高血压对大中动脉损害的判断及临床意义

高血压对大中动脉损害的判断及临床意义南京大学医学院临床学院顾伟英综述南京军区总医院心脏科江时森审校动脉血压持续缓慢升高可引起动脉管壁厚度与血管内径比值升高，有利于脂质在大中动脉内膜沉积而致动脉粥样硬化。因此高血压可加速动脉粥样硬化的发生和发展。高血压...     

实时定量PCR技术在转基因肿瘤细胞株筛选中的应用

为了探讨实时定量RTPCR技术用于筛选转基因细胞株的可行性,以转染RbAp46基因的细胞株为研究对象,利用优化的SYBRGreenI染料实时定量PCR技术检测RbAp46基因的的表达水平,并与半定量PCR及Westernblot检测结果相比较。结果表明:K562/RbAp46中RbAp46N为2064.42±253.47,KA562/CMV中RbAp46N为860.94±291.07;单克隆SHG44/RbAp46的细胞株中RbAp46N为234.46±31.08,多克隆SHG44/RbAp46的细胞株RbAp46N为18.17±5.14,SHG44/CMV为1.46±0.54。与半定量RTPCR及Westernblot检测结果比较,三者之间具有非常好的一致性。结论:实时定量RTPCR技术可以用于筛选转基因细胞株,与半定量RTPCR及Westernblot检测方法比较,具有简便、快捷、重复性好、灵敏度高且不需要后期处理等优点。     

急性髓系白血病相关基因差异表达分析并文献复习

目的 探讨急性髓系白血病（AML）相关基因表达水平在白血病发生过程中的作用,进一步阐明AML可能的发病机制.方法 采用高通量测序技术对1例急性髓系白血病部分分化型（AML-M2）患者初诊时及缓解后外周血样本进行转录组测序,统计表达基因及差异表达基因,并对差异表达基因进行基因本体论（GO）和基因所在的代谢通路（KEGG pathway）富集分析,对白血病相关基因JAK1、JAK2、TET2、ASXL1、IDH2、WT1、BCR、ABL1、JAK3、GATA2、HOXA9、FLT3、IDH1表达情况进行筛选分析.结果 该AML-M2患者外周血中WT1、BCR、ABL1、JAK3、GATA2、HOXA9、FLT3、IDH1为差异表达基因.结论 高通量测序技术可检测疾病某一时期大部分表达基因.通过初诊时及缓解期基因表达水平分析,推断个别基因除了可以通过获得性突变致病外,还可能通过差异表达在白血病发病中发挥作用.     

多发性骨髓瘤患者血清胆固醇水平的临床意义

 目的　探讨多发性骨髓瘤（MM）患者血清胆固醇水平变化及其与分型、分期的关系。方法　回顾分析65例MM患者诊断时血脂水平,包括总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白A1（Apo-A1）和载脂蛋白B（Apo-B）,探讨血脂参数与MM患者免疫球蛋白类型和临床分期关系。以健康体检者30例作为对照组。结果　65例MM患者中IgG型35例（53.85 %）,Ⅲ期41例（63.1 %）,MM患者血清TC、HDL-C、 LDL-C、Apo-A1和Apo-B明显低于对照组 （P＜0.05）,两组TG差异无统计学意义（P＞0.05）;除1例IgD型外,其余64例患者中,IgG和IgA型患者血清TC、HDL-C、LDL-C、Apo-A1和Apo-B均显著低于轻链型（P＜0.05）,TG水平在不同Ig类型患者间无差别;Ⅲ期患者血清TC、HDL-C、LDL-C和Apo-A1均显著低于Ⅰ期患者和对照组（P均＜0.05）,且Ⅱ期患者血清LDL-C 也显著低于Ⅰ期患者（P＜0.05）。结论　MM患者存在低胆固醇血症,且血清胆固醇水平与疾病分期有关。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在急性白血病患者外周血的表达

