Annexin 5刺激大鼠睾丸Leydig细胞后的差异表达蛋白的研究

目的:研究annexin 5作用于大鼠睾丸Leydig细胞后的差异表达蛋白。方法:原代培养大鼠睾丸Leydig细胞,1 nmol/L的annexin 5处理Leydig细胞24 h,提取细胞蛋白用二维电泳分离蛋白并进行比较。选择与对照组有明显差异表达的蛋白点,进行质谱分析。结果:获得了分辨率和重复性均很好的差异蛋白图谱。筛选出的显著差异表达的50个蛋白点,共有36个蛋白点被成功鉴定,其中annexin 5处理组中高表达的为23个,低表达的为13个。结论:初步建立了annexin 5作用于大鼠睾丸Leydig细胞后的差异蛋白谱,筛选并鉴定出的这些蛋白质可能是影响睾丸Leydig细胞合成睾酮过程中的关键蛋白,研究结果为阐明annexin 5调控大鼠睾丸Leydig细胞分泌睾酮的具体机制奠定了基础。     

膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞增殖过程中Ect2表达的影响

目的研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞增殖过程中上皮细胞转化序列2癌基因(epithelial cell transfor-ming sequence 2 oncogene,Ect2)表达的影响,探讨annexin 5影响睾丸间质细胞增殖的机制。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,不同剂量的annexin 5处理后,采用MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR检测Ect2的mRNA表达改变,western blot分析睾丸间质细胞中Ect2蛋白质表达变化。结果 MTT法检测结果显示,annexin 5对大鼠睾丸间质细胞增殖有明显的促进作用,且在2～3 d呈显著的剂量-时间依赖关系(P<0.01),在第5天细胞增殖作用已明显减弱。流式细胞分析发现,1 nmol/L annexin 5作用48 h时G2/M期细胞减少为24.49%,72 h时减少为16.43%,与对照组比较差异显著(P<0.05)。RT-PCR结果表明,0.1 nmol/L组和1 nmol/L组Ect2 mRNA表达[(0.77±0.06)和(0.85±0.04)]与对照组(0.67±0.06)比较,分别增加了14.9%(P<0.05)和26.9%(P<0.01),而10 nmol/L组Ect2 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。western blot结果表明,1 nmol/L annexin 5作用组的Ect2蛋白质表达比对照组增加了20.9%[(1.50±0.15)vs(1.24±0.07),P<0.05],而0.1 nmol/L组和10 nmol/L组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 annexin 5对大鼠睾丸间质细胞增殖的促进作用是通过促进细胞周期由G2期向M期的转变来实现的。Ect2在基因和蛋白质水平均受annexin 5的影响,提示annexin 5调控睾丸间质细胞增殖可能通过增加Ect2的表达而实现。     

血清 Glycodelin-A 水平对宫腔内人工授精妊娠结局的作用

目的： Glycodelin-A是子宫内膜腺上皮细胞分泌的一种糖蛋白,其在胚胎着床以及植入期抑制母体对胚胎的免疫排斥反应、维持妊娠中发挥重要作用,并有望成为评价子宫内膜容受性、预测妊娠结局的一个重要指标。文中探讨宫腔内人工授精（ intrauterine insemination , IUI）周期中,HCG日检测血清Glycodelin-A水平与子宫内膜容受性之间的关系及其对妊娠结局的影响。方法选择2012年10月至2014年2月在南京军区南京总医院生殖医学中心门诊就诊的女性患者共107例。纳入研究条件为接受IUI治疗且须双侧输卵管检查证实通畅,排除子宫内膜病变、子宫内膜息肉以及宫腔粘连。根据妊娠结局分为妊娠组和非妊娠组。采用ELISA方法检测IUI患者HCG日血清Glycodelin-A水平,化学发光免疫法检测血清雌二醇、孕酮、黄体生成素水平,同时经阴道超声评价子宫内膜情况。结果 HCG日妊娠组血清Glycodelin-A[（1．47±0．38） ng／mL]较未妊娠组血清[（0．62±0．13）ng／mL]显著升高（P＜0．05）,子宫内膜厚度＜7 mm的患者较≥7 mm的患者HCG日血清Glycodelin-A水平显著降低[（0．51±0．17）ng／mL vs （1．53±0．49）ng／mL,P＜0．05]。结论 HCG日血清Glycodelin-A水平在一定程度上反映了子宫内膜的容受性,对IUI后妊娠结局的预测具有一定参考价值。