心之络病“孙络绌急”模型大鼠血浆ET-1、TXB2、6-keto-PGF1α及AngⅡ的动态变化研究

目的探讨心之络病“孙络绌急”模型大鼠血浆微血管舒缩因子内皮素-1（ET-1）、血栓素B2（TxB2）、6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的变化规律。方法将30只雄性sD大鼠随机分为正常组、造模5min组、造模10min组、造模20min组、造模30min组。采用股静脉注射垂体后叶素（Pit）方法制备心之络病“孙络绌急”模型,正常组注射等量生理盐水。放射免疫法检测血浆ET-1、TXB2、6-keto-PGF1α、AngⅡ水平。结果与正常组比较,“孙络绌急”各模型组血浆ET-1水平均显著升高（P〈0．01）,且于5min时达到高峰。血浆TXB2在造模5min组显著升高（P〈0．01）,而在30min组其水平明显下降（P〈0．05）。血浆6-keto-PGF1α水平在造模10min后开始显著下降（P〈0．05或P〈0．01）,并在30min时达到低峰（P〈0．01）。TXB2/6-keto-PGF1α在造模后5min至20min显著升高（P〈0．01或P〈0．05）,并于5min时达到高峰,而在30min时恢复至正常水平。AngⅡ水平在造模后5min内并无显著变化,而在造模后10min开始其水平显著升高（P〈0．05）,并呈递增趋势,且于30min时达到高峰（P〈0．01）。结论微血管舒缩因子表达异常、动态平衡破坏提示微血管内皮细胞功能紊乱在“孙络绌急”急性期病理变化过程中发挥着重要作用。血浆AngⅡ显著升高亦提示肾素-血管紧张素系统（RAS系统）在“孙络绌急”早期即可被激活,从而参与并加剧缺血心肌的进一步损害。     

CYP1A1体外诱导活性评价模型的建立及其在人参皂苷筛选中的应用

目的 建立hAhR介导的CYP1A1体外诱导活性评价模型,应用于体外快速筛选通过hAhR途径介导的对CYP1A1具有激活能力的药物。方法 利用双荧光素酶报告基因系统,将CYP1A1启动子序列插入报告基因质粒上游,构建pGL4.17-CYP1A1质粒,并与含有hAhR编码区序列的pcDNA3.1-hAhR表达质粒瞬时共转染HepG2细胞, pGL4.17-control、pcDNA3.1（+）分别为pGL4.17-CYP1A1、pcDNA3.1-hAhR的空载体,建立hAhR-CYP1A1报告基因模型;应用AhR的完全激动剂TCDD（2 nmol/L）验证该报告基因模型的可靠性,应用该模型考察人参皂苷Rf、Rc、Re、Rg₁、Rb、Rd、Rh₂和Rg₃（20 μmol/L）通过hAhR途径对CYP1A1的诱导作用。结果 经验证,报告基因模型构建成功;人参皂苷Rf、Re、Rg₁和Rc对AhR具有激活作用,其中与对照组比较,人参皂苷Rg₁、Rc对AhR激活效应显著（P<0.05、0.01）,人参皂苷Rb、Rd、Rh₂和Rg₃对AhR无激活作用。结论 本研究建立基于hAhR的CYP1A1体外诱导活性评价模型,可为具有潜在CYP1A1诱导作用的目标化合物的筛选提供有效、快速的体外筛选手段,人参皂苷Rg₁、Rc对AhR-CYP1A1激活效应显著。     

冠状动脉结扎（孙络疏失）模型大鼠血浆内皮细胞活性因子及微血管舒缩因子的动态变化研究

目的探讨冠状动脉结扎（孙络疏失）模型大鼠血浆血管疏缩因子内皮素-1、血栓素B2、6-酮-前列腺素F1а、血管紧张素Ⅱ的变化规律。方法将心电图正常的60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、造模30分钟组、造模1小时组、造模6小时组、造模12小时组、造模24小时组。通过结扎大鼠冠状动脉前降支的方法造成急性心肌缺血模型（＂孙络疏失＂模型）,假手术组只穿线不结扎。放射免疫法检测血浆血管疏缩因子内皮素-1、血栓素B2、6-酮-前列腺素F1а、血管紧张素Ⅱ水平。结果经单因素方差分析LSD检验,与假手术组比较,血浆血管疏缩因子内皮素-1水平在造模1小时组、造模6小时组、造模12小时组显著升高（P〈0.05）,并于24小时恢复正常;血浆6-酮-前列腺素F1а水平在各个模型组均显著下降（P〈0.01或P〈0.05）,于12小时达到最低水平;血浆血栓素B2水平在造模6小时组显著升高（P〈0.01）,而在造模12小时组、造模24小时组明显下降（P〈0.05）;血浆血管紧张素Ⅱ在造模30分钟组、造模1小时组显著降低（P〈0.01或P〈0.05）,于1小时达到最低,而造模6小时组、造模12小时组、造模24小时组则回升至正常水平。结论微血管内皮细胞功能紊乱导致的微血管舒缩因子异常分泌、动态平衡遭到破坏,在＂孙络疏失＂急性期的病理变化过程中发挥重要作用。     