目的 初步探讨CD4 CD25 调节性T细胞在急性白血病(AL)患者外周血中的表达及其临床意义.方法 流式细胞术分别检测43例AL初诊(A组)、经化疗完全缓解(CR,B组)25例及20例健康志愿者(C组)外周血中CD4 CD25 T细胞所占比例;荧光定量RT-PCR分析各组外周血中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA的表达水平,并逐层分析比较.结果 B组CD4 CD25 T细胞比例及Foxp3含量均明显高于A、C组(P＜0.01).A组Foxp3表达明显高于C组(P＜0.01).在AL各亚型之间CD4 CD25 T细胞及Foxp3表达均无显著差异.结论 CD4 CD25 调节性T细胞在初治AL或CR患者外周血中比例增加,可能是AL免疫抑制的一个重要原因.     

活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体阳性的NK细胞对靶细胞的杀伤作用

Objective To study the killing effects of the killer cell immunoglobutin-like receptors (KIR) KIR2DS1-positive natural killer (NK) cells against acute, myeloid leukemia (AML) target cells, and to explore the KIR, human leucocyte antigen-Cw, and Cw loci (HLA-Cw) of NK cells, and, HLA-Cw of target cells mismatches destruction mechanism. Methods High-purified NK cells separated by DNYAL bead negative selection from healthy donor peripheral blood were taken as effector cells, and the freshly isolated bone marrow mononuclear cells from newly diagnosed AML patients as target cells. The anti-CD158a, CD158b monoclonal antibody was used to block inhibitory KLR receptors of NK cells (such as: KIR2DL1, KIR2DL2, KIR2DL3). The NK cells cytotoxicities against target cells before and after KIR blockades were detected by MTT reduction assay in vitro. Polymerase chain reaction and sequence specific primers (PCR-SSP) genotyping techniques were used to detect HLA-Cw, KIR gene of the healthy donors and patients. NK cells and target cells were divided into group C1 (expressing HLA-Cw 01, 03, 07, 08, 12, 14, 16 alleles), C2 group (expressing HLA-Cw 02, 04, 05, 06, 15, 17, 18 alleles) and the C1/C2 group (co-expressing the alleles in C1 group and C2 group) based on HLA-Cw. Results The purity of NK cells analyzed by flow cytometry was (90.8±6.08)%, and the killing effects of NK cells were significantly enhanced after inhibitory KIR blockades (t=-3.00, P=0.005). The cell lysis in C1 group, KIR2DS1+ NK cells against C2 group target cells (57.37±1.40)% was significantly higher than that against C1 group (44.19±4.67) % and C1/C2 group (36.77±6.56)% target cells (F= 11.87, P = 0.021), furthermore the differences in cell lysis among the above three groups become more evident after the inhibitory KIR blockades (F = 18. 72, P=0. 009). Conclusions The activity of NK cells was increased after the inhibitory KIR blockades, and the killing activities of KIR2DS1+ NK cells were higher than KIR2DS1 NK cells. The incompatibility between KIR, HLA-Cw of NK cells and HLA-Cw of target cells mediated NK alloactivation, realizing "missing self" recognition, and enabling NK cells cytotoxieity against targets.     

白血病合并实体瘤六例

例１,女,３８岁,１９９７年７月因上腹不适作胃镜示胃窦癌,遂行胃大部切除术,术后病理活检证实为胃近幽门后壁溃疡型管状腺癌。术后因高热、外周血ＷＢＣ１３．６×１０~9/Ｌ,幼稚细胞０．８０。转入血液科查骨髓像增生极度活跃,原粒占０．７９;免疫分型以髓系抗原表达为主。诊断:急性髓系白     

