再次肾移植的临床特点及治疗体会

目的 分析影响再次移植肾存活率的各种因素,提高再次移植肾的长期存活率.方法 对39例再次肾移植进行回顾性分析.结果 再次肾移植术后1、3、5年移植肾存活率显著低于初次肾移植(分别为76.5%、64.2%、56.5%和87.1%、75.1%、68.2%, P<0.05);群体反应性抗体(PRA)阳性受者术后急性排斥反应发生率高于PRA阴性受者,使用抗体诱导治疗患者术后急性排斥反应发生率低于未用抗体诱导治疗患者.是否切除失功肾对再次移植肾存活率无明显影响.结论 再次移植肾存活率明显低于首次移植.个体高免疫状态是再次肾移植的危险因素,必须更加严格地进行组织配型,进行抗体诱导治疗有利于再次移植肾的存活.如没有排斥反应及并发症的发生,不主张切除原移植肾.     

人白细胞介素－2基因真核表达载体pDORIL－2的构建

目的：构建逆转录病毒载体介导的人白细胞介素－２（ＩＬ－２）基因真核细胞表达载体．方法：合成带有和表达载体克隆位点相匹配酶切位点的聚合酶链式反应（ＰＣＲ）引物，用ＰＣＲ方法从质粒ｐＨＩＧ５３中扩增出人的ＩＬ－２ｃＤＮＡ，将其定向克隆人表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ．结果：ＰＣＲ扩增出的ＩＬ－２ｃＤＮＡ片段约４７５ｂｐ，酶切鉴定该片段已被克隆人ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的多克隆位点，构建成人ＩＬ－２基因真核表达载体ｐＤＯＲＩＬ－２．结论：用ＰＣＲ扩增目的基因片断，有快速、获得量大、可改变酶切位点等优点；ｐＤＯＲＩＬ－２的构建成功，为开展基因治疗的研究打下了基础。     

肾移植术后两种免疫抑制方案的对比研究

目的 探讨两种免疫抑制方案的疗效和副作用。方法 根据肾移植术后所用免疫抑制方案将121例肾移植分为两组，CMP方案组：环孢霉素A(CsA) 霉酚酸酯(MMH) 泼尼松(Pred)，CAP方案组：CsA 硫唑嘌呤(Aza) Pred，术后观察两组移植。肾功能，排斥反应发生频率及免疫抑制剂的用量和副作用。结果 术后CMP组急性排斥反应发生率低于CAP组，而排斥反应的逆转率却高于CAP组；术后半年内CMP组CsA用量低于CAP组CAP组肝肾中毒，骨髓抑制的发生率明显低于CAP组，两组感染的发生率无明显差异。结论 肾移植术后CMP方案优于CAP方案；MMF在肾移植术后的应用，可以减少肾移植排斥反应的发生，减少药物的副作用，提高肾移植的成功率。     

塞来昔布对人膀胱肿瘤细胞株T24体外增殖和凋亡的影响

目的：研究选择性环氧化酶2（Cox-2）抑制剂塞来昔布对人膀胱肿瘤细胞株T24体外增殖和凋亡的影响。方法：常规培养的贴壁生长的T24细胞,分别与不同浓度塞来昔布、POE2等共培养,MTT法测定塞来昔布及PGE。对T24细胞增殖活性的影响,流式细胞仪测定塞来昔布及PGEz处理后T24细胞的凋亡率;建立细胞悬浮培养体系,将悬浮生长的T24细胞,分别与塞来昔布、PGE。等共培养,流式细胞仪测定塞来昔布及PGE2处理后T24细胞的凋亡率（失巢凋亡率）。结果：塞来昔布呈剂量依赖性地显著抑制贴壁生长的T24细胞的增殖、增加其凋亡,而PGE2和对贴壁生长的T24细胞增殖和凋亡无明显影响;塞来昔布显著增加而PGE2显著抑制T24的失巢凋亡。结论：选择性Cox-2抑制剂塞来昔布可显著抑制T24细胞的生长,诱导贴壁及悬浮生长状态的T24细胞产生凋亡,其可能机制之一是逆转了Cox-2产物PGE2对T24细胞的抗凋亡保护作用,包括对抗肿瘤药物及脱壁诱导的细胞凋亡的抑制作用。     

大鼠肌源性干细胞的分离、纯化和培养☆

背景：要获得满足临床需要的肌源性干细胞,体外筛选和扩增已成为关键环节。 目的：拟建立稳定高效的成年大鼠肌源性干细胞的分离培养、纯化方法。 方法：成年SD大鼠麻醉后,无菌条件下取骨骼肌,采用XI型胶原酶、Dispase和胰酶消化法获得肌源性干细胞,以密度梯度离心法和差速贴壁法进行纯化。记录细胞生长曲线,MTT比色法观察不同接种密度对细胞生长的影响,采用免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。 结果与结论：原代肌源性干细胞体积较小,贴壁缓慢,折光性较好,多呈球形、梭形或纺锤形,增殖缓慢。传代培养后,加入含体积分数为20%血清浓度的完全培养基,以1×109 L-1密度接种时活细胞数量最多,为适宜接种密度,传1~4代细胞生长状态良好。免疫细胞化学染色结果为desmin(+),CD34(+),CD45(-),Sca-1(+),证实通过体外原代培养获得了高纯度的肌源性干细胞,并成功扩增。     