皮炎搽剂的薄层鉴别

目的皮炎搽剂的质量控制研究。方法采用TLC法对处方中苦参,蛇床子,大黄进行了薄层色谱鉴别。结果 TLC斑点清晰,易于辨别,试验结果重现性好,与相应对照品性质一致。结论所建立的方法准确可靠,专属性强,重现性好,可用于该制剂的质量控制。     

分期中药熏洗对混合痔术后创面愈合的干预研究

目的：探讨分期辨证应用中药熏洗对混合痔术后创面的影响及安全性评价。方法：80 例混合痔术后患者随机分为治疗组和对照组各 40 例。对照组应用康复新液熏洗,治疗组按疮疡祛腐期、生肌长肉期和收口敛皮期三个阶段辨证应用中药四黄祛毒汤加味熏洗。观察两组患者术后平均出院时间和平均创面完全愈合时间,以及术后创面恢复过程中第 5 天、第 10 天和第 15 天时,患者疼痛评分,创面渗出情况,创面愈合情况评分,并观察不良反应。结果：治疗组出院时间和创面完全愈合时间均短于对照组（P<0.05）。治疗组术后第 10 天较对照组疼痛评分明显降低（P<0.05）。治疗组术后第 10 天和第 15 天时创面愈合情况评分优于对照组（P<0.05）。术后第 10 天和第 15 天时,中度的创面渗出患者较轻度渗出患者的单位面积创面完全愈合时间短（P<0.05）。结论：分期辨证使用中药熏洗可有效促进混合痔术后创面愈合,且安全性好。维持中度创面渗出水平,保持创面湿润,可能更有利于创面愈合。     

祛风汤坐浴联合复方亚甲蓝注射液治疗慢性肛周湿疹的疗效

 目的 探讨祛风汤坐浴联合复方亚甲蓝注射液肛周封闭治疗慢性肛周湿疹的疗效及其可能的作用机制。方法 选择解放军总医院第一医学中心中医肛肠科2016-01至2020-12收治的慢性肛周湿疹患者100例,随机分为治疗组和对照组,每组50例。两组均采用复方亚甲蓝注射液在肛周湿疹区域封闭治疗,治疗组在此基础上采用祛风汤坐浴2周,观察两组治疗前后临床症状评分、生活质量评分、血清中白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)及血清中总免疫球蛋白E(IgE)检测值变化,评定有效率及复发率。结果 治疗后两组瘙痒、皮损(面积及形态)、生活质量评分均较治疗前有改善,差异有统计学意义(P<0. 05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组血清IL-2、IL-4、IL-10及IgE水平均较治疗前明显改善,差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组以上指标改善均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),临床疗效及治疗后第1个月复发率两组之间比较差异无统计学意义,治疗组第3、6个月复发率(4.26%、6.38%)均低于对照组(24.39%、34.15%),差异有统计学意义(P<0.05),两组患者在治疗期间均未发生严重不良反应。结论 治疗组临床疗效确切,且无严重不良反应。其作用机制可能与降低血清中IL-4、IL-10、IgE,提高IL-2水平有关。     

