采用组织贴壁法从整根脐带分离培养间充质干细胞及其生物学特性的研究

 为了建立从整根脐带中分离培养间充质干细胞(UC-MSCs)的技术,并对其生物学特性进行研究。采用组织贴壁法分离UC-MSCs, 并通过传代进行纯化和扩增培养, 绘制生长曲线：用流式细胞仪检测UC-MSCs表面抗原及细胞周期; 在特定诱导体系中,检测UC-MSCs向脂肪、成骨及软骨分化的能力;采用RT-PCR检测多能干细胞标志多能干细胞标志Oct4, Sox-2, Nanog mRNA水平。结果表明,　成功建立了UC-MSCs分离培养的方法;流式细胞仪检测结果显示, 贴壁细胞均表达CD73 、CD90 、CD105, 不表达造血细胞表型CD34、CD45 和HLA-DR ;细胞倍增时间为(24.04±0.49)h , 细胞周期分析表明,G0～G1 期和S+ G2 + M 期所占比例分别为81.56 %和18.44%;UC-MSCs能够向脂肪、成骨和软骨分化;表达Oct4, Sox-2, Nanog基因。结论：组织贴壁法是一种较好的分离培养UC-MSCs的方法,培养的细胞为具有增殖能力强和更原始间充质干细胞,为建立间充质干细胞库和临床应用提供了理论依据。     

改良BU/CY预处理方案行同胞相合异基因外周造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征

目的探讨改良BU/CY预处理方案行同胞相合异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效。方法收集2009年1月至2010年12月,哈尔滨血液病肿瘤研究所5例MDS进行allo-PBSCT患者。预处理方案为改良BU/CY;预防移植物抗宿主病(GVHD)采用环孢素A/甲氨蝶呤/吗替麦考酚酯(CSA/MTX/MMF)。结果 5例患者均获得移植,中性粒细胞(ANC)≥0.5×109/L的中位时间移植后12.4d(9～14d),血小板(PLT)≥20×109/L中位时间移植后13.25d(10～23d),2例出现Ⅱ度急性移植物抗宿主病(aGHVD),2例出现局限型慢性移植物抗宿主病(cGVHD),3例发生Ⅱ度口腔溃疡,发热4例,其中1例败血症,1例合并肺部感染;2例发生巨细胞病毒(CMV)血症,出血性膀胱炎(HC)2例,1例出现纯红再生性障碍性贫血;中位随访时间12.8个月(8～22个月),1例骨髓增生异常综合征-环形铁粒幼性难治性贫血(MDS-RAS)移植后7个月复发后合并肺部感染死亡,无病存活4例。结论改良BU/CY方案用于MDS移植预处理疗效较好,不良反应可以耐受,安全性好。     

不同学历实习护生择业意向及职业价值观调查

目的 了解不同学历实习护生的职业价值观及择业态度,以提出针对性的对策促进护生专业思想稳定.方法 采用自行设计的问卷调查表,对2010年度不同学历实习护生毕业前择业意向和职业价值观进行调查.结果 不同学历护生在择业意向和职业价值观方面差异均有统计学意义(P＜0.01),80.3%实习护生肯定护理工作能够体现自身的工作价值,护理大、中专生的职业价值观明显优于护理本科生;93.8%护生毕业后选择从事护理工作.结论 大部分护生专业思想稳定、职业态度积极,少数护生的职业忠诚问题客观存在,尤其是本科学历护生表现尤为明显.因此,要制定合理的人才培养方向,区分不同学历护生的实习目标;加强在校与实习期间职业价值观教育,培养良好的职业心理素质.     

提升护士一级查房水平的做法与体会

目的 探讨一级查房训练与考评的方式方法,提升护士一级查房水平.方法 对285名注册护士开展一级查房考评训练,由护士长或责任组长按照建立于护理程序基础上的<护理人员一级查房考评标准>,对管床护士个人进行的个案查房过程进行床边考评,考评结果作为护士岗位能力评价的重要指标,与岗位绩效挂钩.采用问卷法在考评对护理人员一级查房的态度、认知及病人对护理服务的满意度进行调查,同时,比较实施训练前后护士一级查房得分.结果 实施一级查房考评前后,护士对一级查房的态度、认知程度差异有统计学意义(P<0.01);查房能力明显提升,护理评估、护理问题、护理计划、措施实施与评价在实施初期与后期比较差异均有统计学意义(P<0.01);主动服务、基础护理、操作技术、健康教育等护理服务满意度提高,与实施一级查房考评前差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05).结论 开展一级查房考评,有利于护士实践与运用能力的提高,提升护士一级查房的主动性与查房水平,提高服务质量.     

羊水栓塞致孕产妇死亡29例临床分析

羊水栓塞(AFE)是少见而凶险的产科并发症,其死亡率极高达86%。本文对我省29例羊水栓塞进行全面临床分析,找出羊水栓塞的诱因,积极进行预防,并探讨其急救措施,以求降低孕产妇死亡率。1资料与方法1·1资料。收集2000年~2005年6月末吉林省辖区内9个市(州)所属县(区)孕产妇死亡报告卡,经过专家评审确诊为羊水栓塞29例,占孕产妇死亡的11·67%,为第四位死因。1·2诊断标准。既往体健,分娩过程中出现典型临床表现之一者即诊断羊水栓塞。典型临床症状:突然发生的呼吸困难、胸闷、寒战、青紫、休克、甚至呼吸、心跳停止等,还可伴有略粉红色泡沫状痰…     

