TGF-β_1及CTGF在PCOS大鼠的表达及罗格列酮的干预作用

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在P-COS大鼠卵巢中的表达及罗格列酮的干预作用。方法:随机将60只雌性SD大鼠分为对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组大鼠在22日龄时用皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)法建立PCOS动物模型,治疗组从注射DHEA时起予以罗格列酮3mg/(kg.d)灌胃。第20天处死大鼠,HE染色光镜下观察大鼠卵巢的病理结构;透射电镜观察细胞超微结构;微粒子酶免分析法测定血清激素水平的变化;用免疫组织化学法测定大鼠卵巢组织TGF-β1、CTGF蛋白表达及定位,并用病理图像分析仪分析图像。结果:大鼠血清激素水平,卵巢的病理结构变化以及细胞超微结构验证模型建立成功。模型组卵巢组织TGF-β1、CTGF蛋白表达显著高于对照组(P0.05,P0.001),罗格列酮治疗后,卵巢中CTGF、TGF-β1表达水平均较模型组显著降低(P0.05,P0.001)。模型组血清TGF-β1、CTGF表达也显著高于对照组(P0.05,P0.001),罗格列酮治疗后,血清中二者水平均较模型组显著降低(P0.05,P0.001)。结论:TGF-β1及CTGF协同参与了PCOS大鼠卵巢纤维化的发生、发展过程。罗格列酮可延缓卵巢纤维化的发生发展,其与降低PCOS大鼠的CTGF、TGF-β1的表达有关。     

多重荧光定量PCR技术快速诊断唐氏综合征方法的建立及临床应用

目的:建立适合中国广东地区人群特点的唐氏综合征快速产前诊断技术,并评价其临床应用价值。方法:选取21号染色体上杂合度较高的3个短串联重复序列(STR,D21S1411、D21S1412、D21S1270)作为遗传标记,采用多重荧光定量聚合酶链反应(QF-PCR)扩增技术,对广东地区106例无亲缘关系的正常人外周血DNA进行分析,计算这3个STR位标的多态性信息含量(PIC);用该方法对25例唐氏综合征患儿外周血和10例正常孕妇羊水的DNA进行检测,并与染色体核型分析结果进行对照分析。结果:21号染色体上的3个STR(D21S1411、D21S1412、D21S1270)的PIC分别为0.913、0.835、0.856,确立了QF-PCR产前诊断唐氏综合征的方法。对25例唐氏综合征患儿外周血和10例孕妇羊水同时进行QF-PCR检测与染色体核型分析,两种方法均检测到27例唐氏综合征,结果吻合。结论:本研究所选STR位标在中国广东人群中呈现较高的遗传多态性,符合Hardy-W e inberg平衡定律;所构建的QF-PCR技术产前诊断唐氏综合征具有准确、快速、高效等特点,有较高的临床使用价值。     

热塑性聚氨酯/聚乙二醇/纳米铜复合材料的制备与表征

选择热塑性聚氨酯(polyurethane,PU)为基体材料,以聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)对基体材料进行亲水改性,用纳米铜颗粒代替铜丝或铜管等块体铜,采用机械共混的方法制备了一种全新的宫内节育器(IUD)材料——聚氨酯/聚乙二醇/纳米铜复合材料,并采用红外光谱(FTIR)分析、X射线衍射(XRD)分析、扫描电镜分析(SEM)、力学性能测试、热稳定能测试和吸水性能测试等表征方法对复合材料的结构和性能进行了表征。结果表明,纳米铜粉在基体中分散比较均匀,聚氨酯/聚乙二醇/纳米铜复合材料的拉伸强度、撕裂强度随着聚乙二醇含量的增加而下降,断裂伸长率、热稳定性和吸水性能随着聚乙二醇含量的增加而提高,吸水性能的改善为下一步复合材料铜离子的可控释放研究工作提供了很好的基础。     

