人发角蛋白植入大鼠损伤脊髓部位的电镜观察

目的:脊髓外伤后的继发性病理改变,是影响脊髓神经组织再生修复的重要因素。采用人发角蛋白(humanhairkeratin,HHK)植入脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)部位,以期达到减轻继发性损害,诱导和促进损伤脊髓组织的再生。方法:采用改制Ⅱ型纽约大学(NewYorkUniversity,NYU)装置,在建立大鼠脊髓损伤模型基础上,将经过特殊处理后能在体内降解的HHK植入大鼠损伤脊髓部位,对植入后1,4,12,26周的损伤脊髓组织进行电镜观察。结果:第1周为急性炎症时期,HHK周围结构紊乱,集聚大量的炎症细胞,灰质出现坏死;第4周时,炎症细胞减少,巨噬细胞吞噬髓鞘,胶质细胞增生;第12周时,多核巨噬细胞出现在HHK周围,HHK开始崩解,崩解物被多核巨细胞所吞噬;第26周时,神经轴突沿HHK间隙排列生长,灰质中神经元数量增加,HHK周边细胞有序生长。结论:植入的人发角蛋白具有诱导神经胶质细胞增生,阻止脊髓空洞的形成,从而减轻了脊髓损伤组织的继发性伤害的程度,改善了神经元再生的外环境,并可以桥接诱导神经轴突定向再生的作用。     

FUS1基因慢病毒载体的构建

目的：构建FUS1基因慢病毒载体,包装病毒,体外高效感染细胞。方法：采用PCR技术从人脐带来源的间充质干细胞中扩增出FUS1基因,并将其接入慢病毒载体pSL6-IRES-EGFP中,经PCR、酶切和测序鉴定后,与包装质粒共转染293T细胞,制备慢病毒。将病毒转染BEL7404和DLD-1细胞,观察病毒转染效果。结果：经过PCR测序鉴定,克隆了pSL6-FUS1-IRES-EGFP重组子;所包装的病毒对细胞的感染效率〉90％。结论：成功地克隆FUS1基因于慢病毒载体,制备了高效感染细胞的慢病毒。     

电子胆道镜辅助电子胃镜在空肠营养管置入术中应用1例

老年人随着年龄增长,喉部肌肉的退行性病变加重,协调性降低,进食时很容易出现反流呛咳、误吸,频繁发生肺部感染,临床上治疗非常困难.老年患者营养支持治疗是提高患者免疫力的重要手段.目前国际上采用经皮内镜胃造口术的老年患者越来越多,此种置管方法痛苦小,保留时间长,又不影响形象,患者易于接受.但有部分老年人因反流性食管炎、自身...     

电子垃圾污染区新生儿胎盘镉含量及金属硫蛋白表达水平

目的：检测贵屿电子垃圾污染区新生儿胎盘镉含量及胎盘金属硫蛋白（metallothionein,MT）表达量,评估贵屿地区新生儿镉暴露情况及对新生儿的可能影响。方法：选取贵屿当地医院妇产科2006年7~9月出生的足月健康新生儿胎盘100例为实验组,纳入研究的产妇为贵屿镇当地居民,妊娠期间在贵屿居住。取汕头市潮南民生医院妇产科2006年5~6月出生的足月健康新生儿胎盘52例为对照组,产妇来自贵屿周边乡镇。石墨炉原子吸收法检测胎盘镉含量。链霉菌素_生物素（S_P）免疫组化技术检测胎盘组织MT的表达水平。问卷调查收集可能影响镉负荷的产妇年龄、家庭、环境、健康、饮食等因素。结果：实验组新生儿胎盘镉水平的平均值为（0.17±0.48）μg/g,明显高于对照组（0.10±0.11）μg/g,差异具有统计学意义（P〈0.01）。相关分析表明产妇在贵屿居住时间、产妇妊娠期间在贵屿居住时间、产妇怀孕期间在公路附近活动时间是影响胎盘镉水平的主要因素。S_P免疫组织化学检测显示胎盘组织中蜕膜细胞、合体滋养层细胞、绒毛间质细胞均有MT的表达。实验组胎盘组织MT阳性表达率（67.00%）高于对照组（32.69%）（P〈0.01）。新生儿胎盘MT表达量与胎盘镉水平呈显著正相关（r=0.761,P〈0.05）。结论：贵屿部分新生儿处于高镉负荷状态,贵屿当地环境和从事电子垃圾作业是影响当地新生儿高镉负荷的危险因素。贵屿地区新生儿胎盘可能通过增加MT的表达拮抗镉的毒性。     

电子垃圾拆解区儿童外周血脂褐素水平的检测分析

目的:探讨电子垃圾污染和年龄因素对儿童外周血脂褐素水平的影响.方法:2019年11—12月,募集156名3～6岁儿童,平均年龄(4.74±0.84)岁,其中暴露组78名(男37名,女41名),来自汕头市贵屿镇(电子垃圾拆解区),参照组78名(男46名,女32名),来自汕头市濠江区.采集空腹肘部静脉血2 mL,用荧光定量...     

