活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体阳性的NK细胞对靶细胞的杀伤作用

Objective To study the killing effects of the killer cell immunoglobutin-like receptors (KIR) KIR2DS1-positive natural killer (NK) cells against acute, myeloid leukemia (AML) target cells, and to explore the KIR, human leucocyte antigen-Cw, and Cw loci (HLA-Cw) of NK cells, and, HLA-Cw of target cells mismatches destruction mechanism. Methods High-purified NK cells separated by DNYAL bead negative selection from healthy donor peripheral blood were taken as effector cells, and the freshly isolated bone marrow mononuclear cells from newly diagnosed AML patients as target cells. The anti-CD158a, CD158b monoclonal antibody was used to block inhibitory KLR receptors of NK cells (such as: KIR2DL1, KIR2DL2, KIR2DL3). The NK cells cytotoxicities against target cells before and after KIR blockades were detected by MTT reduction assay in vitro. Polymerase chain reaction and sequence specific primers (PCR-SSP) genotyping techniques were used to detect HLA-Cw, KIR gene of the healthy donors and patients. NK cells and target cells were divided into group C1 (expressing HLA-Cw 01, 03, 07, 08, 12, 14, 16 alleles), C2 group (expressing HLA-Cw 02, 04, 05, 06, 15, 17, 18 alleles) and the C1/C2 group (co-expressing the alleles in C1 group and C2 group) based on HLA-Cw. Results The purity of NK cells analyzed by flow cytometry was (90.8±6.08)%, and the killing effects of NK cells were significantly enhanced after inhibitory KIR blockades (t=-3.00, P=0.005). The cell lysis in C1 group, KIR2DS1+ NK cells against C2 group target cells (57.37±1.40)% was significantly higher than that against C1 group (44.19±4.67) % and C1/C2 group (36.77±6.56)% target cells (F= 11.87, P = 0.021), furthermore the differences in cell lysis among the above three groups become more evident after the inhibitory KIR blockades (F = 18. 72, P=0. 009). Conclusions The activity of NK cells was increased after the inhibitory KIR blockades, and the killing activities of KIR2DS1+ NK cells were higher than KIR2DS1 NK cells. The incompatibility between KIR, HLA-Cw of NK cells and HLA-Cw of target cells mediated NK alloactivation, realizing "missing self" recognition, and enabling NK cells cytotoxieity against targets.     

K562/MDR细胞与树突细胞融合诱导P170蛋白特异的细胞毒性T淋巴细胞应答

目的通过细胞融合方法将P170抗原负载树突细胞(DC),探讨能否有效诱导P170蛋白特异的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答。方法通过贴壁黏附获得外周血单核细胞,用GM-CSF+ IL-4诱导培养DC,并以TNF-α促进DC成熟,于第7天收获DC,然后分3组:①DC与耐药细胞系K562/MDR细胞融合以负载P170抗原;②DC与K562／MDR细胞共培养;③单独DC培养。通过流式细胞术(FCM)检测PE-P170／FITC-HLA-ABC抗体双标细胞来评估融合率。将3组细胞分别与T细胞共同孵育5 d,通过MTT法比较各组T细胞对P170+靶细胞K562／MDR及HL-60／VCR的杀伤活性。结果采用PEG-DMSO诱导的DC与K562／MDR细胞的融合效率为(22．39±2．55)％,融合细胞同时表达DC表型和P170分子,HLA-ABC和P170双阳性表达率为(26．90±3．63)％,明显高于共培养组的(4．52±1．77)％,融合细胞能激活T淋巴细胞,显示出对P170+靶细胞产生抗原特异细胞毒作用,效靶比为25:1时,对K562／MDR细胞的杀伤率为(65．75±4．65)％,明显高于共培养组[(22．15±2．40)％]。结论K562／MDR与DC融合能够诱导P170蛋白特异的CTL应答,可用于多药耐药白血病的免疫治疗。     

辛伐他汀对人急性单核细胞白血病SHI-1细胞PI3K/AKT通路的影响

本研究探讨羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂辛伐他汀对人急性单核细胞白血病株(SHI-1)细胞增殖和凋亡的影响及PI3K/AKT通路变化。取对数生长期细胞,实验分为阴性对照组和辛伐他汀处理组(终浓度分别为5、10、15μmol/L),培养24、48、72 h。采用MTT法观察SHI-1细胞增殖能力;流式细胞术测定SHI-1细胞凋亡指标变化;PCR芯片研究SHI-1细胞PI3K/AKT通路84个特异性基因mRNA的差异表达。结果表明,辛伐他汀对SHI-1细胞有明显抑制增殖和促凋亡作用,呈时间与剂量依赖性。15μmol/L辛伐他汀处理SHI-1细胞24、48、72h,细胞增殖抑制率分别为26.82%、47.09%、63.92%,细胞早期凋亡率分别为5.73%、13.25%、15.59%。与对照组相比,15μmol/L辛伐他汀处理SHI-1细胞48 h组中有39个基因表达发生改变,其中26个基因表达下调、13个基因表达上调。结论:辛伐他汀能抑制SHI-1细胞增殖并诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与辛伐他汀调节PI3K/AKT通路相关基因的表达有关。     