米力农治疗婴幼儿先天性心脏病并肺动脉高压的疗效观察

目的 探讨米力农治疗婴幼儿先天性心脏病(CHD)并肺动脉高压 (PAH)的临床疗效及血流动力学、心功能指标的变化和意义.方法 选择广西壮族自治区人民医院2004年7月-2007年7月收治的45例婴幼儿CHD并PAH患儿.随机分为米力农治疗组(米力农组,n=25)及多巴胺加酚妥拉明治疗组(多巴胺组,n=20).米力农组予米力农0.5 μg /(kg·min);多巴胺组予多巴胺和酚妥拉明,均为5 μg/(kg·min).二组均持续静脉给药5 d,观察临床疗效、血流动力学和心功能指标变化,并进行比较.结果 米力农组用药后5 d,患儿临床症状、体征好转,血流动力学及心功能指标较治疗前显著改善(Pa<0.05),总有效率为92.0%;多巴胺组治疗前后血流动力学及心功能指标改善不明显(Pa>0.05),总有效率为75.0%.米多农组与多巴胺组治疗后临床疗效、血流动力学和心功能指标比较差异均有统计学意义(Pa<0.05).米力农组患儿心率、血压较治疗前均无显著变化(Pa>0.05),无严重心律失常发生.结论 米力农具有正性肌力和扩血管的作用,对肺血管床有选择性扩张作用,能明显改善CHD婴幼儿并PAH的心功能,降低其肺动脉压力,不影响其血压和心率,其临床疗效优于多巴胺.     

脐血间充质干细胞对T淋巴细胞增殖和激活影响的实验研究

目的研究脐血源间充质干细胞(UCB-MSCs)对T淋巴细胞激活和增殖的影响。方法2006—2007年广西壮族自治区人民医院从脐血中分离和培养间充质干细胞,流式细胞术检测其表面标志以鉴定纯度;用B r-du法测定细胞增殖率,观察UCB-MSCs对异体T淋巴细胞增殖的影响;流式细胞仪检测共培养体系中CD6 9细胞水平。结果从脐血获得的MSCs免疫表型分析显示,其不表达HLA-II抗原。对PHA刺激的脐带血T淋巴细胞,UCB-MSCs对其的增殖反应具有抑制作用,呈细胞数量剂量依赖性;UCB-MSCs与脐带血单个核细胞共培养体系中,CD 69细胞比例降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论UCB-MSCs抑制PHA刺激的T淋巴的增殖及激活,这种抑制特性表明,UCB-MSCs对免疫反应具负调节作用,可能为GVHD的防治提供一条新途径。     

血管内皮生长因子在急性白血病患者中表达的研究

目的:探讨血管内皮生长因子在急性白血病患者的表达及其与各临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学的方法检测40例自愿急性白血病患者治疗前后骨髓细胞VEGF的表达.结果:VEGF在急性白血病患者中表达明显高于对照组,治疗后缓解组VEGF表达水平明显下降.有髓外转移组VEGF表达明显高于无髓外转移组.结论:急性白血病患者中存在VEGF高表达,可能与急性白血病的发病、转移及疾病的预后有关.     

成人再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞增殖分化潜能： 与健康人的比较

背景：骨髓间充质干细胞具有成脂和成骨分化潜能,再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞可能存在成脂和成骨分化异常。 目的：观察再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞增殖及分化潜能与健康人的差异。 方法：选择哈尔滨市第一医院血液病肿瘤研究所收治的再生障碍性贫血患者5例,另选5例健康成人作为对照组;采用全骨髓培养法分离骨髓间充质干细胞。 结果与结论：采用全骨髓培养法成功分离出骨髓间充质干细胞;与对照组相比,再生障碍性贫血组骨髓间充质干细胞的细胞形态和免疫表型无显著差异,皆表达CD73、CD90、CD105,不表达CD34、CD45和HLA-DR;再生障碍性贫血组骨髓间充质干细胞增殖能力显著低于对照组(P < 0.05),成脂肪细胞分化诱导率高于对照组(P < 0.05),PPARγ mRNA和FABP4 mRNA表达量均高于对照组(P < 0.05);而成骨细胞分化诱导率低于正常对照组(P < 0.05),ALP mRNA和BGLAP mRNA表达量分别低于对照组(P < 0.05)。提示再生障碍性贫血组骨髓间充质干细胞分化潜能存在成脂肪细胞和成骨细胞分化的失衡。     

紫外线照射后生成的微囊泡对成纤维细胞氧化损伤及凋亡的作用

目的：明确对UVA及UVB照射后皮肤成纤维细胞生成的微囊泡对成纤维细胞氧化损伤及凋亡的作用。方法：紫外线照射人皮肤成纤维细胞,提取细胞上清液中的微囊泡,利用光散射分析技术鉴定分析微囊泡的大小及数量。将紫外线照射后生成的微囊泡与正常成纤维细胞共孵育,荧光酶标仪定量检测活性氧含量,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：UVA及UVB照射后皮肤成纤维细胞释放的微囊泡数量及大小明显高于正常成纤维细胞释放的微囊泡。正常纤维细胞、UVA和UVB照射后的成纤维细胞与微囊泡共孵育后活性氧荧光值分别为（52.76±1.4347）、（82.60±4.082）和（85.94±6.264）,凋亡率分别为（3.260±1.732）%,（28.94±2.430）%和（34.48±2.718）%,细胞的氧化损伤和凋亡可被抗氧化剂逆转。结论：急性中长波紫外线照射可诱导皮肤成纤维细胞释放微囊泡进一步介导细胞的氧化损伤和凋亡。