香砂平胃颗粒对湿阻中焦证大鼠胃肠功能的影响及机制

目的 探讨香砂平胃颗粒对湿阻中焦证大鼠胃肠功能的影响及机制。方法 将大鼠随机分成对照组、模型组、莫沙必利组（1.35 mg/kg）、洛哌丁胺组（0.36 mg/kg）和香砂平胃颗粒低、中、高剂量（0.9、1.8、3.6 g/kg）组,除对照组外,内湿（定期ig猪油、蜂蜜水）、外湿（游泳、放在潮湿垫料中饲养）结合制备湿阻中焦证动物模型,模型成功后,连续ig给药7 d。观察大鼠一般状态,采用称质量法计算大鼠胃残留率,小肠炭末推进法计算大鼠肠推进率,并利用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中胃动素、胃泌素、生长抑素和P-物质,以及炎性因子肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-10的水平,同时利用实时荧光定量RCR（qRT-PCR）技术检测大鼠结肠水通道蛋白3（AQP3）mRNA转录水平的变化。结果 与对照组比较,模型组大鼠体质量增长明显减缓,摄食量、饮水量均减少,毛色发黄、乏力、呆滞、嗜睡、大便黏腻;给予香砂平胃颗粒治疗7 d后,一般情况有所恢复,摄食量增加,体质量增长加快,大便性状有所好转。与模型组比较,香砂平胃颗粒中、高剂量组大鼠胃排空率显著增加,高剂量组小肠炭墨推进率显著增加（P<0.01、0.001）;中、高剂量组大鼠的胃动素、胃泌素和P-物质水平显著增加（P<0.01、0.001）,高剂量组生长抑素水平显著降低（P<0.01）;中、高剂量组血清TNF-α水平显著降低（P<0.01、0.001）;高剂量组大鼠的IL-10水平显著增高（P<0.01）;中、高剂量组大鼠的AQP3mRNA转录水平显著上调（P<0.05、0.001）。结论 香砂平胃颗粒可以改善湿阻中焦证大鼠的胃肠功能,机制可能与增强胃肠运动、增加胃肠激素分泌、抑制湿阻所致的消化道炎症以及促进水分从肠腔的转运相关。     

心之络病“孙络疏失”模型大鼠心肌组织病理变化研究水

目的探讨心之络病“孙络疏失”模型大鼠心肌组织病理变化特征。方法将心电图正常的30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、造模30min组、造模1h组、造模6h组、造模12h组、造模24h组。通过结扎大鼠冠状动脉前降支的方法造成急性心肌缺血模型（“孙络疏失”模型）,假手术组只穿线不结扎。采用HE染色方法观察心肌组织病理改变,透射电镜技术观察心肌细胞超微结构变化。结果（1）HE染色：30min及1h以炎性细胞浸润和部分心肌细胞坏死为主要改变,6h炎性细胞浸润最明显并伴有心肌细胞坏死溶解改变,12h和24h以心肌组织内增生改变为主,且24h炎性细胞浸润不明显。（2）透射电镜：起初仅见Z线和M线迂曲模糊、闰盘局灶性模糊、线粒体轻度肿胀等轻度病理变化,随后出现心肌细胞水肿、肌原纤维灶性溶解等变化．进一步加重出现心肌细胞坏死及血管间质内皮细胞凋亡,病变随时间推移呈逐渐加重趋势,12h最为严重。结论心之络病“孙络疏失”会导致模型大鼠心肌组织损伤和心肌组织超微结构的病理改变,这与“孙络疏失”所导致的孙络“行血气而营阴阳、内灌脏腑,外濡腠理”功能的缺失,进而引起心肌组织病理性改变的构想一致。     

冠心病心绞痛寒凝血瘀证大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达

目的:探讨冠心病心绞痛寒凝血瘀证大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达情况。方法:采用垂体后叶素大剂量静脉注射建立冠心病心绞痛寒凝血瘀证动物模型,运用TUNEL法检测细胞凋亡凋亡指数;免疫组化法检测心肌Bax、Bcl-2蛋白的表达;透射电镜观察大鼠心肌细胞的超微结构改变。结果:与正常组相比,模型组大鼠心肌细胞凋亡指数显著升高(P<0.05),Bax蛋白表达显著增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达无明显变化,Bax/Bcl-2显著升高(P<0.01),透射电镜下可见部分心肌细胞核固缩,染色质边集,线粒体聚集、肿胀,部分膜破裂,嵴降解。结论:心肌细胞凋亡参与了冠心病心绞痛寒凝血瘀证心肌缺血损伤的病理过程,Bax/Bcl-2表达失衡激活线粒体途径参与了冠心病心绞痛寒凝血瘀证心肌细胞凋亡的调控。     

Bax、Bcl-2、p53蛋白在心络绌急大鼠心肌中的表达

目的 探讨心络绌急大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2 蛋白表达情况.方法 采用垂体后叶素大剂量静脉注射建立心络绌急大鼠模型,运用TUNEL 法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化法检测心肌Bax、Bcl-2、p53 蛋白表达.结果 与正常组相比,模型组大鼠心肌细胞凋亡指数显著升高（P 〈0.01）,Bax、p53 蛋白表达显著增加（P 〈0.05 或P 〈0.01）,Bcl-2 蛋白表达无明显变化,Bax/ Bcl-2 显著升高（P 〈0.01）.结论 细胞凋亡是心络绌急心肌损伤的重要原因,p53、Bax、Bcl-2 表达的变化参与了心络绌急心肌细胞凋亡的调控.