本研究结果为进一步分析β-1,4-GalT-I在周围神经再生中的调控机制奠定了基础。     

Myostatin:TGF-β超家族的新成员

转化生长因子13(transforming growthfactor β，TGF-β)超家族由许多编码分泌性因子的基因组成，包括：TGF-β、活化素(activin)、抑制素(inhibins)、骨形成蛋白(bone morphogenetic protein，BMPs)、缪勒氏管抑制物(mullerian inhibitor substance，MIS)等，它们在调节胚胎发育和维持组织稳态方面发挥重要作用。