梯度密度离心法与上游法在冷冻精液供精体外受精-胚胎移植术中应用比较

目的观察在使用冷冻精液的供精体外受精-胚胎移植术中采用梯度密度离心法与上游法处理精液后的妊娠率,比较两种精液处理方法对体外受精-胚胎移植术成功率的影响.方法回顾本院常规体外受精-胚胎移植术中使用冷冻供精71个周期,其中上游法35周期,梯度密度离心法36周期的资料,观察经上游法和梯度密度离心法处理后精子密度、精子总活动率、前向运动精子活动率等精液情况和受精率、卵裂率、临床妊娠率.结果梯度密度离心组在精子密度、精子总活动率、前向运动精子活动率3项指标均高于上游组,而受精率、卵裂率、临床妊娠率也是梯度密度离心组较上游组高(P＜0.01).结论在使用冷冻精液的供精体外受精-胚胎移植术中,采用梯度密度离心法处理精液优越于上游法,能获得更高的受精率和妊娠率.     

荧光定量RT-PCR技术分析人地中海贫血β654珠蛋白基因转基因小鼠mRNA的表达

目的 采用荧光定量RT-PCR技术检测所制作的人地中海贫血β^654珠蛋白基因转基因小鼠模型mRNA的表达情况,评价该技术应用于小鼠mRNA分析的价值.方法 根据GenBank小鼠mRNA序列,设计用于扩增小鼠mRNA的引物和反向探针,构建荧光定量RT-PCR技术.实验分两组,分别对转基因小鼠和正常小鼠中mRNA进行检测.采用SPSS统计软件,分析和比较两组动物中mRNA的表达量及表达的稳定性.结果 所检测的11只转基因阳性小鼠中检测出人β^654珠蛋白基因mRNA和小鼠内源性mRNA;而在33只正常小鼠中只检测到小鼠内源性mRNA.荧光定量RT-PCR技术可检测到105拷贝数的人β^654珠蛋白基因mRNA和115拷贝数的小鼠内源性mRNA.荧光定量RT-PCR技术分别在F1代和F2转基因阳性小鼠中稳定地检测到,表明转基因小鼠mRNA获得稳定表达.结论 所构建的荧光定量RT-PCR技术分析转基因小鼠mRNA表达具有检测定量、敏感、高效快捷的特点,该方法在鉴定和评估转基因小鼠mRNA的表达中稳定性好、定量准确,具有非常重要的应用价值.     

不同剂量大豆异黄酮对多囊卵巢综合征大鼠的干预效果研究

目的:探讨不同剂量的大豆异黄酮对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠的干预效果。方法:将65只雌性SD大鼠随机分为氯化钠对照组13只,PCOS模型组52只。PCOS模型组造模成功后将PCOS大鼠随机分为模型对照组、二甲双胍组、低剂量(150 mg/kg)大豆异黄酮组和高剂量(250 mg/kg)大豆异黄酮组,每组13只。持续灌胃给药干预21天,期间氯化钠对照组、PCOS模型对照组均以1 ml/100 g 0.9%氯化钠液灌胃。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清激素及IL-1β、IL-18炎症因子水平;qRT-PCR检测卵巢组织中IGF-1和AR基因的表达情况。结果:干预处理后,二甲双胍组、低剂量大豆异黄酮组和高剂量大豆异黄酮组均可恢复大鼠发情周期;3组的体质量、血糖、睾酮(T)、抗苗勒管激素(AMH)、黄体生成素/卵泡刺激素(LH/FSH)、IL-1β和IL-18水平均有显著下降(P0.05);而雌二醇(E_2)和卵泡刺激素(FSH)水平升高(P0.05);卵巢组织中IGF-1表达水平下降(P0.05);两种剂量大豆异黄酮组与二甲双胍组体质量和血糖差异无统计学意义(P0.05);高剂量大豆异黄酮组血清LH水平显著降低(P0.05);高剂量组IL-1β和IL-18水平较低剂量组显著降低(P0.05);低剂量组降调卵巢中AR表达(P0.05),而高剂量组表现为AR表达水平升高(P0.05)。结论:大豆异黄酮与二甲双胍干预PCOS可以取得同等的降体质量和血糖的作用,250 mg/kg剂量和150 mg/kg剂量的大豆异黄酮均可改善PCOS大鼠体内激素紊乱状态,改善胰岛素抵抗,恢复正常代谢,250 mg/kg剂量大豆异黄酮有更显著的抗炎作用,但会上调卵巢组织中AR表达,进而有加重高雄激素血症的可能。     