人膀胱癌裸鼠移植瘤模型的建立及其血管生成的观察

目的:观察人膀胱癌裸鼠移植瘤模型的病理形态特征和血管生成情况,并为今后的研究奠定基础。方法:常规培养T24细胞,通过皮下接种建立人膀胱癌裸鼠移植肿瘤模型,并于肿瘤生长至直径0.2~0.3cm、0.5~0.8cm、1.0~1.5cm时切除肿瘤,利用HE染色观察肿瘤病理形态,利用免疫组织化学技术标记CD31阳性细胞进行微血管计数。结果:动物接种后7~10天可见肿瘤生长,4周时肿瘤直径可达1cm以上,此后肿瘤生长速度下降。切片HE染色可见肿瘤形态与人体肿瘤存在一定差异;较大肿瘤表面可见明显的血管增生及中心坏死液化。直径0.2~0.3cm肿瘤微血管密度(Microvessel density,MVD)小于较大体积肿瘤(P<0.01)。结论:动物模型肿瘤与人体肿瘤之间尚存在一定差异,有待深入研究,使其能更好地模拟人体肿瘤。本研究结果为后续研究奠定了实验基础。     

尼卡地平对肾移植受者环孢素A血浓度的影响

目的：研究尼卡地平对肾移植受者血压和环孢素A（CaA)全血谷值浓度的影响。方法：试验组62例肾移植术后肾功能恢复正常的受者服用尼卡地平，服药前后作自身对照；23例受者服用硝苯地平作为对照组，以CsA全血谷值浓度、CsA剂量、肌酐、血压作为临床评价指标。结果：试验组受者服用尼卡地平后CsA血药浓度显著升高、血压下降并维持在正常范围，与服用尼卡地平前比较，差异均有显著性意义（P＜0．01），6个月后环孢素剂量A减少达34．2％，对血肌酐无明显影响。结论：尼卡地平用于肾移植术后能有效治疗和预防高血压，并可提高CsA血药浓度，减少CsA用量和费用，并不增加CsA的毒性反应。尼卡地平与CsA合用可节省费用。     

153例肾癌术后生物化疗的临床分析

目的 :探讨肾癌切除术后生物化疗的作用。方法 :对 15 3例肾癌患者按治疗方法分为A、B、C三组 ,A组术后用白细胞介素 (IL) 2 ,B组术后用IL 2和α 干扰素 ,C组术后用IL 2、α 干扰素和氟铁龙联合治疗。结果 :通过随访比较 ,三组早期 (Ⅰ～Ⅱ期 )肾癌患者 5年生存率差异无显著性意义 ,晚期 (Ⅲ期以上 )肾癌患者 5年生存率差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :氟铁龙、IL 2和α 干扰素联合治疗对晚期肾癌有效     

DNA芯片技术筛选膀胱移行细胞癌信号转导相关基因

目的探讨人膀胱移行细胞癌信号转导相关基因的表达变化。方法使用人肿瘤基因表达谱芯片检测11例膀胱移行细胞癌组织基因表达谱的变化，以寻找与细胞信号转导相关的差异表达基因。结果以正常膀胱黏膜组织为对照，11例膀胱肿瘤组织中有87个基因表达明显下调，102个基因表达明显上调。其中与细胞信号转导相关的差异表达基因有35个，明显上调基因13个，明显下调基因22个。结论膀胱肿瘤的发生与发展与多种细胞信号转导相关基因的异常表达有关。     

肾细胞癌相关抗原及其免疫疗法的研究进展

对于晚期肾细胞癌病人,目前尚无令人满意的治疗方法,而且,由于这种疾病对化疗和放疗有着固有的抗性,所以,要使病人的症状得到缓解也很成问题。生物疗法虽然可以产生约20 %的应答率,但是这些疗法具有毒副作用,不利于提高病人的存活期[1]。用同种异基因干细胞移植进行免疫调节的尝试,结果令人鼓舞,但是由于以下两个方面的原因,使其应用受到限制[2]:(1)毒性;(2)很难找到单元型匹配的供体。所以,需要找到一种更好的治疗肾细胞癌的方法。近年来,由于肿瘤鉴定方法学的发展,越来越多的肿瘤抗原及其T细胞表位得以鉴定,再加上对肾细胞癌进化过程中免…