大鼠坐骨神经再生过程中的神经元轴突自噬作用

目的探讨大鼠坐骨神经变性轴突清除中的自噬作用。方法横切大鼠坐骨神经制作Wallerian变性模型,造模后不同时间点取远断端组织行电镜结构观察和酸性磷酸酶(AcPase)活性检测。结果坐骨神经横切后轴突发生变性,主要变化为术后第5小时~2天轴质肿胀,轴突与髓鞘分离,术后第4天轴质浓缩,轴突与髓鞘完全分离形成游离轴突体。术后初期变性轴突主要形成大小不等的空泡,后期轴突与髓鞘完全分离并形成较大的游离轴突体,轴突体外包一层轴突膜是神经元细胞膜的延续,轴突体轴质浓缩,含大量各级自噬泡和纵横交错的神经丝、微管和微丝。经酸性磷酸酶(AcPase)染色证实自噬泡均呈AcPase阳性,第7天后轴突体被降解吸收,形成的空腔内偶见巨噬细胞。结论大鼠坐骨神经再生过程中变性轴突的清除主要靠轴突自身的自噬和施万细胞吞噬机制,而巨噬细胞只起辅助作用。     

正交实验设计优化石墨炉原子吸收法实验条件测定脐带血铅

目的:选择石墨炉原子吸收光谱法测定脐带血铅的最佳实验条件,建立脐带血铅准确的测定方法。方法:应用L16(45)正交表安排石墨炉原子吸收光谱法测定脐带血铅时的灰化温度、灰化时间、原子化温度、原子化时间和基体改进剂浓度并进行实验,优化各项仪器操作参数,考察灰化温度、原子化温度及各项分析性能指标,包括准确度、精密度、检出限,建立测定脐带血铅的方法。结果:石墨炉原子吸收光谱法测定脐带血铅的最佳条件是:灰化温度和原子化温度分别为850℃和1350℃,灰化时间和原子化时间分别为8 s和3 s。分别测定高低加标样的相对标准偏差RSD值(n=8)在1.22%~5.23%之间,样品加标回收率在92%~107%之间,检出限为1.6μg/L。结论:利用正交试验设计优化实验条件可以提高工作质量和效率,所建立的分析方法准确、灵敏、简便可行,符合脐带血中铅的测定要求。     

人发角蛋白对冲击性大鼠脊髓损伤后神经髓鞘的影响

目的：探讨人发角蛋白对脊髓外伤性损伤后脊髓组织神经再生修复的影响。方法：本研究采用经过特殊处理后能在体内组织中降解的人发角蛋白(human hair keratin，HHK)作为植入脊髓损伤部位的桥接物，应用改制NYUⅡ型脊髓模型损伤装置，在建立大鼠脊髓冲击性损伤模型的基础上，将HHK植入损伤部位，用透射电镜进行观察植入HHK后4，12，26，52周的脊髓损伤组织。     

三维显示视皮层长时增强过程中DNA/RNA分布的定量分析

激光扫描共聚焦显微镜可对数百 μm厚的组织切片进行共聚焦扫描 ,获得连续的共聚焦平面图像系列 ,通过计算机三维重建算法得到相应组织的立体图像。本文使用 15- 2 0天龄幼年大鼠视皮层脑片的标本 ,在通氧状态下 ,用荧光探针AO染色脑片 ,激光扫描共聚焦显微镜对全脑片不同层面进行共聚焦断层扫描 ,沿纵轴每 2 0 μm扫一次 ,共扫描 16次。再利用总值方式的投影算法对其三维重建 ,得到幼年大鼠视皮层脑片的DNA/RNA分布的立体图像。     

人发角蛋白对脊髓损伤大鼠少突胶质细胞增殖分化效应的影响

目的探讨体内可降解生物材料人发角蛋白(HHK)植入急性冲击性损伤脊髓后,对神经再生过程中少突胶质细胞增殖分化效应的影响。方法采用改制Ⅱ型NYU装置,在建立大鼠急性冲击性脊髓损伤模型基础上,将经过特殊处理后能在体内降解的HHK植入大鼠脊髓损伤部位,对植入后1、4、12、26周损伤脊髓组织进行光学和电镜结构观察。结果第1周时,损伤部位可见少突胶质细胞散在分布于大量浸润的炎症细胞中;第4周时,通过Mallory's磷乌酸苏木素染色,显示HHK周边呈层包绕的增生少突胶质细胞;第12和26周主要为神经再生和髓鞘重建过程,重建中的少突胶质细胞髓鞘内出现较大的空腔,髓鞘层状分离,并形成大小不一的髓鞘小体,重建髓鞘周边可见新生的少突胶质细胞。结论在急性冲击性脊髓损伤后神经再生过程中,HHK对少突胶质细胞的增殖分化及髓鞘再生修复有积极作用,为进一步综合研究HHK对脊髓损伤修复的作用提供了实验依据。