83例原发性高血压患者颈总动脉及心脏超声检查结果分析

为了探讨原发性高血压 (EH)患者靶器官的受损情况 ,我们采用彩色多普勒超声观察了 83例 EH患者的颈动脉 (CCA)和心脏变化 ,现将结果报告如下。临床资料 :观察组为 83例 EH患者 ,男 6 4例、女 19例 ,年龄 36～ 80岁、平均 5 9± 11岁 ,病程 2个月至 40年。其中 期 2 7例 , 期 2 4例 , 期 32例。均符合 WHO制定的 EH诊断及分期标准。对照组为健康查体正常者 ,男 18例、女 4例 ,年龄 2 4～6 2岁、平均 43± 11岁。检查方法 :采用 Acdu Son- 12 8型彩色多普勒显像仪 (探头频率 7MHz) ,测量受检者 CCA近端距分叉点部位 2 cm处最大内径 …     

临床病例讨论第423例——发热、贫血、血小板增多、低蛋白血症、腹膜后肿块

 患者男,25岁。因“反复发热伴咳嗽4个月余,加重3 d”于 2011年11月5日入我院。患者自2011年7月始反复出现发热,伴咳嗽,少量咳痰,无咯血、胸痛,无呼吸困难,无乏力、盗汗,为求进一步诊治收入我院。既往史、个人史和家族史无特殊。入院体检：体温38.6℃,脉搏111次/min,呼吸20次/min,血压111/55 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）;消瘦体形;神志清楚,精神萎靡,中度贫血貌,全身黏膜无黄染,未见出血点、皮疹,全身浅表淋巴结未触及肿大;两肺呼吸音粗,未闻及干湿啰音;心脏和腹部检查未见异常;四肢检查无异常。     

白血病与实体瘤重叠发生14例

目的：探讨白血病与实体瘤重叠发生的临床特点。方法：回顾分析了我院收治的14例白血病与实体瘤重叠发生的临床资料。包括诊断、治疗及预后。结果：14例患者中。以白血病为首发起病8例。实体瘤继发白血病者2例。第2肿瘤发生前均有治疗史;同时起病者4例。结论：第2肿瘤(包括白血病和实体瘤)发生与放疗、化疗及某些反转录病毒感粢有关。免疫生物治疗可以改善预后。     

天地欣对老年糖尿病合并感染的免疫调节作用

糖尿病是与遗传、环境密切相关的代谢紊乱性疾病,老年糖尿病合并全身感染是细胞、体液免疫功能全面降低的表现.本文应用天地欣(国产香菇多糖)对老年糖尿病并感染患者进行治疗,以观察其在调节细胞免疫功能方面的作用.     

盖诺的静脉毒性及其护理

目的探讨盖诺（长春瑞滨）所致静脉炎的护理措施。方法前瞻性分析2008年1月~2010年12月本院应用含盖诺方案化疗的患者40例,用盖诺前予NS10ml＋地塞米松3mg静推,盖诺推注完后予NS10ml＋地塞米松3mg静推。PICC置管者则予以静脉滴注盖诺,无需推注地塞米松。结果观察指标：0级无疼痛;Ⅰ级局部发红,轻微疼痛;Ⅱ级轻度肿胀灼热,中度疼痛;Ⅲ级中度肿胀,重度疼痛,水泡形成,水泡直径〈1cm;Ⅳ级中度或重度肿胀,顽固性疼痛,水泡直径〉1cm,影响肢体功能。观察结果：Ⅰ级2例、Ⅱ级2例、Ⅲ级1例、Ⅳ级0例,发生率为12.5%。其中Ⅰ级、Ⅱ级共4例在一周内痊愈,Ⅲ级1例在2周痊愈。PICC置管者无一例发生静脉炎。结论在应用盖诺前后应用激素,对静脉炎的发生有较好的预防作用,推荐最好采用深静脉置管或经皮外周中心静脉置管预防盖诺引起静脉炎发生。     

小剂量沙利度胺治疗多发性骨髓瘤的临床观察

 目的 观察小剂量沙利度胺联合地塞米松和化疗治疗多发性骨髓瘤（MM）的疗效和毒副作用。方法 7例MM患者予沙利度胺口服,起始剂量50 mg／d ,至最大剂量50 ~ 300 mg,联合地塞米松或VAD方案化疗。结果 4例患者部分缓解（PR）,2例患者进步,1例患者无效,总有效率达85 %。毒副作用有嗜睡、乏力、便秘、皮疹、手足麻木,毒副反应轻。结论 小剂量沙利度胺联合地塞米松和化疗治疗MM是安全有效的。