大鼠脊神经蛋白质组研究中双向电泳技术的建立

目的探讨双向凝胶电泳技术在大鼠脊神经组织蛋白质组研究中的应用。方法应用高蛋白溶解度裂解液提取正常大鼠脊神经组织蛋白质，以固相pH梯度等电聚焦电泳和垂直板SDS-PAGE电泳结合的方法进行蛋白质的分离，使用银染和考马斯亮蓝两种方法分别对凝胶进行染色。结果正常大鼠脊神经组织样品在18cmpH3～10非线性固相pH梯度干胶条，12．5％的Acr-Bis PAGE的胶上可分离到900个左右蛋白点，不同凝胶间蛋白点平均匹配率为80％。结论实验所采用的高离液剂体系的裂解液，及对第一向和第二向电泳过程中各个因素及环节的把握，是获得大鼠脊神经组织蛋白质双向电泳图谱的关键。     

单纯性低位脊柱裂与MTHFR基因C677T多态位点的相关性研究

目的:研究N5'N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因第4外显子C677T突变在汉族先天性单纯性低位脊柱裂(SB)患者及其家庭中的多态性分布和致病相关性。方法:应用限制性片段长度多态聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术对69名低位脊柱裂患者、93名患者双亲及129名健康人的C677T多态性进行分析及部分测序鉴定。结果:脊柱裂患者、双亲、对照组两两之间的TT基因型频率差异无统计学意义(P>0.05),T等位基因频率的差异也没有统计学意义(P>0.05)。结论:MTHFR基因第4外显子的C677T突变可能不是单纯性低位脊柱裂的独立遗传致病因素,单纯性低位脊柱裂作为表型轻微的神经管畸形(neural tube defects,NTDs),遗传病因可能与其他NTDs不同。     

白木香乙酰乙酰基辅酶A硫解酶基因(AsAACT)的克隆与表达分析

目的：对国产沉香的基原植物白木香Aquilaria sinensis （Lour.）Gilg乙酰辅酶A酰基转移酶（acetyl-CoA C-acetyl transferase,AACT）基因AsAACT全长进行克隆并展开生物信息学分析和表达分析,为解析沉香萜类次生代谢产物的生物合成机制奠定基础。方法：根据获得的白木香转录组数据库AACT部分转录本序列设计引物,采用RT-PCR及RACE技术,以白木香茎cDNA为模板,克隆获得AsAACT全长,进行生物信息学分析;采用荧光定量PCR,以GADPH为内参,分析白木香愈伤组织受不同伤害胁迫AsAACT的表达模式。结果：AsAACT开放阅读框（opening reading frame,ORF）为1 236 bp,编码411个氨基酸残基,酶命名为AsAACT;白木香愈伤受物理伤害（切割）后表达量没有明显变化,但受化学伤害（MeJA）后4 h表达量升高了5.5倍,说明该基因对MeJA诱导的化学伤害较敏感,且能够在早期响应伤害胁迫。结论：通过AsAACT基因的全长cDNA克隆和表达特性分析,为后续深入研究其在沉香倍半萜合成途径的功能奠定基础。     

Intervention of nicotine on MNU-induced bladder cancer in rats

This study examined the effect of nicotine on the expression of mutant p53(mt-p53) in bladder cancer rats.The rat models of bladder cancer were established by infusing N-methyl-nitroso-urea(MNU,10 mg/kg every 2 weeks for 8 weeks) into the bladder.Pathological examination on the bladder was conducted to confirm the establishment of the model.All the bladder cancer rats were randomly divided into an MNU group and 3 nicotine groups.In the nicotine groups,the rats were intragastrically administered nicotine at different concentrations(25,15,5 mg/kg respectively) 3 times per week for 8 weeks.The mt-p53 expression was detected by the immunohistochemical method.The results showed that rat bladder cancer models developed histopathological changes of bladder transitional cell carcinoma.The positive rate of mt-p53 expression in the 3 nicotine groups(25,15,5 mg/kg) was 75.00%,58.33% and 41.67% by the 14th week,respectively,significantly higher than that in the MNU group(33.33%)(all P<0.05).The mt-p53 expression rate was positively correlated with the medication dose and time(P<0.05).It is concluded that nicotine may play an important role in the development of bladder cancer partially by increasing the expression of mt-p53.     

延边地区3～6岁睡眠障碍儿童气质特点

目的:了解3～6岁睡眠障碍儿童的气质特点,探讨提高学龄前儿童睡眠质量的有效措施。方法:应用澳大利亚悉尼大学儿童睡眠中心临床问卷的中国修订版和中国学龄前儿童气质量表(CPTS)对延边地区725名3～6岁城乡儿童的睡眠状况和气质特点进行调查。结果:E型、I-E型、I-D型、S型及D型儿童中,存在睡眠障碍者分别占20.1%、30.6%、44.3%、44.2%和43.2%;不同气质类型儿童的睡眠障碍发生率比较差异有统计学意义(P<0.05);睡眠障碍儿童的活动水平、节律性、适应性、心境、持久性及注意分散度等6个因子分值均明显高于正常儿童(P<0.05);注意分散度与睡眠时间呈明显相关(P<0.05);不同气质类型儿童之间的睡眠时间、入睡难易程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:延边地区3～6岁睡眠障碍儿童的气质类型多为I-D型、D型及S型;家长和教师应充分了解儿童的气质特点,因人施教,切实提高儿童的睡眠质量。     

输尿管-肾下盏距离在输尿管软镜治疗<2 cm肾下盏结石中的应用

目的:探讨一种新的评估方法——输尿管-肾下盏距离(ureter-lower calyx distance, ULD)在肾下盏结石患者中的运用效果。方法:回顾性分析2021年10月—2022年12月华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科收治的126例肾下盏结石患者的临床资料。所有患者均行输尿管软镜处理肾下盏结石。分析分别采用肾盂漏斗部夹角(infundibulopelvic angle, IPA)分组与ULD分组比较患者手术时间和术后清石率的差异。结果:以IPA进行分组，分为IPA>30°组和IPA≤30°组，2组手术时间和清石率比较差异有统计学有意义(P<0.05);以ULD进行分组，分为ULD>3 cm组和ULD≤3 cm组，2组手术时间和清石率比较差异有统计学意义(P<0.05)。IPA>30°组与ULD>3 cm组手术时间和清石率比较差异无统计学意义。结论:ULD作为一种全新的输尿管软镜术前评估指标，较IPA更方便简单，实用性强，值得在临床进一步推广。