培门冬酶/左旋门冬酰胺酶治疗结外NK/T细胞淋巴瘤的预后因素分析：多中心回顾性研究

目的探索培门冬酶/左旋门冬酰胺酶治疗结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)的预后影响因素。方法回顾性分析自2014年3月至2021年4月在淮海淋巴瘤协作组11所医疗中心确诊的656例ENKTL患者的临床资料, 将患者按照7∶3随机分为训练集(460例)和验证集(196例)两个队列, 分析患者的预后影响因素。建立预后评分系统, 比较不同模型的预测性能。结果患者的中位年龄为46(34, 57)岁, 男456例(69.5%), 鼻部受累561例(85.5%)。203例(30.9%)患者采用了以左旋门冬酰胺酶联合蒽环类药物为基础的化疗方案, 接受P-GEMOX(培门冬酶+吉西他滨+奥沙利铂)方案治疗患者的5年总生存率优于接受SMILE(甲氨蝶呤+地塞米松+异环磷酰胺+左旋门冬酰胺酶+依托泊苷)方案的患者(85.9%对63.8%, P=0.004)。多因素分析结果显示性别、CA分期、美国东部肿瘤协作组体能状况(ECOG PS)评分、HGB、EB病毒DNA是ENKTL患者预后的独立影响因素(P值均<0.05)。基于本研究筛选出的预后因素的预测性能优于国际预后指数、韩国预后指数和自然杀伤淋巴瘤预...     

两种白血病细胞抗原负载DC的体外诱导特异性CTL应答的比较

目的: 比较树突状细胞 (DC)与白血病细胞融合及白血病细胞冻融抗原负载DC两种白血病DC疫苗诱导抗原特异性CTL应答的能力。方法: 采用羟乙基淀粉 Ficoll两步法分离外周血单个核细胞(PBMC), 通过贴壁 2h获得黏附的单核细胞, 用GM- CSF加IL- 4诱导培养 5d收获细胞。将细胞分为 4组: A组将K562细胞或原代慢性粒细胞白血病(CML)细胞在 500g/LPEG 100mL/LDMSO诱导下与DC融合; B组加入相应细胞数量的白血病细胞冻融抗原; C组将K562细胞或CML细胞与DC共培养; D组: 单独DC培养组。融合前以红色荧光染料PKH26标记K562细胞, 采用流式细胞仪(FCM)检测PKH26 /FITC 抗HLA ABC抗体双标细胞并评估融合率。培养的第 6天, 加入TNF -α诱导DC成熟, 然后分别与自体T细胞共培养, 用MTT比色法检测各组CTL对靶细胞的杀伤活性。结果: GM- CSF加IL -4和TNF- α依次诱导成熟的DC具有经典的DC的形态和表型特征, 在PEG -DMSO的介导下, DC与白血病细胞的融合率为 ( 17. 33 ~29. 94 )%。两种抗原负载方案激活的CTL均对表达K562抗原的细胞具有特异性的细胞毒作用。在效靶比相同时, 融合组诱导CTL的杀伤活性强于冻融抗原致敏DC组。结论: 与冻融抗原致敏的DC相比, DC与白血病细胞融合细胞递呈抗原的效率更高, 体外诱导的CTL特异性杀伤靶     

异基因造血干细胞移植术后患者静脉用环孢素A群体药动学研究

目的：研究并建立环孢素A（cyclosporine,CsA）静脉持续滴注方式在中国异基因造血干细胞移植术后患者中的群体药动学模型,为临床制定个体化给药方案提供依据。方法：回顾性统计了62例行异基因造血干细胞移植术的患者CsA静脉持续滴注期间的血药浓度监测结果共571例次,同时收集患者的人口学资料、临床指标及合并用药等,运用非线性混合效应模型程序建立群体药动学模型。结果：红细胞压积、术后时间以及唑类抗真菌药物的使用是影响清除率的主要协变量。最终模型为CL=θ₁·θ₂^（POD/15）·θ₃^{（HCT/0.26）}·θ₄^ⅠNHⅠ,V=θ₅。CsA清除率（CL）和分布容积（V）的群体典型值分别为28.4 L·h^-1,586.7 L,个体间变异分别为15.8%,52.3%,个体内变异系数为16.2%。Bootstrap法验证模型有效稳定,外部验证结果模型预测值与观察值有较好的相关性。贝叶斯反馈法计算患者CsA的AUC_0-24值为5.17±1.19（2.58~9.94）g·L^-1·h。结论：本研究建立的群体药动学模型可用于异基因造血干细胞移植术后患者CsA的血药浓度预测及个体参数的估算,为个体化治疗提供有效依据。