复发性流产合并甲状腺疾病的诊治

甲状腺疾病所致甲状腺功能异常是引起复发性流产的一个常见内分泌因素,近年来已成为内分泌学、生殖医学及围产医学领域研究和关注的热点之一。临床上常见的甲状腺疾病主要包括甲状腺功能亢进症、临床甲状腺功能减退症、亚临床甲状腺功能减退症及甲状腺自身免疫性疾病等。对于复发性流产合并甲状腺疾病的规范化诊治在业内尚未达成共识,故普遍存在诊断标准不一、用药不规范等现象。文章就复发性流产患者合并甲状腺疾病的诊治作一阐述。     

lncRNA H19调控TGF-β1的表达及对人卵巢颗粒细胞功能的影响

目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)颗粒细胞lncRNAH19基因和转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-β1之间的关系及对颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法分别以浓度2 μg/L、4 μg/L、10 μg/L TGF-β1处理人类卵巢颗粒细胞株KGN, 采用Q-PCR方法检测H19的表达水平, 分别构建H19过表达质粒pcDNA3.0-H19和 siH19-1617并转染KGN, 采用Western blotting方法检测TGF-β1的表达情况, 采用CCK8法检测颗粒细胞增殖情况, 采用流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡情况。结果加入TGF-β1后, H19的表达量较未处理的KGN细胞的表达量增加, 当TGF-β1浓度≥4 μg/L时H19的表达量显著增多, 差异具有统计学意义(P=0.023);H19过表达后, TGF-β1表达量显著高于转染空质粒的对照组KGN+pcDNA3.0-NC(P=0.017), H19沉默后TGF-β1表达量显著低于对照组KGN+NC(P<0.001)。H19过表...     

复发性流产的病因分析及治疗新进展

尽管复发性流产只影响了约1%～5%的育龄夫妇,但是它却极大的影响了患者的家庭幸福和心理状态。目前已知的危险因素包括遗传异常、解剖结构畸形、感染性疾病、内分泌失调、免疫因素和获得性或遗传性血栓形成倾向以及环境因素。近年,新的危险因素逐渐被人们认识,但仍有50%以上的患者病因未明。目前的治疗方法主要包括手术干预、胚胎植入前基因诊断、激素治疗、抗凝疗法和免疫调节治疗。本研究将对当前的病因和治疗新进展进行综述。     

应用西格玛进行血清ALT,Cr,Glu检测项目的性能验证

目的 应用西格玛指标评价临床生化检验性能,了解广东省计划生育系统各级计划生育机构临床生化的检验质量现状,以其发现问题,促进质量提高.方法 通过向广东省19家计划生育机构实验室发放相同批号质控品,进行丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酐（Cr）、血糖（Glu）项目的室内质控室间比对,计算各实验室室内质控结果,剔除离群值后的均值（x）、标准差（s）、室内变异系数（CV）、偏倚（bias）、西格玛（σ）值和质量目标指数（QGI）.结果 ALT,Cr和Glu大于6σ检测性能的实验室分别占16.68％,17.65％和35.29％;3≤σ＜6检测性能的实验室分别占44.44％,29.41％和35.29％.77％以上的实验室在检测ALT,Cr和Glu项目需从精密度和（或）正确度进行改进.结论 广东省计划生育机构实验室临床生化的检验性能有待提高,应用6σ评价室内质控室间比对,能将实验室的检测性能定量化,有助于检验质量的持续改进.